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猕猴桃果实后熟进程中乙烯信号转导元件功能及其对非生物胁迫的应答

致谢第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-14页
缩略语表第14-17页
目录第17-22页
1 绪论第22-37页
   ·乙烯生物合成与调控第22-24页
     ·乙烯及其功能第22页
     ·乙烯生物合成途径第22-23页
     ·乙烯生物合成相关酶的编码基因及其功能差异第23页
     ·乙烯生物合成与果实成熟衰老的调控第23-24页
   ·乙烯信号转导第24-28页
     ·乙烯信号转导线性模型建立第24-25页
     ·乙烯信号转导元件第25-27页
       ·ETR第25页
       ·CTR1第25-26页
       ·EIN2第26页
       ·EIN3/EILs和ERFs第26-27页
     ·其他第27-28页
       ·RTE1第27页
       ·CTR1起始的激酶级联反应第27页
       ·EBF1和EBF2第27-28页
   ·乙烯信号转导与果实成熟衰老第28-34页
     ·果实乙烯信号转导元件的克隆第28-29页
     ·ETR与果实后熟第29-31页
       ·番茄ETR第29-30页
       ·其它呼吸跃变型果实的ETR第30-31页
       ·非呼吸跃变型果实的ETR第31页
       ·ETR转录本丰度与蛋白质含量的关系第31页
     ·CTR1与果实后熟第31-32页
     ·EIN3/EILs与果实后熟第32页
     ·ERFs与果实后熟第32-33页
     ·新型乙烯突变体第33-34页
   ·乙烯信号转导与非生物胁迫第34-35页
     ·乙烯信号转导与植株逆境应答第34页
     ·乙烯信号转导与果实采后逆境第34-35页
   ·果实乙烯信号转导研究现状与展望第35-36页
   ·研究目标和内容第36-37页
2 试验材料与方法第37-51页
   ·基因克隆第37-40页
     ·EST序列提取第37页
     ·兼并引物获得基因片段第37-38页
     ·总RNA提取第38页
     ·利用RACE技术分离全长序列第38-40页
       ·引物设计第38页
       ·cDNA合成及全长基因PCR扩增第38-40页
     ·分子克隆和测序第40页
     ·序列分析第40页
   ·果实材料采集、处理和测定第40-42页
     ·发育阶段果实第40页
     ·成熟猕猴桃果实(2007年)第40-41页
     ·成熟猕猴桃果实(2008年)第41页
     ·ACO敲除的猕猴桃果实第41页
     ·组织特异性分析用试材收集第41-42页
     ·乙烯释放速率测定第42页
     ·硬度和SSC测定第42页
     ·失水率测定第42页
   ·基因表达第42-44页
     ·总RNA提取和cDNA合成第42-43页
     ·引物设计第43页
     ·引物检测第43-44页
     ·实时定量PCR第44页
   ·基因互作第44-48页
     ·启动子序列分离第44-45页
     ·启动子序列分析第45-46页
     ·Transient Assay第46-47页
     ·启动子删截(deletion)第47-48页
     ·烟草栽培第48页
   ·拟南芥转基因第48-50页
     ·表达载体构建第48-49页
     ·转基因第49页
     ·转基因拟南芥乙烯释放测定第49页
     ·转基因拟南芥验证和目标基因检测第49-50页
     ·转基因拟南芥逆境处理第50页
   ·数据处理及统计学分析第50-51页
3 基于EST库的猕猴桃乙烯信号转导元件分离与序列分析第51-59页
   ·结果与分析第52-59页
     ·猕猴桃乙烯信号转导四个不同级别元件的分离第52-53页
     ·猕猴桃乙烯信号转导元件命名和同源性分析第53-59页
4 猕猴桃果实后熟软化相关AdETRs和AdCTRs基因鉴别与调控第59-71页
   ·结果与分析第59-71页
     ·AdETRs和AdCTRs组织特异性分析第59-60页
     ·AdETRs和AdCTRs在果实生长发育进程中的表达第60-61页
     ·猕猴桃果实后熟衰老及调控第61-63页
     ·猕猴桃果实20℃下后熟软化进程中AdETRs的表达第63-67页
     ·低温贮藏猕猴桃果实中AdETRs的表达第67-69页
     ·猕猴桃果实后熟软化进程中AdCTRs的表达第69-71页
5 猕猴桃果实后熟软化相关AdEILs和AdERFs的鉴别及调控第71-79页
   ·结果与分析第71-79页
     ·猕猴桃AdEILs和AdERFs组织特异性分析第71-72页
     ·猕猴桃AdEILs和AdERFs在果实生长发育进程中的表达第72-73页
     ·猕猴桃果实后熟软化进程(20℃)中AdEILs和AdERFs的表达第73-75页
     ·AdERFs在ACO敲除的猕猴桃果实中的表达模式第75-76页
     ·AdEILs和AdERFs的低温应答模式第76-79页
6 AdEILs和AdERFs与目标基因互作及其相关功能的验证第79-87页
   ·结果与分析第79-87页
     ·启动子区序列分离与结构域分析第79-81页
     ·AdEILs和AdERFs与果实后熟软化基因启动子区互作第81页
     ·启动子删截研究启动子区不同结构域在基因互作中的效益第81-82页
     ·过量表达AdEIL2和AdEIL3诱导拟南芥乙烯合成第82-83页
     ·AdEIL2和AdEIL3诱导拟南芥乙烯合成基因和XTH基因的表达第83-84页
     ·过量表达AdEIL3、AdERF1和AdERF13增强拟南芥低温抗性第84-87页
7 猕猴桃AdETRs和AdERFs对果实采后逆境胁迫的应答第87-92页
   ·结果及分析第87-92页
     ·采后猕猴桃果实短期逆境处理第87-88页
     ·不同逆境处理对猕猴桃AdETRs基因的调控第88-90页
     ·逆境处理的猕猴桃果实中AdERFs的表达第90-92页
8 讨论第92-104页
   ·猕猴桃乙烯信号转导途径多基因家族分离第92-94页
   ·组织特异性和发育阶段特异性分析第94-95页
     ·组织特异性分析第94页
     ·发育阶段特异性分析第94-95页
   ·猕猴桃果实后熟软化相关的乙烯信号转导成员鉴别、调控与验证第95-99页
     ·AdETRs和AdCTRs与猕猴桃果实后熟软化第95-97页
     ·AdEILs与猕猴桃果实后熟软化第97-98页
     ·AdERFs与猕猴桃果实后熟软化第98-99页
   ·猕猴桃果实采后非生物逆境胁迫相关的乙烯信号转导成员鉴别、调控与验证第99-104页
     ·AdETRs和AdCTRs的低温应答模式第100页
     ·AdEILs和AdERFs的低温应答模式第100-101页
     ·AdEILs和AdERFs与猕猴桃果实采后非生物逆境胁迫第101-104页
9 小结与展望第104-107页
   ·小结第104-105页
   ·展望第105-107页
参考文献第107-122页
作者简历及在学期间所取得的科研成果第122-125页

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