首页--农业科学论文--林业论文--森林树种论文--阔叶乔木论文--杨论文

四个毛白杨APX基因及启动子克隆与催化特性分析

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-8页
1 前言第8-20页
   ·抗坏血酸过氧化物酶简介第8-11页
     ·抗坏血酸过氧化物酶的发现第8页
     ·APX的反应机制第8-10页
     ·APX基因家族概述第10-11页
   ·APX基因分子生物学和酶学特征及研究现状第11-16页
     ·分子生物学和酶学特征第11-12页
     ·APX分子生物学研究第12-14页
     ·酶活性的研究第14-15页
     ·APX酶在细胞中的定位第15-16页
   ·APX基因的表达分析第16-17页
     ·基因的表达第16-17页
     ·APX转基因的正义表达和反义表达第17页
   ·启动子简单介绍第17-18页
     ·真核生物基因启动子简介第17页
     ·不同类型启动子概述第17-18页
       ·类型Ⅱ启动子第18页
       ·类型Ⅰ启动子第18页
       ·类型Ⅲ启动子第18页
   ·研究目的第18-20页
2 毛白杨APX基因启动子的克隆第20-40页
   ·毛果杨APX基因启动子的电子克隆第20-21页
     ·实验材料第20页
     ·实验方法第20页
     ·结果与分析第20-21页
       ·水稻OSAPX2(AB053297.1)序列第20页
       ·毛果杨APX基因启动子序列的获得第20-21页
   ·毛白杨APX基因启动子的克隆第21-27页
     ·实验准备第21页
     ·实验方法第21-25页
       ·毛白杨组培苗DNA的提取第21-22页
       ·引物设计第22页
       ·聚合酶链式反应第22-23页
       ·PCR反应扩增产物的回收第23页
       ·PCR产物与pMD18-T载体连接第23页
       ·连接产物转化大肠杆菌JM109第23-24页
       ·质粒的提取和菌液测序第24-25页
     ·结果与分析第25-27页
       ·PCR克隆结果第25页
       ·PCR产物测序结果第25-27页
   ·序列分析第27-40页
     ·序列同源性比较第27-34页
     ·启动子序列生物信息分析第34-40页
3 四个毛白杨APX基因的原核表达和两个基因的酶学特性分析第40-50页
   ·毛白杨APX原核表达载体的构建第40页
   ·APX基因的原核表达和目的蛋白的纯化第40-45页
     ·实验材料及试剂准备第40-41页
     ·实验步骤第41-44页
       ·APX1在BL21中的诱导表达以及纯化第41-42页
         ·APX1的诱导表达第41页
         ·APX1的纯化第41-42页
       ·APX2在BL21中的诱导表达以及纯化第42-43页
         ·APX2的诱导表达第42页
         ·APX2基因的纯化第42-43页
       ·APX3在BL21中的诱导表达以及纯化第43-44页
         ·APX3的诱导表达第43页
         ·APX3基因的纯化第43-44页
       ·APX4在BL21中的诱导表达以及纯化第44页
     ·结果与分析第44-45页
   APX基因的诱导表达及纯化结果第44-45页
   ·APX1、APX2蛋白的酶学特性分析第45-49页
     ·实验材料第45-46页
     ·实验过程第46-47页
     ·结果与分析第47-49页
       ·双倒数法求APX基因(APX1、APX2)重组蛋白的Km和Vm值第47-48页
       ·PH值变化对重组蛋白活性的影响第48-49页
   ·小结第49-50页
4 APX基因(APX2)在毛白杨中的表达定量分析第50-55页
   ·实验材料第50页
     ·植物材料第50页
     ·试剂第50页
     ·仪器第50页
     ·PCR引物第50页
   ·实验步骤第50-52页
     ·仪器预处理第50页
     ·试剂准备第50-51页
     ·RNA提取第51页
     ·逆转录第51-52页
     ·标准曲线的制作第52页
     ·荧光定量PCR反应第52页
   ·结果与分析第52-54页
     ·实时定量PCR条件的优化第52-53页
     ·内参基因标准曲线第53页
     ·目标基因产物的温度溶解曲线第53-54页
     ·目标基因的相对定量结果第54页
   ·小结第54-55页
5 结论及讨论第55-58页
   ·结论第55-56页
   ·讨论与展望第56-58页
参考文献第58-62页
附录第62-63页
 附录A:缓冲液的配制第62页
 附录B:LB培养基第62页
 附录C:Brabford法测蛋白含量所需试剂第62-63页
缩略词第63-64页
个人简介第64-65页
导师简介第65-67页
致谢第67页

论文共67页,点击 下载论文
上一篇:北京山区森林碳储量遥感估测技术研究
下一篇:沙棘挥发物及其抗虫机制的初步研究