| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 小麦的穗发芽 | 第11页 |
| 2 植物的休眠 | 第11-12页 |
| 3 植物休眠在农作物中的意义 | 第12页 |
| 4 影响植物休眠的主要遗传因素 | 第12-13页 |
| ·穗发芽QTLs研究 | 第12-13页 |
| ·植物激素与休眠 | 第13页 |
| 5 种子休眠和ABA | 第13-16页 |
| ·ABA的代谢途径 | 第14-15页 |
| ·CYP707A基因家族与ABA代谢 | 第15-16页 |
| 6 ABA的效应基因与植物休眠 | 第16-17页 |
| 7 研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 8 研究技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-34页 |
| 1 试验材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌种和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 试验方法 | 第20-34页 |
| ·菌种的培养和保存 | 第20页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第20-21页 |
| ·感受态胞的制备和转化 | 第21-23页 |
| ·大肠感菌感受态细胞的制备和转化 | 第21-22页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第22-23页 |
| ·DNA片断的回收 | 第23-24页 |
| ·酶切产物的纯化 | 第23-24页 |
| ·DNA快速纯化 | 第24页 |
| ·植物总RNA提取 | 第24-25页 |
| ·PCR | 第25-26页 |
| ·rTaq PCR反应 | 第25-26页 |
| ·Phusion PCR反应 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·拟南芥基因组DNA的快速提取法 | 第27-28页 |
| ·小麦叶片DNA的提取法 | 第28页 |
| ·拟南芥种子的消毒与铺板 | 第28-29页 |
| ·拟南芥的转化 | 第29-30页 |
| ·拟南芥种子的萌发实验 | 第30页 |
| ·GUS染色 | 第30-31页 |
| ·小麦转化 | 第31-32页 |
| ·小麦种子的消毒处理 | 第31页 |
| ·小麦种子的春化 | 第31页 |
| ·农杆菌的活化 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的小麦转化 | 第32页 |
| ·转基因小麦的检测 | 第32-33页 |
| ·转基因小麦T_0植株的筛选 | 第32页 |
| ·转基因小麦T_1植株的检测 | 第32-33页 |
| ·培养基的配制 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-53页 |
| ·HvABA8' OH-1基因的互补实验 | 第34-41页 |
| ·载体构建 | 第34-37页 |
| ·AtCYP707A2基因启动子的克隆 | 第34页 |
| ·HvABA8'OH-1基因全长cDNA的扩增与克隆 | 第34-36页 |
| ·GUS基因的扩增与克隆 | 第36-37页 |
| ·拟南芥的转化及分析 | 第37-41页 |
| ·A2pro-OH1转基因拟南芥及萌发率分析 | 第37-38页 |
| ·A2-pro-GUS转基因拟南芥及表达组织分析 | 第38-41页 |
| ·HvABA8'OH-1基因RNAi载体的构建 | 第41-50页 |
| ·大麦种子Total RNA的提取 | 第41页 |
| ·pGlub启动子,Nos终止子,内含子的PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·大麦HvABA8'OH-1基因保守序列和特异序列的选取 | 第42-45页 |
| ·大麦HvABA8'OH-1基因保守序列和特异序列的RT-PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·HvABA8'OH-1基因RNAi载体的构建及验证 | 第46-50页 |
| ·农杆菌介导的小麦茎端转化及转基因小麦的鉴定 | 第50-53页 |
| ·RNAi载体转化农杆菌 | 第50页 |
| ·小麦茎尖生长点转化及其鉴定 | 第50-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-56页 |
| ·HvABA8'OH-1基因的功能验证 | 第53页 |
| ·AtCYP707A2基因启动子的组织表达特性 | 第53-54页 |
| ·提高小麦穗发芽抗性的途径 | 第54页 |
| ·小麦转化外植体的选择以及转化中存在的问题 | 第54-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 图版说明 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
