中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
·Fc受体的分类 | 第11页 |
·FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs研究进展 | 第11-13页 |
·FcγRⅠ(CD64) | 第11-12页 |
·FcγRⅡ(CD32) | 第12-13页 |
·FcγRⅢ(CD16) | 第13页 |
·moFcγRⅣ | 第13页 |
·boFcγ2R | 第13页 |
·FcγR的免疫学功能研究进展 | 第13-15页 |
·调节抗体介导的免疫细胞活化 | 第14页 |
·介导抗体亚类的不同免疫功能 | 第14页 |
·介导细胞吞噬作用 | 第14-15页 |
·介导ADCC作用 | 第15页 |
·介导树突状细胞抗原提呈 | 第15页 |
·PRRSV的研究进展 | 第15-17页 |
·PRRSV | 第15-16页 |
·PRRSV基因组结构 | 第16页 |
·PRRSV免疫学研究进展 | 第16-17页 |
·ADE作用的研究进展 | 第17-19页 |
第二章 转染Marc-145细胞条件优化 | 第19-37页 |
·材料 | 第19-23页 |
·质粒、菌种 | 第19页 |
·细胞 | 第19页 |
·酶、主要试剂 | 第19-20页 |
·试剂配制 | 第20-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-31页 |
·GFP基因片段的扩增 | 第23页 |
·GFP重组真核表达质粒的构建 | 第23-27页 |
·GFP转染MARC-145细胞 | 第27-29页 |
·转染条件优化 | 第29-31页 |
·结果 | 第31-36页 |
·GFP片段的扩增 | 第31页 |
·GFP真核表达质粒的构建 | 第31-33页 |
·稳定转染Marc-145细胞 | 第33页 |
·质粒转染Marc-145细胞条件优化 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第三章 稳定表达猪FcγRⅢ共转染细胞株的建立 | 第37-57页 |
·材料 | 第37页 |
·细胞 | 第37页 |
·酶、主要试剂 | 第37页 |
·试剂配制 | 第37页 |
·方法 | 第37-47页 |
·猪肺泡巨噬细胞(PAM)的采集 | 第37-38页 |
·PAM细胞cDNA的获取 | 第38-39页 |
·猪FcγRⅢ基因片段的克隆 | 第39-40页 |
·真核表达质粒pcDNA3.1-FcγRⅢ的构建 | 第40-41页 |
·猪γ链基因片段的克隆 | 第41-42页 |
·真核表达质粒PIREShyg3-γ的构建 | 第42-43页 |
·稳定转染细胞系的建立 | 第43-46页 |
·共转染细胞系的RT-PCR鉴定 | 第46页 |
·共转染细胞系的玫瑰花环试验 | 第46页 |
·共转染细胞系的流式鉴定 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-55页 |
·PAM总RNA的提取 | 第47-48页 |
·猪FcγRⅢ基因片段的扩增 | 第48页 |
·猪γ基因片段的扩增 | 第48-49页 |
·真核表达质粒pcDNA3.1-FcγRⅢ的构建 | 第49-50页 |
·真核表达质粒PIREShyg3-γ的构建 | 第50页 |
·共转染稳定表达细胞系的鉴定 | 第50-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
第四章 poFcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用(ADE) | 第57-63页 |
·材料 | 第57页 |
·病毒和细胞 | 第57页 |
·主要试剂 | 第57页 |
·方法 | 第57-59页 |
·病毒的增殖 | 第57页 |
·病毒TCID_(50)的测定 | 第57-58页 |
·猪FcγRⅢ介导PRRSV抗体依赖增强作用 | 第58页 |
·兔抗猪FcγRⅢ多抗效价的测定 | 第58-59页 |
·rsFcγRⅢ抗体对转染细胞系介导PRRSV ADE的阻断 | 第59页 |
·结果 | 第59-62页 |
·poFcγRⅢ介异PRRSV ADE作用 | 第59-61页 |
·rspoRⅢ多抗效价的测定 | 第61页 |
·抗rsFcγRⅢ对PRRSV ADE的阻断作用 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
第五章 全文总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
作者简历 | 第69页 |
硕士在读期间撰写和已发表的论文 | 第69-70页 |
附录A:英文缩略词表 | 第70-71页 |
附录B:质粒图谱 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |