| 内容提要 | 第1-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-22页 |
| ·脂肪酶概述 | 第7-11页 |
| ·初探脂肪酶 | 第7-9页 |
| ·结构及催化机制 | 第9-11页 |
| ·有机溶剂中的脂肪酶 | 第11-13页 |
| ·有机溶剂耐受酶 | 第11页 |
| ·有机溶剂中酶的稳定性 | 第11-13页 |
| ·假单胞菌脂肪酶 | 第13-15页 |
| ·假单胞菌分类学 | 第13-14页 |
| ·假单胞菌脂肪酶的分泌机制 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶的活性表达 | 第15-16页 |
| ·表面活性剂的增溶作用 | 第16-20页 |
| ·表面活性剂的性质 | 第17-18页 |
| ·表面活性剂的分类 | 第18页 |
| ·增溶效果 | 第18-20页 |
| ·课题思路 | 第20-22页 |
| 第二章 荧光假单胞菌脂肪酶基因的克隆表达 | 第22-40页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·材料与方法 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-39页 |
| ·Pseudomonas. fluorescens JCM 5963 基因组的提取 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增产物 | 第33页 |
| ·重组质粒的构建 | 第33页 |
| ·重组质粒的转化与鉴定 | 第33-35页 |
| ·表达工程菌的鉴定与筛选 | 第35-37页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第37-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 PFL 的纯化策略 | 第40-52页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-51页 |
| ·目的蛋白的表达与纯化 | 第45-49页 |
| ·非变性电泳和活力染色 | 第49页 |
| ·凝胶过滤层析测蛋白分子 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第四章 重组脂肪酶的酶学性质 | 第52-65页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·材料与方法 | 第52-56页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-63页 |
| ·重组PFL 的脂肪酶活力 | 第56页 |
| ·重组PFL 的底物特异性 | 第56-57页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第57页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第57-59页 |
| ·动力学常数测定 | 第59页 |
| ·金属离子对酶的影响 | 第59-60页 |
| ·胆酸钠盐对酶活的影响 | 第60-61页 |
| ·有机溶剂对酶的影响 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 中文摘要 | 第73-76页 |
| Abstract | 第76-79页 |