| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.农药和农药残留的危害 | 第11-12页 |
| 2.国内外食品农药残留的污染现状 | 第12-14页 |
| ·国外食品农药残留污染现状 | 第12页 |
| ·国内食品农药残留污染现状 | 第12-14页 |
| 3.食品中农药残留检测技术研究进展 | 第14-21页 |
| ·常规仪器检测方法 | 第14-17页 |
| ·气相色谱法(Gas Chromatography,GC) | 第14-15页 |
| ·高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) | 第15页 |
| ·超临界流体色谱(Supercritical Fluid Chromatography,简称SFC) | 第15页 |
| ·毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,简称CE) | 第15-16页 |
| ·色谱—质谱联机(GCl/LC-mass spectrometry,GC/LC-MS) | 第16页 |
| ·薄层色谱法(thin-layer Chromatography,TLC) | 第16页 |
| ·毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis,简称CZE) | 第16-17页 |
| ·农药残留快速检测方法 | 第17-21页 |
| ·酶联免疫检测法(ELISA) | 第17页 |
| ·酶抑制法 | 第17-21页 |
| ·乙酰胆碱酯酶法 | 第18-19页 |
| ·植物酯酶法 | 第19-21页 |
| 4.本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 正文 | 第22-63页 |
| 1.引言 | 第22-24页 |
| 2.材料和方法 | 第24-38页 |
| ·试验材料与主要生化试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-38页 |
| ·大豆酯酶活力测定方法 | 第25-26页 |
| ·试剂的配制 | 第25页 |
| ·α-萘酚标准曲线的绘制 | 第25页 |
| ·大豆酯酶活力测定 | 第25-26页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第26页 |
| ·大豆酯酶的粗提 | 第26页 |
| ·大豆酯酶的初步纯化 | 第26-27页 |
| ·离心方法确定 | 第26页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第26-27页 |
| ·真空冷冻干燥 | 第27页 |
| ·大豆酯酶同工酶的进一步分离纯化 | 第27-29页 |
| ·纤维素DEAE-32离子交换层析 | 第27-28页 |
| ·葡聚糖Sephadex G-100凝胶过滤层析 | 第28-29页 |
| ·大豆酯酶同工酶的纯度鉴定 | 第29-33页 |
| ·变性SDS-PAGE | 第29-32页 |
| ·非变性PAGE | 第32-33页 |
| ·大豆酯酶同工酶的生化和动力学特性研究 | 第33-34页 |
| ·大豆酯酶同工酶的相对分子量测定 | 第33页 |
| ·大豆酯酶同工酶的最适反应条件测定 | 第33页 |
| ·大豆酯酶同工酶的米氏常数K_m及最大反应速度V_(max)测定 | 第33-34页 |
| ·大豆酯酶同工酶的稳定性研究 | 第34-35页 |
| ·大豆酯酶同工酶的热稳定性测定 | 第34页 |
| ·大豆酯酶同工酶的酸碱稳定性测定 | 第34页 |
| ·大豆酯酶同工酶的保存稳定性测定 | 第34-35页 |
| ·大豆酯酶同工酶的最适保护剂研究 | 第35页 |
| ·大豆酯酶同工酶的底物特异性研究 | 第35页 |
| ·有机溶剂、金属离子、螯合剂及表面活性剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第35-36页 |
| ·常见有机溶剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第35-36页 |
| ·常见金属离子、螯合剂及表面活性剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第36页 |
| ·大豆酯酶对农药敏感性的测定方法 | 第36-38页 |
| 3.结果与分析 | 第38-59页 |
| ·大豆酯酶初步纯化条件的确定 | 第38-41页 |
| ·离心条件的确定 | 第38-41页 |
| ·初步纯化过程纯化表 | 第39-40页 |
| ·初步纯化过程的SDS-PAGE电泳及同工酶电泳鉴定 | 第40-41页 |
| ·大豆酯酶同工酶的进一步分离纯化 | 第41-45页 |
| ·纤维素DEAE-32离子交换层析 | 第41-43页 |
| ·葡聚糖Sephadex G-100凝胶过滤层析 | 第43-45页 |
| ·大豆酯酶同工酶的非变性电泳鉴定 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| ·大豆酯酶同工酶的特性研究 | 第47-54页 |
| ·大豆酯酶同工酶的生化和动力学特性研究 | 第47-49页 |
| ·大豆酯酶同工酶的相对分子量测定 | 第47-48页 |
| ·大豆酯酶同工酶的最适反应条件测定 | 第48-49页 |
| ·大豆酯酶同工酶的米氏常数K_m及最大反应速度V_(max)测定 | 第49页 |
| ·大豆酯酶同工酶的稳定性研究 | 第49-52页 |
| ·大豆酯酶同工酶的热稳定性测定 | 第49-50页 |
| ·大豆酯酶同工酶的酸碱稳定性测定 | 第50-51页 |
| ·大豆酯酶同工酶的保存稳定性测定 | 第51-52页 |
| ·大豆酯酶同工酶的底物特异性研究 | 第52页 |
| ·有机溶剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第52-53页 |
| ·金属离子对大豆酯酶同工酶的影响 | 第53页 |
| ·螯合剂及表面活性剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| ·大豆酯酶同工酶对农药敏感性的研究 | 第54-56页 |
| ·大豆酯酶同工酶的最适保护剂研究 | 第56-59页 |
| 4.讨论 | 第59-63页 |
| ·关于大豆酯酶的纯化 | 第59页 |
| ·关于大豆酯酶同工酶 | 第59页 |
| ·关于大豆酯酶同工酶的分离及性质 | 第59-60页 |
| ·关于有机溶剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第60页 |
| ·关于金属离子及螯合剂对大豆酯酶同工酶的影响 | 第60页 |
| ·关于大豆酯酶同工酶对农药的敏感性 | 第60-61页 |
| ·关于三种大豆酯酶同工酶的分类 | 第61页 |
| ·关于液态大豆酯酶保护剂的选择 | 第61-63页 |
| 第3章 结论 | 第63-65页 |
| 1.确定了大豆酯酶同工酶的分离纯化工艺路线 | 第63页 |
| 2.研究了三种大豆酯酶同工酶的理化性质和动力学特性 | 第63页 |
| 3.考察了三种大豆酯酶同工酶的稳定性和底物特异性 | 第63-64页 |
| 4.常见有机溶剂、金属离子、螯合剂及表面活性剂对三种大豆酯酶同工酶的影响 | 第64页 |
| 5.改进了分光光度法检测有机磷和氨基甲酸酯类农药的检测体系 | 第64页 |
| 6.研究了三种大豆酯酶同工酶对农药的敏感性 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第75-76页 |
