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大豆隐花色素基因的酵母双杂交分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 文献综述第9-18页
   ·植物隐花色素研究进展第9-12页
     ·隐花色素的性质第9-10页
     ·隐花色素与光的形态建成第10-11页
     ·隐花色素与其他蛋白质的相互作用第11-12页
     ·其他植物中的隐花色素第12页
   ·酵母双杂交的原理及应用第12-18页
     ·酵母双杂的原理第12-13页
     ·基本组成部分第13-14页
     ·应用第14页
     ·酵母双杂系统存在的不足第14-16页
     ·酵母双杂交的发展第16-18页
2 研究目的和意义第18-19页
3 材料与方法第19-31页
   ·菌株、质粒及药品等第19-21页
   ·引物第21页
   ·培养基及缓冲液的配制第21-24页
   ·研究流程第24-31页
     ·诱饵载体的构建第24-26页
     ·酵母菌株的表型鉴定第26页
     ·酵母菌株AH109感受态细胞的制备及载体的转化第26-27页
     ·培养基中3-AT浓度的优化第27页
     ·诱饵蛋白的自激活检测第27-28页
     ·大豆酵母双杂交文库的转化及转化效率的计算第28-29页
     ·阳性克隆的筛选第29页
     ·β-半乳糖苷酶活性的滤纸分析第29-30页
     ·酵母质粒的提取第30页
     ·大肠杆菌DH5α电转感受态细胞的制备第30-31页
     ·大肠杆菌DH5α的质粒电转第31页
     ·阳性克隆序列信息的获得及重新转化酵母进行一对一分析第31页
4 结果与分析第31-46页
   ·目的基因片段诱饵载体的构建第31-34页
     ·pGBKT7载体的结构特点第31-32页
     ·目的基因片段的扩增第32-33页
     ·目的基因片段与载体的连接与鉴定第33-34页
   ·酵母菌株的表型鉴定第34页
   ·培养基中3-AT浓度的优化第34-35页
   ·诱饵质粒的自激活检测第35-37页
   ·用pGBKT7-CRY1C作为诱饵筛选文库第37-40页
     ·文库的转化及转化效率的计算第37-38页
     ·阳性克隆的筛选第38-40页
   ·阳性克隆分析第40-46页
     ·酵母质粒的提取及阳性克隆的PCR分析第40页
     ·阳性克隆酵母质粒的电转及序列信息的获得第40-44页
     ·五个阳性克隆分别重新共转化酵母进行一对一分析第44-46页
5 讨论第46-48页
6 小结第48-50页
参考文献第50-53页
致谢第53页

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