目次 | 第1-10页 |
致谢 | 第10-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-18页 |
第一章 文献综述——双生病毒的致病机制及研究进展 | 第18-43页 |
1 双生病毒的发生与危害 | 第18-19页 |
2 双生病毒的分类及其基因组结构 | 第19-25页 |
·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第20页 |
·甜菜曲顶病毒属(Curtovirus) | 第20-21页 |
·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第21页 |
·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第21-25页 |
3 与Begomoviruses伴随的小分子DNA | 第25-30页 |
·DNA1分子及其特征 | 第25-26页 |
·DNAβ分子及其特征 | 第26-29页 |
·其它相伴随的小分子DNA | 第29页 |
·双生病毒与小分子DNA形成病害复合体 | 第29-30页 |
4 双生病毒的侵染 | 第30-36页 |
·双生病毒的复制 | 第30-31页 |
·双生病毒的转录 | 第31-32页 |
·双生病毒的移动 | 第32-34页 |
·双生病毒的介体传毒 | 第34-36页 |
5 双生病毒的致病机理研究 | 第36-37页 |
6 双生病毒基因组的变异 | 第37-38页 |
7 双生病毒的检测方法 | 第38-42页 |
8 立题依据 | 第42-43页 |
第二章 材料与方法 | 第43-51页 |
1 材料 | 第43页 |
·病毒 | 第43页 |
·植物材料 | 第43页 |
·菌株和质粒 | 第43页 |
·试剂与仪器 | 第43页 |
·常用缓冲液的配制 | 第43页 |
2 方法 | 第43-51页 |
·植物总DNA提取 | 第43-44页 |
·PCR技术 | 第44页 |
·PCR产物纯化 | 第44-45页 |
·DNA克隆技术 | 第45-46页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第46-47页 |
·核苷酸序列测定与分析 | 第47页 |
·Southern blot分析 | 第47-49页 |
·侵染性克隆的转化 | 第49-50页 |
·农杆菌接种 | 第50-51页 |
第三章 番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定 | 第51-58页 |
1 材料与方法 | 第52-54页 |
·病毒分离物 | 第52页 |
·植物总DNA提取 | 第52页 |
·DNA-A全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第52-53页 |
·DNAβ分子的southern blot检测 | 第53页 |
·序列分析 | 第53-54页 |
2 结果与分析 | 第54-56页 |
·病毒基因组DNA的结构 | 第54-56页 |
·病毒基因组DNA与其它TYLCV分离物的比较 | 第56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第四章 稀莶黄脉病害复合体的分子鉴定 | 第58-73页 |
1 材料与方法 | 第58-62页 |
·病毒分离物 | 第58-59页 |
·植物总DNA提取 | 第59页 |
·DNA-A全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第59页 |
·DNA-B组分的检测 | 第59页 |
·DNAβ全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第59-60页 |
·DNA1全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第60-61页 |
·DNAβ分子的southern blot检测 | 第61页 |
·DNA1分子的southern blot检测 | 第61页 |
·序列分析 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-70页 |
·病毒基因组DNA-A的结构特征及进化分析 | 第62-65页 |
·卫星DNAβ分子的检测、结构特征和进化分析 | 第65-67页 |
·DNA1的分子鉴定、结构特征、进化分析及复合侵染检测 | 第67-70页 |
3 讨论 | 第70-73页 |
第五章 广东赛葵曲叶病毒的分子鉴定及其致病性测 | 第73-88页 |
1 材料与方法 | 第73-78页 |
·病毒分离物 | 第73-74页 |
·植物总DNA提取 | 第74页 |
·DNA-A全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第74页 |
·DNA-B组分、DNAβ和DNA1分子的检测 | 第74页 |
·DNAβ分子的southern blot检测 | 第74页 |
·DNA1分子的southern blot检测 | 第74页 |
·序列分析 | 第74-75页 |
·序列重组分析 | 第75页 |
·侵染性克隆构建 | 第75-76页 |
·农杆菌介导的植物接种 | 第76页 |
·粉虱传毒实验 | 第76页 |
·病毒DNA的检测 | 第76-78页 |
2 结果与分析 | 第78-85页 |
·病毒基因组DNA-A的结构特征及重组进化分析 | 第78-80页 |
·田间样品的DNA-B、DNAβ及DNA1检测 | 第80-82页 |
·GD6的致病性测定及GD6与DNAβ分子的互作研究 | 第82-85页 |
3 讨论 | 第85-88页 |
第六章 侵染扶桑的木尔坦曲叶病毒致病性测定 | 第88-103页 |
1 材料与方法 | 第89-96页 |
·病毒分离物 | 第89页 |
·植物总DNA提取 | 第89-90页 |
·DNA-A全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第90页 |
·DNAβ全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第90页 |
·序列分析 | 第90-92页 |
·侵染性克隆构建 | 第92-93页 |
·农杆菌介导的植物接种 | 第93-96页 |
2 结果与分析 | 第96-102页 |
·病毒基因组DNA-A的结构特征及进化分析 | 第96-98页 |
·卫星分子DNAβ的结构特征及进化分析 | 第98页 |
·GD37 DNA-A与DNAβ的致病性测定 | 第98-102页 |
3 讨论 | 第102-103页 |
第七章 广西稀莶黄脉病毒的分子鉴定 | 第103-112页 |
1 材料与方法 | 第103-105页 |
·病毒分离物 | 第103页 |
·植物总DNA提取 | 第103-104页 |
·DNA-A全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第104页 |
·DNA-B组分和DNA1分子的检测 | 第104页 |
·DNAβ全长基因组的PCR扩增、克隆和序列测定 | 第104页 |
·序列分析 | 第104-105页 |
·序列重组分析 | 第105页 |
2 结果与分析 | 第105-109页 |
·病毒基因组DNA-A的结构特征及进化分析 | 第105-107页 |
·卫星DNAβ分子的检测、结构特征和进化分析 | 第107-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
第八章 一品红曲叶病毒的致病性测定 | 第112-122页 |
1 材料与方法 | 第112-115页 |
·病毒分离物 | 第112-114页 |
·侵染性克隆构建 | 第114页 |
·农杆菌介导的植物接种 | 第114页 |
·粉虱传毒实验 | 第114-115页 |
·三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)测定 | 第115页 |
·病毒DNA的检测 | 第115页 |
2 结果与分析 | 第115-118页 |
·G35的致病性测定 | 第115-117页 |
·G35与TYLCCNV DNAβ分子的互作研究 | 第117-118页 |
3 讨论 | 第118-122页 |
全文小结 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-135页 |
附录A:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第135-136页 |
附录B:常用缓冲液及培养基配方 | 第136-140页 |
附录C:EMBL登录基因 | 第140-142页 |
附录D:作者简历及在学期间发表录用的学术论文 | 第142页 |