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羽衣甘蓝粉色叶相关基因DFR的克隆及表达载体构建

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-19页
    1.1 花青素生物合成途径研究进展第13-15页
    1.2 芸薹属花青素合成相关基因研究进展第15-16页
    1.3 DFR蛋白研究进展第16-18页
        1.3.1 DFR结构特征第16-17页
        1.3.2 DFR的功能第17页
        1.3.3 DFR基因的转录调控第17-18页
    1.4 本研究的目的与意义及技术路线第18-19页
        1.4.1 本研究的目的与意义第18页
        1.4.2 技术路线第18-19页
第二章 羽衣甘蓝不同颜色品种色素含量研究第19-24页
    2.1 试验材料第19页
        2.1.1 试验材料第19页
        2.1.2 试验试剂第19页
        2.1.3 试验仪器第19页
    2.2 试验方法第19-20页
        2.2.1 花青素含量的测定第19-20页
        2.2.2 叶绿素及类胡萝卜素含量的测定第20页
    2.3 结果与分析第20-22页
        2.3.1 不同品种羽衣甘蓝色素含量比较第20-21页
        2.3.2 同一品种羽衣甘蓝内叶外叶色素含量比较第21-22页
    2.4 讨论第22-24页
第三章 羽衣甘蓝粉色叶候选基因的验证第24-29页
    3.1 试验材料第24-25页
        3.1.1 试验材料第24-25页
        3.1.2 试验试剂第25页
        3.1.3 试验仪器第25页
    3.2 试验方法第25-26页
        3.2.1 羽衣甘蓝叶片DNA的提取第25页
        3.2.2 羽衣甘蓝粉色叶候选基因的预测第25-26页
        3.2.3 开发分子标记第26页
        3.2.4 羽衣甘蓝粉色叶候选基因DFR的PCR验证第26页
    3.3 结果与分析第26-27页
        3.3.1 分子标记在亲本、池间及F_2群体中的PCR检验第26-27页
    3.4 讨论第27-29页
第四章 羽衣甘蓝DFR基因的克隆及序列分析第29-38页
    4.1 试验材料第29页
        4.1.1 试验材料第29页
        4.1.2 试验试剂第29页
        4.1.3 试验仪器第29页
    4.2 试验方法第29-31页
        4.2.1 羽衣甘蓝叶片总RNA的提取第29页
        4.2.2 反转录合成第一链cDNA第29-30页
        4.2.3 羽衣甘蓝DFR基因的克隆及测序第30-31页
        4.2.4 羽衣甘蓝DFR蛋白的生物信息学分析第31页
    4.3 结果与分析第31-36页
        4.3.1 菌落PCR检测第31-32页
        4.3.2 羽衣甘蓝DFR蛋白的生物信息学分析第32-34页
        4.3.3 DFR蛋白二级结构及三级结构预测第34-35页
        4.3.4 十字花科植物DFR蛋白的同源性分析及系统进化树构建第35-36页
    4.4 讨论第36-38页
第五章 DFR基因植物表达载体构建第38-43页
    5.1 试验材料第38页
        5.1.1 试验材料第38页
        5.1.2 试验试剂第38页
        5.1.3 试验仪器第38页
    5.2 试验方法第38-39页
        5.2.1 羽衣甘蓝总RNA的提取和cDNA第一条链的合成第38页
        5.2.2 扩增DFR基因cds全长第38-39页
        5.2.3 酶切pCAMBIA3301表达载体第39页
        5.2.4 建立In-Fusion反应体系第39页
        5.2.5 转化大肠杆菌感受态细胞第39页
    5.3 结果与分析第39-41页
        5.3.1 DFR基因cds的克隆及pCAMBIA 3301载体的酶切第39-40页
        5.3.2 pCAMBIA 3301-DFR表达载体的构建第40-41页
    5.4 讨论第41-43页
第六章 结论第43-44页
参考文献第44-50页
致谢第50-51页
攻读学位期间发表文章第51-52页

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