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gabT调控Snea253菌株的GABA代谢途径影响杀线虫活性研究

中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
前言第12-13页
第一章 植物线虫生防菌及GABA支路代谢调控研究进展第13-22页
    1.1 根结线虫的发生与危害第13页
    1.2 根结线虫病的生物防治第13-15页
    1.3 委内瑞拉链霉菌Snea253研究进展第15-16页
    1.4 GABA支路研究进展第16-20页
        1.4.1 GABA支路的基本性质和代谢调控第16-18页
        1.4.2 gab基因簇的研究第18页
        1.4.3 GABA支路的生理功能第18-20页
    1.5 不同的碳氮源对生物的影响研究进展第20-21页
    1.6 问题与展望第21-22页
第二章 过表达载体pIB139-gabT的构建第22-35页
    2.1 材料第22-24页
        2.1.1 菌株、载体和根结线虫第22页
        2.1.2 试验仪器设备第22-23页
        2.1.3 试验试剂第23页
        2.1.4 试验所用培养基第23-24页
    2.2 试验方法第24-30页
        2.2.1 菌株的培养第24页
        2.2.2 委内瑞拉链霉菌Snea253总DNA的提取第24-25页
        2.2.3 基因gabT的克隆第25-28页
        2.2.4 过表达载体pIB139-gabT的构建第28-30页
    2.3 结果与分析第30-34页
        2.3.1 Snea253野生型菌株总DNA提取第30-31页
        2.3.2 目的基因gabT的扩增第31-32页
        2.3.3 质粒pGEM-gabT的提取与酶切鉴定第32页
        2.3.4 表达载体pIB139-gabT的构建第32-34页
    2.4 小结第34-35页
第三章 过表达gabT基因调控Snea253的GABA代谢途径分析第35-48页
    3.1 材料第35-36页
        3.1.1 菌种与线虫第35页
        3.1.2 试验仪器设备第35页
        3.1.3 试验试剂第35-36页
        3.1.4 培养基与缓冲液第36页
    3.2 试验方法第36-42页
        3.2.1 菌株 Snea253 原生质体的制备第36-37页
        3.2.2 过表达菌株 R-pIB139 的获得第37页
        3.2.3 过表达菌株R-pIB139的培养第37-38页
        3.2.4 gabT 基因 RT-qPCR 检测第38-40页
        3.2.5 发酵液中GABA和琥珀酸含量的检测第40-42页
        3.2.6 杀线虫活性检测第42页
    3.3 结果与分析第42-47页
        3.3.1 过表达菌株R-pIB139中gabT基因的表达量检测第42-44页
        3.3.2 Snea253-R和 R-pIB139中GABA含量检测第44-45页
        3.3.3 Snea253-R和 R-pIB139 中琥珀酸含量检测第45-47页
    3.4 小结第47-48页
第四章 碳源对gabT基因调控Snea253 代谢的影响第48-54页
    4.1 材料第48页
        4.1.1 供试菌株第48页
        4.1.2 试验仪器第48页
        4.1.3 试验试剂第48页
        4.1.4 主要培养基第48页
    4.2 试验方法第48-49页
        4.2.1 碳源优化培养基的制备第48-49页
        4.2.2 菌株的培养第49页
        4.2.3 不同碳源对gabT基因表达量的影响第49页
        4.2.4 发酵液中GABA和琥珀酸的含量检测第49页
        4.2.5 不同碳源培养的Snea253杀线虫活性检测第49页
    4.3 结果与分析第49-53页
        4.3.1 不同碳源对gabT基因表达量的影响第49-50页
        4.3.2 不同碳源发酵液中GABA和琥珀酸的含量检测第50-52页
        4.3.3 不同碳源培养的Snea253杀线虫活性检测第52-53页
    4.4 小结第53-54页
第五章 结论与讨论第54-57页
    5.1 过表达载体pIB139-gabT的构建第54页
    5.2 gabT基因代谢调控GABA代谢途径分析第54-55页
    5.3 碳源对gabT基因调控Snea253 代谢的影响第55-56页
    5.4 问题与展望第56-57页
附录第57-58页
参考文献第58-66页
致谢第66-68页
攻读硕士期间发表的学术论文情况第68-69页

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