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基因组范围RNAi筛选涡虫再生与稳态必需转录因子

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
符号说明第10-11页
第1章 前言第11-24页
    1.1 再生与干细胞第11-14页
        1.1.1 自然界中再生现象第11页
        1.1.2 成熟的再生模型第11-13页
        1.1.3 干细胞在再生过程中作用第13-14页
    1.2 涡虫再生第14-21页
        1.2.1 涡虫再生第14页
        1.2.2 涡虫再生研究进展第14-21页
    1.3 转录因子与再生第21-22页
    1.4 研究目的第22-24页
第2章 实验材料和方法第24-45页
    2.1 实验材料第24-31页
        2.1.1 实验动物第24页
        2.1.2 细菌菌株第24页
        2.1.3 质粒、引物和试剂第24-25页
        2.1.4 化学试剂第25页
        2.1.5 培养基第25-26页
        2.1.6 缓冲试剂第26-31页
        2.1.7 实验仪器第31页
    2.2 实验方法第31-45页
        2.2.1 涡虫养殖第31页
        2.2.2 涡虫切割第31-32页
        2.2.3 涡虫X-ray/Gamma-ray照射第32页
        2.2.4 涡虫RNA抽提,反转以及q RT-PCR第32-34页
        2.2.5 涡虫ds RNA合成第34页
        2.2.6 涡虫RNAi第34-35页
        2.2.7 基因克隆第35页
        2.2.8 原位杂交探针合成第35-36页
        2.2.9 涡虫整胚原位杂交第36-39页
        2.2.10 涡虫整胚免疫荧光第39-40页
        2.2.11 涡虫成体干细胞分选第40页
        2.2.12 涡虫细胞荧光原位杂交第40-41页
        2.2.13 涡虫整胚TUNEL检测第41-42页
        2.2.14 涡虫石蜡切片免疫荧光第42-43页
        2.2.15 涡虫震动切片第43页
        2.2.16 芯片设计与结果分析第43-44页
        2.2.17 系统进化树分析第44-45页
第3章 实验结果第45-87页
    3.1 全基因组水平筛选涡虫再生与稳态维持必需的转录因子第45-58页
        3.1.1 涡虫全基因组转录因子筛选概述第45-46页
        3.1.2 筛选得到5个转录因子对涡虫头尾极性的建立或维持相关第46-47页
        3.1.3 筛选得到涡虫色素代谢、神经和运动相关的转录因子。第47-51页
        3.1.4 大部分的表型基因既影响涡虫的稳态维持又影响再生第51-52页
        3.1.5 大部分影响涡虫再生与稳态维持的转录因子在涡虫再生3天时表达量达到最大第52-54页
        3.1.6 zbtb6 能对涡虫成体干细胞进行非自主调控第54-58页
    3.2 smed-pogz调控涡虫再生起始与稳态维持第58-87页
        3.2.1 pogz是涡虫再生必需的,并且主要表达在涡虫成体干细胞第58-65页
        3.2.2 pogz是涡虫干细胞响应再生必需的第65-69页
        3.2.3 dis3l2 是pogz RNAi表型必需的第69-74页
        3.2.4 pogz对涡虫组织缺失后干细胞的识别是必需的第74-78页
        3.2.5 pogz是涡虫成体干细胞分化必需的第78-82页
        3.2.6 zfp-1 和inx-11 是pogz促进干细胞分化所必需第82-84页
        3.2.7 模式图第84-87页
第4章 实验结论第87-90页
    4.1 我们总共筛选了598个转录因子,发现60个有表型第87页
    4.2 zbtb6 能通过间接方式抑制涡虫成体干细胞的增殖第87-88页
    4.3 在再生过程中,pogz通过促进dis3l2 的表达起始再生特异的干细胞局部增殖第88-89页
    4.4 在正常稳态维持过程中,pogz主要通调控zfp-1 和inx-11 促进成体干细胞的分化第89-90页
参考文献第90-96页
致谢第96-97页
学术论文和参加学术会议情况第97-99页

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