中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-46页 |
1 肝再生研究进展 | 第14-29页 |
·肝脏的结构和功能 | 第14页 |
·肝再生 | 第14-16页 |
·肝再生模型 | 第16-17页 |
·肝再生的调控 | 第17-29页 |
2 肝星形细胞与肝再生 | 第29-33页 |
·肝星形细胞的结构 | 第29页 |
·肝星形细胞的功能 | 第29-30页 |
·肝星形细胞的标志物 | 第30页 |
·肝星形细胞与肝再生的相关性 | 第30-32页 |
·肝星形细胞的分离、纯化 | 第32-33页 |
3 本论文研究目的及意义 | 第33-34页 |
·研究的目的和目标 | 第33页 |
·理论意义和应用前景 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-46页 |
第二部分 大鼠肝再生中星形细胞在基因组范围内的转录谱分析 | 第46-159页 |
引言 | 第47-48页 |
第一章 材料与方法 | 第48-67页 |
1 实验动物 | 第48页 |
2 大鼠2/3 肝切除模型构建 | 第48-49页 |
3 再生肝星形细胞的制备 | 第49-51页 |
·工作液配制 | 第49-50页 |
·再生肝星形细胞的分离、纯化 | 第50-51页 |
4 再生肝组织的免疫组织化学 | 第51-53页 |
·工作液配制 | 第51-52页 |
·防脱载玻片制作 | 第52页 |
·取材固定 | 第52页 |
·石蜡切片制作 | 第52页 |
·石蜡切片染色 | 第52-53页 |
5 再生肝星形细胞的免疫组织化学 | 第53页 |
·细胞涂片制作 | 第53页 |
·染色 | 第53页 |
6 免疫印记 | 第53-56页 |
·工作液配制 | 第53-54页 |
·蛋白样品制备和浓度测定 | 第54-55页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55页 |
·蛋白免疫印迹 | 第55-56页 |
·阳性条带分析 | 第56页 |
7 总RNA 提取与纯化 | 第56-57页 |
·总RNA 提取 | 第56页 |
·总RNA 的质量检测 | 第56-57页 |
·总RNA 纯化 | 第57页 |
·纯化总RNA 的定量和质检 | 第57页 |
8 荧光定量PCR | 第57-60页 |
·引物的设计与合成 | 第57-58页 |
·标准曲线的制备 | 第58-59页 |
·定量PCR 检测 | 第59-60页 |
·定量分析 | 第60页 |
9 Rat Genome 230 2.0 芯片检测 | 第60-64页 |
·总RNA 提取与纯化 | 第60页 |
·cDNA 的合成和纯化 | 第60-61页 |
·cRNA 的合成和纯化 | 第61-62页 |
·cRNA 片段化 | 第62页 |
·芯片杂交、洗脱和扫描 | 第62-63页 |
·芯片检测数据分析 | 第63-64页 |
10 大鼠再生肝的星形细胞肝再生相关基因的确认 | 第64页 |
11 大鼠再生肝的星形细胞肝再生相关基因的功能注释 | 第64页 |
12 大鼠再生肝的星形细胞肝再生相关基因表达模式分析 | 第64-65页 |
13 大鼠再生肝的星形细胞肝再生相关基因聚类分析 | 第65页 |
14 大鼠再生肝星形细胞中新基因的功能预测 | 第65-66页 |
·预测新基因的cDNA 和氨基酸序列 | 第65页 |
·建立大鼠蛋白亚细胞定位方法 | 第65页 |
·预测新基因编码产物的亚细胞定位 | 第65-66页 |
15 大鼠再生肝星形细胞肝再生相关基因编码的蛋白互作分析 | 第66页 |
16 大鼠再生肝和星形细胞中基因协同作用和各种生理活动的相关性分析 | 第66-67页 |
第二章 研究结果 | 第67-138页 |
1 再生肝细胞分散率、收率及分离的星形细胞纯度、活性 | 第67-68页 |
2 再生肝的组织结构和星形细胞结构 | 第68-71页 |
3 荧光定量PCR 检测结果与Rat Genome 230 2.0 芯片检测结果比较 | 第71-72页 |
4 蛋白免疫印迹检测结果及其与Rat Genome 230 2.0 芯片检测结果比较 | 第72-73页 |
5 大鼠肝再生中星形细胞的基因表达谱 | 第73-75页 |
6 大鼠再生肝星形细胞中肝再生相关新基因的功能预测 | 第75-76页 |
