| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-26页 |
| 第一章 溶杆菌属的研究进展 | 第13-23页 |
| 1 溶杆菌属(Lysobacter)的分类地位 | 第13-15页 |
| 2 溶杆菌属(Lysobacter)的生物学特征 | 第15页 |
| 3 溶杆菌属(Lysobacter)的生防功能与生防机理 | 第15-23页 |
| 3.1 定殖作用 | 第16页 |
| 3.2 产生抗生素 | 第16-21页 |
| 3.2.1 HSAF (Heat Stable Antifungal Factor) | 第17-18页 |
| 3.2.2 WAP-8294A2 | 第18-19页 |
| 3.2.3 2,4-DAPG(2,4-二乙酰基间苯三酚) | 第19-20页 |
| 3.2.4 Lysobactin | 第20页 |
| 3.2.5 Tripropeptins | 第20-21页 |
| 3.3 产生生物表面活性物质 | 第21页 |
| 3.4 产生胞外酶 | 第21页 |
| 3.5 诱导寄主抗病性 | 第21-23页 |
| 第二章 细菌遗传操作系统的研究 | 第23-25页 |
| 1 同源单交换和双交换 | 第23页 |
| 2 转座重组 | 第23-24页 |
| 3 Red/ET重组系统 | 第24-25页 |
| 4 定点突变 | 第25页 |
| 本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-71页 |
| 第一章 胶状溶杆菌OH17的鉴定 | 第27-39页 |
| 1 试验材料 | 第28-32页 |
| 1.1 菌株 | 第28页 |
| 1.2 培养基 | 第28-31页 |
| 1.3 引物设计 | 第31-32页 |
| 1.4 酶和化学试剂 | 第32页 |
| 2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2.1 胶状溶杆菌OH17在四种不同培养基上菌落形态的观察 | 第32页 |
| 2.2 电子显微镜下菌体形态的观察 | 第32页 |
| 2.3 生理生化性状的测定 | 第32-33页 |
| 2.4 16S rDNA测序以及系统进化树的构建 | 第33-34页 |
| 2.5 抗菌谱的测定 | 第34页 |
| 3 结果分析 | 第34-37页 |
| 3.1 胶状溶杆菌OH17在不同培养基上的菌落形态 | 第34页 |
| 3.2 胶状溶杆菌OH17的菌体形态 | 第34-35页 |
| 3.3 生理生化性状测定 | 第35-36页 |
| 3.4 16S rDNA测序结果分析并构建系统进化树 | 第36-37页 |
| 3.5 胶状溶杆菌OH17的抗菌谱 | 第37页 |
| 4 结论与讨论 | 第37-39页 |
| 第二章 胶状溶杆菌OH17遗传操作系统的构建与应用 | 第39-71页 |
| 1 试验材料 | 第40-46页 |
| 1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第40-42页 |
| 1.2 引物设计 | 第42-46页 |
| 1.3 培养基 | 第46页 |
| 1.4 酶、抗生素、试剂盒和化学试剂 | 第46页 |
| 2 试验方法 | 第46-54页 |
| 2.1 抗生素耐受水平检测 | 第46-47页 |
| 2.2 DNA的提取 | 第47页 |
| 2.3 DNA操作方法和体系 | 第47-49页 |
| 2.3.1 TransTaq聚合酶PCR体系和反应条件 | 第47-48页 |
| 2.3.2 酶切体系 | 第48页 |
| 2.3.3 纯化酶切产物连接 | 第48-49页 |
| 2.4 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第49页 |
| 2.4.1 大肠杆菌DH5α热转感受态制备 | 第49页 |
| 2.4.2 连接产物的热激转化及阳性克隆的筛选 | 第49页 |
| 2.5 质粒提取与酶切验证 | 第49-50页 |
| 2.6 胶状溶杆菌OH17电转感受态的制备以及突变体的筛选 | 第50-51页 |
| 2.6.1 胶状溶杆菌OH17电转感受态的制备 | 第50-51页 |
| 2.6.2 重组质粒电转化到胶状溶杆菌OH17中 | 第51页 |
| 2.6.3 突变体的筛选 | 第51页 |
| 2.7 胶状溶杆菌OH17中pilR基因克隆和序列分析 | 第51页 |
| 2.8 HSAF的提取与HPLC检测 | 第51-52页 |
| 2.8.1 HSAF的提取 | 第51-52页 |
| 2.8.2 HSAF的HPLC检测 | 第52页 |
| 2.9 互补菌株以及相应空载菌株的构建 | 第52-53页 |
| 2.10 全基因组中次生代谢产物合成基因簇分析 | 第53页 |
| 2.11 胶状溶杆菌OH17全基因组中与生物合成相关基因簇中部分基因的突变体的构建 | 第53页 |
| 2.12 野生型与衍生菌株对梨腐烂病菌、辣椒疫霉病菌、马铃薯环腐病菌和酿酒酵母的拮抗测定 | 第53-54页 |
| 2.13 数据分析 | 第54页 |
| 3 结果分析 | 第54-69页 |
| 3.1 胶状溶杆菌OH17抗生素耐受水平 | 第54页 |
| 3.2 pilR突变体菌株的构建及其表型测定 | 第54-56页 |
| 3.2.1 pilR与产酶溶杆菌OH11中对应基因具有同源性 | 第54页 |
| 3.2.2 pilR基因突变体的构建 | 第54-55页 |
| 3.2.3 pilR突变体的表型测定 | 第55-56页 |
| 3.3 pilR基因互补菌株和空载菌株的构建 | 第56-58页 |
| 3.3.1 利用自主复制型载体构建互补菌株 | 第56页 |
| 3.3.2 利用基于染色体整合的载体构建互补菌株 | 第56-58页 |
| 3.4 全基因组中存在11个与代谢产物合成相关的基因簇 | 第58-60页 |
| 3.5 拮抗丝状真菌和卵菌活性物质HSAF的鉴定及其合成基因簇定位 | 第60-62页 |
| 3.6 其他10个代谢产物合成基因簇中相关基因突变体的构建 | 第62-66页 |
| 3.7 拮抗革兰氏阳性细菌和酿酒酵母的活性物质的合成基因簇的定位 | 第66-69页 |
| 4 结论与讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
