中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一章 植物线虫生防菌及GABA支路代谢调控研究进展 | 第13-22页 |
1.1 根结线虫的发生与危害 | 第13页 |
1.2 根结线虫病的生物防治 | 第13-15页 |
1.3 委内瑞拉链霉菌Snea253研究进展 | 第15-16页 |
1.4 GABA支路研究进展 | 第16-20页 |
1.4.1 GABA支路的基本性质和代谢调控 | 第16-18页 |
1.4.2 gab基因簇的研究 | 第18页 |
1.4.3 GABA支路的生理功能 | 第18-20页 |
1.5 不同的碳氮源对生物的影响研究进展 | 第20-21页 |
1.6 问题与展望 | 第21-22页 |
第二章 过表达载体pIB139-gabT的构建 | 第22-35页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 菌株、载体和根结线虫 | 第22页 |
2.1.2 试验仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.3 试验试剂 | 第23页 |
2.1.4 试验所用培养基 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-30页 |
2.2.1 菌株的培养 | 第24页 |
2.2.2 委内瑞拉链霉菌Snea253总DNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.3 基因gabT的克隆 | 第25-28页 |
2.2.4 过表达载体pIB139-gabT的构建 | 第28-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-34页 |
2.3.1 Snea253野生型菌株总DNA提取 | 第30-31页 |
2.3.2 目的基因gabT的扩增 | 第31-32页 |
2.3.3 质粒pGEM-gabT的提取与酶切鉴定 | 第32页 |
2.3.4 表达载体pIB139-gabT的构建 | 第32-34页 |
2.4 小结 | 第34-35页 |
第三章 过表达gabT基因调控Snea253的GABA代谢途径分析 | 第35-48页 |
3.1 材料 | 第35-36页 |
3.1.1 菌种与线虫 | 第35页 |
3.1.2 试验仪器设备 | 第35页 |
3.1.3 试验试剂 | 第35-36页 |
3.1.4 培养基与缓冲液 | 第36页 |
3.2 试验方法 | 第36-42页 |
3.2.1 菌株 Snea253 原生质体的制备 | 第36-37页 |
3.2.2 过表达菌株 R-pIB139 的获得 | 第37页 |
3.2.3 过表达菌株R-pIB139的培养 | 第37-38页 |
3.2.4 gabT 基因 RT-qPCR 检测 | 第38-40页 |
3.2.5 发酵液中GABA和琥珀酸含量的检测 | 第40-42页 |
3.2.6 杀线虫活性检测 | 第42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-47页 |
3.3.1 过表达菌株R-pIB139中gabT基因的表达量检测 | 第42-44页 |
3.3.2 Snea253-R和 R-pIB139中GABA含量检测 | 第44-45页 |
3.3.3 Snea253-R和 R-pIB139 中琥珀酸含量检测 | 第45-47页 |
3.4 小结 | 第47-48页 |
第四章 碳源对gabT基因调控Snea253 代谢的影响 | 第48-54页 |
4.1 材料 | 第48页 |
4.1.1 供试菌株 | 第48页 |
4.1.2 试验仪器 | 第48页 |
4.1.3 试验试剂 | 第48页 |
4.1.4 主要培养基 | 第48页 |
4.2 试验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 碳源优化培养基的制备 | 第48-49页 |
4.2.2 菌株的培养 | 第49页 |
4.2.3 不同碳源对gabT基因表达量的影响 | 第49页 |
4.2.4 发酵液中GABA和琥珀酸的含量检测 | 第49页 |
4.2.5 不同碳源培养的Snea253杀线虫活性检测 | 第49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
4.3.1 不同碳源对gabT基因表达量的影响 | 第49-50页 |
4.3.2 不同碳源发酵液中GABA和琥珀酸的含量检测 | 第50-52页 |
4.3.3 不同碳源培养的Snea253杀线虫活性检测 | 第52-53页 |
4.4 小结 | 第53-54页 |
第五章 结论与讨论 | 第54-57页 |
5.1 过表达载体pIB139-gabT的构建 | 第54页 |
5.2 gabT基因代谢调控GABA代谢途径分析 | 第54-55页 |
5.3 碳源对gabT基因调控Snea253 代谢的影响 | 第55-56页 |
5.4 问题与展望 | 第56-57页 |
附录 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读硕士期间发表的学术论文情况 | 第68-69页 |