7 大鼠肝再生中星形细胞已知基因涉及的生理活动 | 第76-135页 |
·大鼠再生肝星形细胞中信号传导相关基因的表达变化 | 第77-84页 |
·大鼠再生肝星形细胞中损伤相关基因的表达变化 | 第84-86页 |
·大鼠再生肝星形细胞中应激反应相关基因的表达变化 | 第86-88页 |
·大鼠再生肝星形细胞中免疫反应相关基因的表达变化 | 第88-91页 |
·大鼠再生肝星形细胞中炎症反应相关基因的表达变化 | 第91-93页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞活化相关基因的表达变化 | 第93-94页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞建成相关基因的表达变化 | 第94-96页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞增殖相关基因的表达变化 | 第96-99页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞生长相关基因的表达变化 | 第99-101页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞分化相关基因的表达变化 | 第101-103页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞凋亡相关基因的表达变化 | 第103-106页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞粘附相关基因的表达变化 | 第106-108页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞迁移相关基因的表达变化 | 第108-109页 |
·大鼠再生肝星形细胞中DNA 修复相关基因的表达变化 | 第109-111页 |
·大鼠再生肝星形细胞中氨基酸及其衍生物代谢相关基因的表达变化 | 第111-113页 |
·大鼠再生肝星形细胞中核酸代谢相关基因的表达变化 | 第113-115页 |
·大鼠再生肝星形细胞中糖类代谢相关基因的表达变化 | 第115-117页 |
·大鼠再生肝星形细胞中脂类代谢相关基因的表达变化 | 第117-119页 |
·大鼠再生肝星形细胞中蛋白质代谢相关基因的表达变化 | 第119-123页 |
·大鼠再生肝星形细胞中有机酸代谢相关基因的表达变化 | 第123-124页 |
·大鼠再生肝星形细胞中辅因子代谢相关基因的表达变化 | 第124-125页 |
·大鼠再生肝星形细胞中胶原代谢相关基因的表达变化 | 第125-127页 |
·大鼠再生肝星形细胞中细胞因子合成相关基因的表达变化 | 第127-129页 |
·大鼠再生肝星形细胞中运输相关基因的表达变化 | 第129-135页 |
8 肝星形细胞与再生肝组织的转录谱及生理活动差异 | 第135-138页 |
第三章 讨论 | 第138-148页 |
1 肝星形细胞中的物质运输与大鼠肝再生 | 第140-142页 |
2 肝星形细胞中的细胞建成与大鼠肝再生 | 第142页 |
3 肝星形细胞中的细胞增殖与大鼠肝再生 | 第142-143页 |
4 肝星形细胞中的细胞生长与大鼠肝再生 | 第143页 |
5 肝星形细胞中的细胞分化与大鼠肝再生 | 第143-144页 |
6 肝星形细胞中的细胞凋亡与大鼠肝再生 | 第144页 |
7 肝星形细胞中的氨基酸及其衍生物代谢与大鼠肝再生 | 第144-145页 |
8 肝星形细胞中的核酸代谢与大鼠肝再生 | 第145页 |
9 肝星形细胞中的糖类代谢与大鼠肝再生 | 第145-146页 |
10 肝星形细胞中的蛋白质代谢与大鼠肝再生 | 第146页 |
11 肝星形细胞中的辅因子代谢与大鼠肝再生 | 第146-147页 |
12 肝星形细胞中的胶原代谢与大鼠肝再生 | 第147页 |
13 肝星形细胞中的细胞因子合成与大鼠肝再生 | 第147-148页 |
参考文献 | 第148-159页 |
第三部分 小结 | 第159-160页 |
附录 1 英文缩略语 | 第160-163页 |
附录 2 主要实验仪器 | 第163-164页 |
个人简介 | 第164-165页 |
在攻读博士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第165-166页 |
致谢 | 第166页 |