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猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-11页
第一章 前言第11-19页
   ·Fc受体的分类第11页
   ·FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs研究进展第11-13页
     ·FcγRⅠ(CD64)第11-12页
     ·FcγRⅡ(CD32)第12-13页
     ·FcγRⅢ(CD16)第13页
     ·moFcγRⅣ第13页
     ·boFcγ2R第13页
   ·FcγR的免疫学功能研究进展第13-15页
     ·调节抗体介导的免疫细胞活化第14页
     ·介导抗体亚类的不同免疫功能第14页
     ·介导细胞吞噬作用第14-15页
     ·介导ADCC作用第15页
     ·介导树突状细胞抗原提呈第15页
   ·PRRSV的研究进展第15-17页
     ·PRRSV第15-16页
     ·PRRSV基因组结构第16页
     ·PRRSV免疫学研究进展第16-17页
   ·ADE作用的研究进展第17-19页
第二章 转染Marc-145细胞条件优化第19-37页
   ·材料第19-23页
     ·质粒、菌种第19页
     ·细胞第19页
     ·酶、主要试剂第19-20页
     ·试剂配制第20-22页
     ·主要仪器第22-23页
   ·方法第23-31页
     ·GFP基因片段的扩增第23页
     ·GFP重组真核表达质粒的构建第23-27页
     ·GFP转染MARC-145细胞第27-29页
     ·转染条件优化第29-31页
   ·结果第31-36页
     ·GFP片段的扩增第31页
     ·GFP真核表达质粒的构建第31-33页
     ·稳定转染Marc-145细胞第33页
     ·质粒转染Marc-145细胞条件优化第33-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 稳定表达猪FcγRⅢ共转染细胞株的建立第37-57页
   ·材料第37页
     ·细胞第37页
     ·酶、主要试剂第37页
     ·试剂配制第37页
   ·方法第37-47页
     ·猪肺泡巨噬细胞(PAM)的采集第37-38页
     ·PAM细胞cDNA的获取第38-39页
     ·猪FcγRⅢ基因片段的克隆第39-40页
     ·真核表达质粒pcDNA3.1-FcγRⅢ的构建第40-41页
     ·猪γ链基因片段的克隆第41-42页
     ·真核表达质粒PIREShyg3-γ的构建第42-43页
     ·稳定转染细胞系的建立第43-46页
     ·共转染细胞系的RT-PCR鉴定第46页
     ·共转染细胞系的玫瑰花环试验第46页
     ·共转染细胞系的流式鉴定第46-47页
   ·结果与分析第47-55页
     ·PAM总RNA的提取第47-48页
     ·猪FcγRⅢ基因片段的扩增第48页
     ·猪γ基因片段的扩增第48-49页
     ·真核表达质粒pcDNA3.1-FcγRⅢ的构建第49-50页
     ·真核表达质粒PIREShyg3-γ的构建第50页
     ·共转染稳定表达细胞系的鉴定第50-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 poFcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用(ADE)第57-63页
   ·材料第57页
     ·病毒和细胞第57页
     ·主要试剂第57页
   ·方法第57-59页
     ·病毒的增殖第57页
     ·病毒TCID_(50)的测定第57-58页
     ·猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用第58页
     ·兔抗猪FcγRⅢ多抗效价的测定第58-59页
     ·rsFcγRⅢ抗体对转染细胞系介导PRRSV ADE的阻断第59页
   ·结果第59-62页
     ·poFcγRⅢ介异PRRSV ADE作用第59-61页
     ·rspoRⅢ多抗效价的测定第61页
     ·抗rsFcγRⅢ对PRRSV ADE的阻断作用第61-62页
   ·讨论第62-63页
第五章 全文总结第63-64页
参考文献第64-69页
作者简历第69页
硕士在读期间撰写和已发表的论文第69-70页
附录A:英文缩略词表第70-71页
附录B:质粒图谱第71-73页
致谢第73页

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