摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第13-19页 |
1.1 花青素生物合成途径研究进展 | 第13-15页 |
1.2 芸薹属花青素合成相关基因研究进展 | 第15-16页 |
1.3 DFR蛋白研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 DFR结构特征 | 第16-17页 |
1.3.2 DFR的功能 | 第17页 |
1.3.3 DFR基因的转录调控 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的与意义及技术路线 | 第18-19页 |
1.4.1 本研究的目的与意义 | 第18页 |
1.4.2 技术路线 | 第18-19页 |
第二章 羽衣甘蓝不同颜色品种色素含量研究 | 第19-24页 |
2.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.2 试验试剂 | 第19页 |
2.1.3 试验仪器 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-20页 |
2.2.1 花青素含量的测定 | 第19-20页 |
2.2.2 叶绿素及类胡萝卜素含量的测定 | 第20页 |
2.3 结果与分析 | 第20-22页 |
2.3.1 不同品种羽衣甘蓝色素含量比较 | 第20-21页 |
2.3.2 同一品种羽衣甘蓝内叶外叶色素含量比较 | 第21-22页 |
2.4 讨论 | 第22-24页 |
第三章 羽衣甘蓝粉色叶候选基因的验证 | 第24-29页 |
3.1 试验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 试验材料 | 第24-25页 |
3.1.2 试验试剂 | 第25页 |
3.1.3 试验仪器 | 第25页 |
3.2 试验方法 | 第25-26页 |
3.2.1 羽衣甘蓝叶片DNA的提取 | 第25页 |
3.2.2 羽衣甘蓝粉色叶候选基因的预测 | 第25-26页 |
3.2.3 开发分子标记 | 第26页 |
3.2.4 羽衣甘蓝粉色叶候选基因DFR的PCR验证 | 第26页 |
3.3 结果与分析 | 第26-27页 |
3.3.1 分子标记在亲本、池间及F_2群体中的PCR检验 | 第26-27页 |
3.4 讨论 | 第27-29页 |
第四章 羽衣甘蓝DFR基因的克隆及序列分析 | 第29-38页 |
4.1 试验材料 | 第29页 |
4.1.1 试验材料 | 第29页 |
4.1.2 试验试剂 | 第29页 |
4.1.3 试验仪器 | 第29页 |
4.2 试验方法 | 第29-31页 |
4.2.1 羽衣甘蓝叶片总RNA的提取 | 第29页 |
4.2.2 反转录合成第一链cDNA | 第29-30页 |
4.2.3 羽衣甘蓝DFR基因的克隆及测序 | 第30-31页 |
4.2.4 羽衣甘蓝DFR蛋白的生物信息学分析 | 第31页 |
4.3 结果与分析 | 第31-36页 |
4.3.1 菌落PCR检测 | 第31-32页 |
4.3.2 羽衣甘蓝DFR蛋白的生物信息学分析 | 第32-34页 |
4.3.3 DFR蛋白二级结构及三级结构预测 | 第34-35页 |
4.3.4 十字花科植物DFR蛋白的同源性分析及系统进化树构建 | 第35-36页 |
4.4 讨论 | 第36-38页 |
第五章 DFR基因植物表达载体构建 | 第38-43页 |
5.1 试验材料 | 第38页 |
5.1.1 试验材料 | 第38页 |
5.1.2 试验试剂 | 第38页 |
5.1.3 试验仪器 | 第38页 |
5.2 试验方法 | 第38-39页 |
5.2.1 羽衣甘蓝总RNA的提取和cDNA第一条链的合成 | 第38页 |
5.2.2 扩增DFR基因cds全长 | 第38-39页 |
5.2.3 酶切pCAMBIA3301表达载体 | 第39页 |
5.2.4 建立In-Fusion反应体系 | 第39页 |
5.2.5 转化大肠杆菌感受态细胞 | 第39页 |
5.3 结果与分析 | 第39-41页 |
5.3.1 DFR基因cds的克隆及pCAMBIA 3301载体的酶切 | 第39-40页 |
5.3.2 pCAMBIA 3301-DFR表达载体的构建 | 第40-41页 |
5.4 讨论 | 第41-43页 |
第六章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读学位期间发表文章 | 第51-52页 |