摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要符号表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-22页 |
1.1 研究背景及意义 | 第11-12页 |
1.2 基因编辑技术及其原理 | 第12-15页 |
1.2.1 ZFNs技术原理 | 第12-13页 |
1.2.2 TALENs技术原理 | 第13-14页 |
1.2.3 CRISPR/Cas9 技术原理 | 第14-15页 |
1.3 基因编辑技术的应用 | 第15-17页 |
1.3.1 CRISPR技术在动物育种中的应用 | 第15-16页 |
1.3.2 CRISPR技术在植物育种中的应用 | 第16页 |
1.3.3 CRISPR技术在分子检测中的应用 | 第16-17页 |
1.4 基因编辑产品筛选和检测鉴定的方法 | 第17-18页 |
1.4.1 T7 核酸内切酶I(T7E1)检测法 | 第17页 |
1.4.2 临界退火温度PCR(ACT-PCR)检测法 | 第17页 |
1.4.3 高分辨率熔解曲线(HRM)分析法 | 第17页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR(qPCR)方法 | 第17-18页 |
1.4.5 数字PCR方法 | 第18页 |
1.5 主要研究内容及技术路线 | 第18-22页 |
1.5.1 主要研究内容 | 第18-19页 |
1.5.2 技术路线 | 第19-22页 |
第二章 基于qPCR方法检测编辑TGW6 基因水稻 | 第22-30页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 实验试材 | 第22-23页 |
2.1.2 实验仪器 | 第23页 |
2.1.3 实验试剂 | 第23页 |
2.1.4 引物 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 DNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 qPCR方法的灵敏度和特异性的检测 | 第24-25页 |
2.2.3 对编辑TGW6 基因水稻的检测 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
2.3.1 qPCR方法的灵敏度和特异性分析 | 第25-26页 |
2.3.2 对编辑TGW6 基因水稻的检测结果分析 | 第26-28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
第三章 基因编辑检测传统方法的比较 | 第30-41页 |
3.1 实验材料 | 第30页 |
3.1.1 实验试材 | 第30页 |
3.1.2 实验仪器 | 第30页 |
3.1.3 实验试剂 | 第30页 |
3.1.4 引物 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-33页 |
3.2.1 T7E1 检测法 | 第30-32页 |
3.2.3 ACT-PCR检测法 | 第32页 |
3.2.4 HRM分析法 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-39页 |
3.3.1 T7E1 检测法的结果分析 | 第33-34页 |
3.3.2 ACT-PCR检测法的结果分析 | 第34-35页 |
3.3.3 HRM分析法的结果分析 | 第35-38页 |
3.3.4 三种测定方法的比较 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 基于数字PCR检测编辑TGW6 基因水稻 | 第41-51页 |
4.1 实验材料 | 第41-42页 |
4.1.1 实验试材 | 第41页 |
4.1.2 实验仪器 | 第41页 |
4.1.3 实验试剂 | 第41-42页 |
4.1.4 引物 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-43页 |
4.2.1 DNA的提取 | 第42页 |
4.2.2 DNA浓度的确定 | 第42页 |
4.2.3 引物探针的筛选 | 第42页 |
4.2.4 数字PCR方法对编辑TGW6 基因水稻的检测 | 第42-43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-49页 |
4.3.1 DNA浓度分析 | 第43-44页 |
4.3.2 引物探针的筛选结果 | 第44-47页 |
4.3.3 数字PCR方法的检测结果分析 | 第47-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 Marker图谱 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简历 | 第59页 |