摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
主要缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-20页 |
1.1 研究背景 | 第13-17页 |
1.1.1 胰腺癌 | 第13页 |
1.1.2 长链非编码RNA | 第13-14页 |
1.1.3 UCA1在肿瘤中的作用 | 第14-15页 |
1.1.4 KRAS及YAP1在肿瘤中的作用 | 第15页 |
1.1.5 竞争性内源RNA | 第15-17页 |
1.2 研究的目的、内容与技术路线 | 第17-20页 |
1.2.1 研究目的 | 第17-18页 |
1.2.2 研究内容 | 第18页 |
1.2.3 研究技术路线图 | 第18-20页 |
第二章 数据库分析UCA1、KRAS和YAP1在胰腺癌组织中的表达及生物信息学预测. | 第20-26页 |
2.1 所用数据库 | 第20页 |
2.2 分析过程 | 第20-21页 |
2.2.1 UCA1在胰腺癌组织中的表达量 | 第20页 |
2.2.2 UCA1与胰腺癌患者生存期的关联 | 第20页 |
2.2.3 UCA1、KRAS和YAP1表达相关性 | 第20-21页 |
2.2.4 UCA1、KRAS和YAP1之间共享miRNA预测 | 第21页 |
2.2.5 共享miRNA在胰腺癌中的表达水平 | 第21页 |
2.3 结果 | 第21-24页 |
2.3.1 UCA1在胰腺癌组织中呈高表达 | 第21-22页 |
2.3.2 UCA1的表达量与胰腺癌患者生存期相关 | 第22页 |
2.3.3 UCA1、KRAS和YAP1在胰腺癌组织中的表达呈正相关 | 第22-23页 |
2.3.4 共享miRNA预测结果 | 第23-24页 |
2.3.5 共享miRNA在胰腺癌组织中的表达相对较低 | 第24页 |
2.4 讨论 | 第24-26页 |
第三章 检测UCA1的表达水平及载体的构建与鉴定 | 第26-39页 |
3.1 实验材料 | 第26-28页 |
3.1.1 胰腺癌细胞、菌种及质粒 | 第26页 |
3.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
3.1.3 溶液配制 | 第27页 |
3.1.4 主要耗材 | 第27-28页 |
3.1.5 实验设备 | 第28页 |
3.2 实验方法 | 第28-35页 |
3.2.1 细胞培养 | 第28-29页 |
3.2.2 干扰质粒sh-UCA1的构建 | 第29-32页 |
3.2.3 包装病毒 | 第32页 |
3.2.4 感染细胞 | 第32-33页 |
3.2.5 质粒瞬时转染 | 第33页 |
3.2.6 RNA提取 | 第33-34页 |
3.2.7 qRT-PCR | 第34-35页 |
3.3 统计学分析 | 第35页 |
3.4 结果 | 第35-38页 |
3.4.1 四种胰腺癌细胞系中UCA1的表达 | 第35页 |
3.4.2 sh-UCA1重组质粒构建 | 第35-36页 |
3.4.3 UCA1过表达质粒鉴定 | 第36-37页 |
3.4.4 sh-UCA1质粒干扰效果验证 | 第37页 |
3.4.5 UCA1质粒过表达效果验证 | 第37-38页 |
3.5 讨论 | 第38-39页 |
第四章 UCA1作为ceRNA调控KRAS、YAP1的表达 | 第39-60页 |
4.1 实验材料 | 第39-41页 |
4.1.1 主要细胞及质粒 | 第39页 |
4.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
4.1.3 溶液配制 | 第40页 |
4.1.4 主要耗材 | 第40页 |
4.1.5 实验设备 | 第40-41页 |
4.2 实验方法 | 第41-46页 |
4.2.1 细胞培养 | 第41页 |
4.2.2 细胞转染 | 第41-42页 |
4.2.3 qRT-PCR | 第42-43页 |
4.2.4 WesternBlot | 第43-45页 |
4.2.5 RNA免疫共沉淀 | 第45-46页 |
4.2.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第46页 |
4.3 统计学分析 | 第46页 |
4.4 结果 | 第46-57页 |
4.4.1 UCA1促进KRAS、YAP1的表达 | 第46-48页 |
4.4.2 目标共享miRNA的筛选 | 第48-49页 |
4.4.3 UCA1靶向结合并抑制miR-590-3p和miR-18a的表达 | 第49-53页 |
4.4.4 UCA1与KRAS竞争性结合miR-590-3p | 第53-55页 |
4.4.5 UCA1与YAP1竞争性结合miR-18a | 第55-57页 |
4.5 讨论 | 第57-60页 |
第五章 主要结论与展望 | 第60-62页 |
5.1 主要结论 | 第60页 |
5.2 工作展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
综述 长链非编码RNA作为竞争性内源RNA在肿瘤发生发展中的作用 | 第68-74页 |
参考文献 | 第72-74页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |