| 中文摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 符号说明 | 第17-18页 |
| 第一章 研究工作背景 | 第18-44页 |
| 1 烟草主要病毒病 | 第18-21页 |
| ·烟草普通花叶病 | 第18-20页 |
| ·烟草黄瓜黄叶病 | 第20页 |
| ·烟草马铃薯Y 病 | 第20-21页 |
| 2 烟草病毒病防治中存在的主要问题 | 第21页 |
| 3 烟草病毒病的防治状况和研究进展 | 第21-36页 |
| ·抗病品种 | 第22-29页 |
| ·选种 | 第22页 |
| ·杂交育种 | 第22页 |
| ·突变育种 | 第22页 |
| ·转基因 | 第22-29页 |
| ·利用非病毒来源基因介导的抗病性 | 第22-23页 |
| ·病毒来源的基因 | 第23-29页 |
| ·栽培措施 | 第29-30页 |
| ·合理布局烟田 | 第29页 |
| ·合理轮作 | 第29页 |
| ·搞好田间卫生 | 第29-30页 |
| ·培育无病壮苗 | 第30页 |
| ·科学施肥 | 第30页 |
| ·科学移栽 | 第30页 |
| ·加强田间管理 | 第30页 |
| ·控制传毒介体 | 第30页 |
| ·施用抗病毒药剂 | 第30-35页 |
| ·植物提取药剂 | 第31页 |
| ·动物产生产生药剂 | 第31-32页 |
| ·微生物药剂 | 第32页 |
| ·人工合成药剂 | 第32-35页 |
| ·有机酸类 | 第32-33页 |
| ·核苷、嘌呤、嘧啶类衍生物 | 第33页 |
| ·DHT 类化合物 | 第33-34页 |
| ·(硫)脲类化合物 | 第34页 |
| ·杂环化合物 | 第34页 |
| ·其他 | 第34-35页 |
| ·利用弱毒株系(脱毒疫苗)防治 | 第35页 |
| ·脱毒技术 | 第35-36页 |
| ·茎尖分生组织脱毒技术 | 第35-36页 |
| ·热处理脱毒技术 | 第36页 |
| ·茎尖培养和热处理相结合 | 第36页 |
| 4 木霉生物防治的研究进展 | 第36-39页 |
| ·抗生作用 | 第37页 |
| ·重寄生作用 | 第37-38页 |
| ·溶菌作用 | 第38页 |
| ·毒性蛋白 | 第38页 |
| ·竞争作用 | 第38页 |
| ·诱导抗性 | 第38-39页 |
| ·促进植物生长 | 第39页 |
| ·Peptaibols | 第39页 |
| 5 RNAi 技术的研究进展 | 第39-44页 |
| 第二章 木霉防治烟草病毒病研究 | 第44-105页 |
| 1 材料与方法 | 第46-59页 |
| ·康宁霉素 CD 光谱特征研究的材料方法 | 第46-47页 |
| ·康宁霉素 CD 光谱特征研究试剂 | 第46页 |
| ·康宁霉素 CD 光谱特征研究的主要仪器 | 第46页 |
| ·CD 光谱的测定 | 第46页 |
| ·TFE 浓度对Trichokonin VI 结构的影响 | 第46页 |
| ·Trichokonin VI 浓度对其结构的影响 | 第46-47页 |
| ·膜拟态环境对 Trichokonin VI 结构的影响 | 第47页 |
| ·木霉孢子体外钝化 TMV | 第47页 |
| ·木霉孢子体外钝化 TMV 材料 | 第47页 |
| ·木霉孢子体外钝化 TMV 方法 | 第47页 |
| ·木霉孢子处理 TMV 电镜照片 | 第47-48页 |
| ·康宁霉素体外钝化 TMV | 第48页 |
| ·康宁霉素体外钝化TMV 材料 | 第48页 |
| ·康宁霉素体外钝化TMV 方法 | 第48页 |
| ·康宁霉素体外钝化 TMV 电镜照片材料与方法 | 第48-49页 |
| ·康宁霉素体外钝化 TMV 电镜照片材料 | 第48页 |
| ·康宁霉素体外钝化 TMV 电镜照片方法 | 第48-49页 |
| ·木霉孢子抑制 TMV 积累的材料方法 | 第49-50页 |
| ·木霉孢子抑制 TMV 积累的材料 | 第49页 |
| ·木霉孢子抑制TMV 积累的方法 | 第49页 |
| ·木霉孢子抑制 TMV 积累的 RT-PCR 反应 | 第49-50页 |
| ·木霉孢子抑制 TMV 复制的材料方法 | 第50页 |
| ·木霉孢子抑制 TMV 复制的材料 | 第50页 |
| ·木霉孢子抑制TMV 复制的方法 | 第50页 |
| ·康宁霉素抑制材料TMV 复制的材料方法 | 第50-51页 |
| ·康宁霉素抑制材料 TMV 复制的材料 | 第50-51页 |
| ·康宁霉素抑制材料 TMV 复制的方法 | 第51页 |
| ·木霉孢子诱导烟草抗性材料方法 | 第51-53页 |
| ·木霉孢子诱导枯斑三生抗性 | 第51页 |
| ·木霉孢子诱导枯斑三生抗性材料 | 第51页 |
| ·木霉孢子诱导枯斑三生抗性方法 | 第51页 |
| ·木霉孢子诱导 NC89 抗性材料方法 | 第51-52页 |
| ·木霉孢子对 NC89 的促生防病作用材料 | 第51-52页 |
| ·木霉孢子对 NC89 的促生防病作用方法 | 第52页 |
| ·木霉孢子诱导烟株防御酶活性材料方法 | 第52-53页 |
| ·木霉孢子诱导烟株防御酶活性材料 | 第53页 |
| ·木霉孢子诱导烟株防御酶活性方法 | 第53页 |
| ·康宁霉素诱导烟草抗性材料方法 | 第53-55页 |
| ·康宁霉素诱导枯斑三生抗性材料方法 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导枯斑三生抗性材料 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导枯斑三生抗性方法 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导NC89 抗性材料方法 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导 NC89 材料 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导 NC89 方法 | 第54页 |
| ·康宁霉素诱导烟株防御酶活性材料方法 | 第54-55页 |
| ·康宁霉素诱导烟株防御酶活性材料 | 第54-55页 |
| ·康宁霉素诱导烟株防御酶活性方法 | 第55页 |
| ·木霉孢子和康宁霉素治疗效果对比材料方法 | 第55页 |
| ·木霉孢子和康宁霉素治疗效果对比材料 | 第55页 |
| ·木霉孢子和康宁霉素治疗效果对比方法 | 第55页 |
| ·木霉孢子处理烟草盆栽实验材料方法 | 第55-56页 |
| ·木霉孢子处理烟草盆栽实验材料 | 第55-56页 |
| ·木霉孢子处理烟草盆栽实验方法 | 第56页 |
| ·木霉孢子处理烟草大田实验材料方法 | 第56-58页 |
| ·木霉孢子处理烟草大田实验材料 | 第56页 |
| ·木霉孢子处理烟草大田实验方法 | 第56-58页 |
| ·木霉孢子处理大田烟草方法 | 第56页 |
| ·木霉孢子处理大田烟草品质评价材料方法 | 第56-57页 |
| ·木霉孢子处理大田烟草 Trichokonins 残留分析 | 第57-58页 |
| ·统计方法 | 第58-59页 |
| 2 结果分析 | 第59-103页 |
| ·Trichokonin VI 在不同溶剂中的CD 谱特征 | 第59-63页 |
| ·Trichokonin VI 在水和不同有机溶剂中CD 谱特征 | 第59-60页 |
| ·TFE 浓度对Trichokonin VI 结构的影响 | 第60-61页 |
| ·Trichokonin VI 浓度对其构象的影响 | 第61页 |
| ·SDS 浓度对Trichokonin VI 的二级结构的影响 | 第61-63页 |
| ·木霉孢子体外钝化 TMV | 第63-65页 |
| ·木霉孢子处理 TMV 后电镜照片 | 第65-67页 |
| ·康宁霉素钝化 TMV | 第67-68页 |
| ·康宁霉素处理 TMV 后电镜照片 | 第68-69页 |
| ·木霉孢子抑制病毒积累 | 第69-74页 |
| ·基因标准曲线 | 第69-71页 |
| ·样品 RNA 定量 | 第71-72页 |
| ·反应产物进行 2%琼脂糖凝胶电泳 | 第72页 |
| ·病情指数调查 | 第72-74页 |
| ·木霉孢子对 TMV 复制的抑制作用 | 第74-75页 |
| ·康宁霉素抑制 TMV 复制结果分析 | 第75-77页 |
| ·木霉对烟草抗性的诱导作用 | 第77-87页 |
| ·木霉孢子诱导枯斑三生的抗TMV 能力 | 第77-79页 |
| ·木霉孢子诱导 NC89 抗 TMV 能力 | 第79-83页 |
| ·木霉孢子诱导烟株防御酶活性 | 第83-87页 |
| ·PAL（苯丙氨酸解氨酶）活性变化 | 第83-84页 |
| ·POD（过氧化物酶）活性变化 | 第84-85页 |
| ·MDA（丙二醛）含量变化 | 第85-87页 |
| ·康宁霉素诱导烟草抗性 | 第87-94页 |
| ·康宁霉素诱导枯斑三生抗性 | 第87-89页 |
| ·康宁霉素诱导NC89 抗性 | 第89-90页 |
| ·康宁霉素诱导烟株防御酶活性 | 第90-94页 |
| ·木霉孢子和康宁霉素治疗效果对比 | 第94-95页 |
| ·木霉孢子处理烟草盆栽实验 | 第95-97页 |
| ·木霉孢子处理烟草大田实验 | 第97-103页 |
| ·病害情况和经济性状 | 第97-100页 |
| ·木霉孢子处理大田烟草品质评价 | 第100-103页 |
| ·实验点烟叶外观质量 | 第100页 |
| ·大田实验点烟叶主要化学成分 | 第100-101页 |
| ·大田实验点烟叶 Trichokonins 残留分析 | 第101-102页 |
| ·木霉孢子处理大田烟叶评吸质量 | 第102-103页 |
| 3 小结 | 第103-105页 |
| 第三章 RNAi 介导的抗病毒研究 | 第105-137页 |
| 1 RNAi 介导的抗病毒材料方法 | 第108-117页 |
| ·常用培养基 | 第108-109页 |
| ·细菌常用培养基 | 第108页 |
| ·植物组织培养与转化常用培养基 | 第108-109页 |
| ·主要试剂 | 第109-110页 |
| ·主要酶及试剂 | 第109页 |
| ·常用溶液 | 第109-110页 |
| ·主要方法 | 第110-116页 |
| ·重组植物表达载体向农杆菌中转化(冻融法) | 第110-111页 |
| ·农杆菌介导的外源基因向烟草中转化及转化植株的获得 | 第111页 |
| ·转基因植株的卡那霉素(Km )抗性鉴定 | 第111页 |
| ·转基因烟草的抗病性鉴定 | 第111-112页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR）和酶切反应 | 第112页 |
| ·质粒的提取(OMEGA) | 第112页 |
| ·OMEGA 胶回收 | 第112-113页 |
| ·烟草 DNA 提取(CTAB 法) | 第113页 |
| ·烟草RNA 的提取（CTAB 法） | 第113页 |
| ·转基因植物的 Southern blot 分析 | 第113-114页 |
| ·real time quantitative PCR 反应 | 第114-115页 |
| ·RNA 的反转录 | 第115页 |
| ·单倍体育种 | 第115-116页 |
| ·利用近红外光谱分析检测烟叶化学成分 | 第116页 |
| ·实验材料 | 第116-117页 |
| ·植物材料 | 第116页 |
| ·菌株和质粒 | 第116-117页 |
| 2 RNAi 介导的抗病毒结果分析 | 第117-137页 |
| ·发夹 DNA 的构建 | 第117-128页 |
| ·三种病毒基因片段的选择 | 第117-123页 |
| ·TMV 运动蛋白基因片段的选择 | 第117页 |
| ·CMV 运动蛋白基因片段的选择 | 第117-118页 |
| ·PVY 基因片段的选择 | 第118-120页 |
| ·TMV 复制酶基因片段的选择 | 第120-122页 |
| ·CMV 复制酶基因片段的选择 | 第122-123页 |
| ·hpDNA 的构建 | 第123-128页 |
| ·RNAi 烟草的获得 | 第128-129页 |
| ·RNAi 烟苗的获得 | 第128页 |
| ·RNAi 烟苗PCR 检测 | 第128-129页 |
| ·RNAi 烟苗抗性鉴定 | 第129-131页 |
| ·RNAi 烟苗接种病毒后抗性表现 | 第129-130页 |
| ·RNAi 烟苗接种病毒后新叶中病毒RNA 含量 | 第130-131页 |
| ·RNAi 烟苗Southern blot | 第131-132页 |
| ·RNAi 烟草纯合体的获得 | 第132-133页 |
| ·RNAi 烟草叶片化学成 | 第133-134页 |
| ·小结 | 第134-137页 |
| 第四章 结论 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-153页 |
| 附录 | 第153-169页 |
| 附录 1: 即墨大田实验不同处理的生长势 | 第153页 |
| 附录 2: 木霉大田实验不同处理产量产值统计 | 第153-154页 |
| 附录 3: RNAi烟苗接种病毒病情统计 | 第154-158页 |
| 附录 4: NH培养基配方 | 第158-159页 |
| 附录 5: T培养基配方 | 第159-160页 |
| 附录 6: 科技查新报告 | 第160-169页 |
| 致谢 | 第169-170页 |
| 博士期间发表的论文和获得的专利 | 第170页 |
