| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| ·乳腺脂肪酸合成机理的研究进展 | 第12-16页 |
| ·乳腺的结构与功能 | 第12页 |
| ·乳腺的能量代谢 | 第12-13页 |
| ·反刍动物中乳腺组织中脂肪酸的合成 | 第13-15页 |
| ·乳腺中脂肪酸合成的种间差异 | 第15-16页 |
| ·脂肪酸合酶基因（FAS）的研究进展 | 第16-20页 |
| ·脂肪酸合酶（FAS）的概念与生理功能 | 第16-17页 |
| ·脂肪酸合酶基因的研究 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸合酶的肿瘤生物学意义 | 第18-19页 |
| ·脂肪酸合酶基因的研究现状 | 第19-20页 |
| ·RNAi 的回顾与展望 | 第20-28页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第21-23页 |
| ·RNAi 的特性和优点 | 第23页 |
| ·siRNA 的产生策略 | 第23-24页 |
| ·应用 RNAi 分析哺乳动物细胞基因功能 | 第24-28页 |
| 第二章 奶山羊乳腺上皮细胞体外分离与培养 | 第28-45页 |
| ·材料与方法 | 第28-34页 |
| ·样品采集 | 第28页 |
| ·试剂与药品 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28-29页 |
| ·鼠尾胶原的制备和使用方法 | 第29页 |
| ·细胞原代培养 | 第29-30页 |
| ·细胞传代及上皮细胞的纯化 | 第30页 |
| ·细胞的冻存与解冻复苏培养 | 第30-31页 |
| ·培养细胞生物学性状检测 | 第31页 |
| ·中期分裂相染色体的制备与核型分析 | 第31页 |
| ·用荧光免疫细胞染色法鉴定乳腺上皮细胞 | 第31-32页 |
| ·实时定量PCR 检测β-酪蛋白mRNA 水平的表达 | 第32-34页 |
| ·统计分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-41页 |
| ·鼠尾胶原对组织块培养的影响 | 第34页 |
| ·不同基础培养液对细胞原代培养的影响 | 第34-35页 |
| ·各种酶对奶山羊乳腺组织块的消化结果 | 第35-36页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·不同冻存液对奶山羊乳腺上皮细胞贴壁率的影响 | 第37-38页 |
| ·细胞生物学性状 | 第38-39页 |
| ·核型分析 | 第39页 |
| ·荧光免疫细胞染色分析细胞角蛋白5 和8 的表达 | 第39-40页 |
| ·实时定量PCR 检测β-酪蛋白mRNA 水平的表达 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-45页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞培养体系的建立 | 第41-42页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的形态学特征 | 第42-43页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的鉴定 | 第43页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的β酪蛋白表达 | 第43-45页 |
| 第三章 17β-雌二醇在奶山羊乳腺上皮细胞增殖分化中的调控作用 | 第45-57页 |
| ·材料和方法 | 第45-50页 |
| ·样品采集 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45-46页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第46页 |
| ·MTT 法检测乳腺上皮细胞增殖 | 第46页 |
| ·乳腺上皮细胞培养液中LDH 酶活性的测定 | 第46页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸合酶基因的影响 | 第46-48页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞中脂肪酸组成含量的影响 | 第48-49页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第49页 |
| ·统计分析 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-54页 |
| ·MTT 法检测雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第50页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞LDH 酶的影响 | 第50-51页 |
| ·实时定量PCR 检测脂肪酸合酶基因mRNA 水平的表达 | 第51-52页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞中脂肪酸组成含量的影响 | 第52-53页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第54页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞培养液LDH 酶活性的影响 | 第54-55页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞中脂肪酸合酶的影响 | 第55页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞中脂肪酸组成含量的影响 | 第55-56页 |
| ·雌激素对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第56-57页 |
| 第四章 沉默脂肪酸合酶基因对乳腺上皮细胞的影响 | 第57-71页 |
| ·材料和方法 | 第57-63页 |
| ·样品采集 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·设备 | 第57-58页 |
| ·主要溶液的配制 | 第58页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞获得 | 第58页 |
| ·绿色荧光蛋白载体转染奶山羊乳腺上皮细胞 | 第58-59页 |
| ·siRNAs 合成、转染及最佳浓度和有效序列的筛选 | 第59-60页 |
| ·MTT 法检测乳腺细胞的增殖 | 第60页 |
| ·乳腺上皮细胞培养液中LDH 酶活性的测定 | 第60-61页 |
| ·实时定量PCR 检测脂肪酸合酶基因的表达 | 第61页 |
| ·Western blotting 检测脂肪酸合酶的蛋白表达 | 第61-62页 |
| ·沉默脂肪酸合酶基因对奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸组成含量的影响 | 第62页 |
| ·沉默脂肪酸合酶基因对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第62-63页 |
| ·统计分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-69页 |
| ·绿色荧光蛋白载体转染奶山羊乳腺上皮细胞 | 第63页 |
| ·FAM-siRNA 转染奶山羊乳腺上皮细胞筛选最佳浓度 | 第63-64页 |
| ·siRNAs 转染奶山羊乳腺上皮细胞 | 第64-65页 |
| ·Western blotting 检测脂肪酸合酶的蛋白表达 | 第65-66页 |
| ·FAS siRNA 对奶山羊乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第66页 |
| ·转染FAS-siRNA 对奶山羊乳腺上皮细胞LDH 的影响 | 第66-67页 |
| ·转染FAS-siRNA 对奶山羊乳腺上皮细胞中脂肪酸组成含量的影响 | 第67-68页 |
| ·转染FAS-siRNA 对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·siRNA 在乳腺上皮细胞中的应用 | 第69页 |
| ·沉默脂肪酸合酶基因对奶山羊乳腺上皮细胞的影响 | 第69-70页 |
| ·沉默脂肪酸合酶基因对奶山羊乳腺上皮细胞超微结构的影响 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
