| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 乳腺癌现状概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 我国近年来乳腺癌近况 | 第12页 |
| 1.1.2 我国女性患乳腺癌的发病机理 | 第12-13页 |
| 1.1.4 乳腺癌癌变前模型的发展 | 第13-14页 |
| 1.1.5 转移性乳腺癌模型的发展 | 第14页 |
| 1.2 髓性抑制细胞(MDSCs)概述 | 第14-20页 |
| 1.2.1 MDSCs的研究史 | 第14-15页 |
| 1.2.2 小鼠MDSCs亚群定义以及分离 | 第15-17页 |
| 1.2.3 MDSCs生化特性 | 第17-19页 |
| 1.2.4 MDSCs功能评判标准 | 第19-20页 |
| 1.3 细胞凋亡、免疫与肿瘤发生关系概述 | 第20-22页 |
| 第二章 建立4T1小鼠肿瘤模型 | 第22-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试验试剂及配制方法 | 第22页 |
| 2.1.4 试验用主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 乳腺肿瘤细胞系的准备 | 第23-24页 |
| 2.2.2 麻醉药的配制及效果评估 | 第24页 |
| 2.2.3 小鼠乳腺肿瘤模型的建立 | 第24页 |
| 2.2.4 肿瘤模生长曲线及器官重量 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-27页 |
| 2.3.1 戊巴比妥那麻醉剂麻醉效果 | 第25页 |
| 2.3.2 小鼠乳腺肿瘤生长曲线及器官重量 | 第25-27页 |
| 第三章 小鼠脾脏MDSC细胞分离 | 第27-38页 |
| 3.1 试验材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 Balb/C雌性鼠 | 第27页 |
| 3.1.2 细胞系 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试验试剂及配方 | 第27页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.5 主要仪器及耗材 | 第28-29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 吉姆萨染色 | 第29页 |
| 3.2.2 脾脏单细胞获取及抗体标记 | 第29页 |
| 3.2.3 单细胞悬液抗体标记 | 第29-30页 |
| 3.2.4 流式细胞仪上机检测 | 第30页 |
| 3.2.5 OptiPrepTM分离液分离脾脏细胞 | 第30-31页 |
| 3.3 小鼠脾脏免疫细胞亚群分析 | 第31-35页 |
| 3.3.1 健康脾脏细胞与荷瘤小鼠脾脏细胞显微镜形态比较 | 第31-32页 |
| 3.3.2 小鼠免疫细胞亚型表面标志物划分 | 第32页 |
| 3.3.3 小鼠脾脏免疫细胞亚型圈门策略 | 第32-33页 |
| 3.3.4 小鼠脾脏免疫细胞亚型分析 | 第33-34页 |
| 3.3.5 小鼠脾脏中个淋巴细胞密度分析 | 第34-35页 |
| 3.4 细胞分离液分离小鼠脾脏MDSC细胞 | 第35-38页 |
| 第四章 小鼠脾脏MDSC细胞抗凋亡机制探究 | 第38-49页 |
| 4.1 试验材料 | 第38-41页 |
| 4.1.1 试验耗材及药品 | 第38-39页 |
| 4.1.2 试剂配制 | 第39-41页 |
| 4.1.3 主要抗体 | 第41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-45页 |
| 4.2.1 细胞分离同3.2.5 | 第41-42页 |
| 4.2.2 细胞总RNA提取(Trizol法) | 第42页 |
| 4.2.3 反转录合成cDNA步骤及程序 | 第42-43页 |
| 4.2.4 PCR步骤及程序 | 第43页 |
| 4.2.5 细胞总蛋白提取 | 第43页 |
| 4.2.6 蛋白免疫印迹(Western) | 第43-45页 |
| 4.3 试验结果 | 第45-49页 |
| 4.3.1 趋化因子家族基因相对表达量检测 | 第45页 |
| 4.3.2 干扰素家族基因相对表达量检测 | 第45-46页 |
| 4.3.3 干扰素家族基因相对表达量检测 | 第46页 |
| 4.3.4 STAT族基因相对表达量检测 | 第46页 |
| 4.3.5 Caspase家族基因相对表达量检测 | 第46-47页 |
| 4.3.6 细胞周期相关基因相对表达量检测 | 第47页 |
| 4.3.7 抗凋亡与凋亡相关通路蛋白Western检测 | 第47-49页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第49-51页 |
| 5.1 讨论 | 第49-50页 |
| 5.2 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第61-62页 |
