| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第10-12页 |
| 绪论 | 第12-18页 |
| 1.阿尔茨海默病概述 | 第12-13页 |
| 2.金钗石斛生物碱研究进展 | 第13-14页 |
| 3.自噬功能减弱是诱发AD的关键机制之一 | 第14-15页 |
| 4.自噬的功能、调控机制及检测方法 | 第15-18页 |
| 第一部分 ADNL诱导自噬抑制Aβ_(25-35)所致的大鼠海马神经元轴突变性 | 第18-62页 |
| 1 前言 | 第18-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.2 主要药品和试剂 | 第19-22页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 3 实验方法 | 第23-33页 |
| 3.1 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 3.2 ADNL分离提取及含量测定 | 第24-25页 |
| 3.3 大鼠原代海马神经元的培养 | 第25页 |
| 3.4 免疫荧光染色 | 第25-26页 |
| 3.5 复制神经元轴突变性细胞模型并作量化分析 | 第26-29页 |
| 3.6 ADNL对 Aβ_(25-35)诱导的大鼠海马神经元轴突变性的影响 | 第29页 |
| 3.7 海马神经元过表达GFP-LC3B及 GFP-LC3B荧光斑定量分析 | 第29-31页 |
| 3.8 自噬体与溶酶体共定位分析 | 第31页 |
| 3.9 DQ-BSA-RED染色及荧光半定量分析 | 第31页 |
| 3.10 AO染色及荧光强度半定量分析 | 第31-32页 |
| 3.11 Western blot测定蛋白量 | 第32-33页 |
| 3.12 Cathepsin B活性检测 | 第33页 |
| 3.13 Cathepsin D活性检测 | 第33页 |
| 3.14 统计学方法 | 第33页 |
| 4 结果 | 第33-58页 |
| 4.1 ADNL主要成分含量分析 | 第33-35页 |
| 4.2 大鼠海马神经元鉴定 | 第35-36页 |
| 4.3 ADNL改善Aβ_(25-35)诱导的大鼠海马神经元轴突变性 | 第36-41页 |
| 4.4 ADNL诱导大鼠海马神经元自噬流 | 第41-51页 |
| 4.5 ADNL通过诱导自噬保护Aβ25-35诱导的大鼠海马神经元轴突变性损伤 | 第51-58页 |
| 5 讨论 | 第58-61页 |
| 6 结论 | 第61-62页 |
| 第二部分 石斛碱通过m TOR/ULK1 信号通路诱导自噬改善Aβ25-35诱导的PC12 细胞损伤 | 第62-85页 |
| 1 前言 | 第62页 |
| 2 实验材料 | 第62-66页 |
| 2.1 PC12 细胞 | 第62页 |
| 2.2 主要药品和试剂 | 第62-66页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第66页 |
| 3 实验方法 | 第66-72页 |
| 3.1 主要试剂的配制 | 第66-67页 |
| 3.2 PC12 细胞培养 | 第67页 |
| 3.3 MTT比色法测定细胞活力 | 第67页 |
| 3.4 PC12 过表达GFP-LC3B及 GFP-LC3B荧光斑定量分析、DQ-BSA-RED染色及荧光半定量分析 | 第67页 |
| 3.5 建立ULK1 基因敲减PC12 细胞株 | 第67-69页 |
| 3.6 Western blot测定蛋白量 | 第69页 |
| 3.7 Real time RT-PCR | 第69-70页 |
| 3.8 流式细胞仪检测Aβ25-35诱导的PC12 细胞坏死与凋亡 | 第70-71页 |
| 3.9 透射电镜观察PC12 细胞自噬体 | 第71页 |
| 3.10 细胞LDH漏出率测定 | 第71-72页 |
| 3.11 统计学方法 | 第72页 |
| 4 结果 | 第72-82页 |
| 4.1 石斛碱诱导PC12 细胞自噬流 | 第72-76页 |
| 4.2 石斛碱通过m TOR/ULK1 通路诱导PC12 细胞自噬 | 第76-80页 |
| 4.3 石斛碱通过诱导自噬改善Aβ25-35所致的PC12 细胞损伤 | 第80-82页 |
| 5 讨论 | 第82-84页 |
| 6 结论 | 第84-85页 |
| 全文小结 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 学术论文和科研成果目录 | 第96-98页 |
