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RNA结合蛋白QKI在结肠癌演变中的表达变化及其功能研究

缩略语表第1-9页
中文摘要第9-13页
ABSTRACT第13-19页
前言第19-20页
文献回顾第20-41页
实验一 RNA 结合蛋白QKI 在结肠细胞分化过程中的表达变化第41-54页
 引言第41页
 1 实验材料与主要仪器第41-43页
   ·实验材料第41页
   ·主要试剂第41-42页
   ·主要仪器第42-43页
 2 实验方法第43-48页
   ·蜡块包埋与免疫组化染色第43-44页
     ·蜡块包埋和切片制备第43页
     ·免疫组织化学检测第43-44页
   ·小鼠肠道组织不同分化状态细胞的分离第44页
   ·细胞培养第44-45页
   ·免疫印迹第45-46页
   ·RT-PCR第46-48页
 3 结果第48-51页
   ·RNA 结合蛋白QKI 在大鼠消化道上皮的表达第48-49页
   ·RNA 结合蛋白QKI 在小鼠结肠上皮不同分化细胞的表达第49-50页
   ·RNA 结合蛋白QKI 在HT29 细胞不同分化模型中的表达第50-51页
 4 讨论第51-54页
实验二 QKI 在结肠肿瘤中的表达异常及其分子机制第54-69页
 引言第54页
 1. 实验材料与主要仪器第54-56页
   ·实验材料第54-55页
   ·主要试剂第55-56页
   ·主要仪器第56页
 2. 实验方法第56-59页
   ·免疫组织化学检测第56页
   ·临床新鲜标本Western blot 检测第56-57页
   ·组织和细胞基因组DNA 的提取第57-58页
   ·基因表达RT-PCR 检测第58页
   ·T-A 克隆与测序第58-59页
 3 结果第59-66页
   ·RNA 结合蛋白QKI 在正常结肠上皮和结肠癌中的差异表达第59-60页
   ·QKI 在结肠癌中差异表达的机制第60-65页
   ·QKI 启动子甲基化与患者临床信息的相关性第65-66页
 4 讨论第66-69页
实验三 QKI 表达异常对结肠肿瘤细胞增殖和分化的影响第69-83页
 引言第69页
 1. 实验材料与主要仪器第69-70页
   ·实验材料第69页
   ·主要试剂第69-70页
   ·主要仪器第70页
 2. 实验方法第70-75页
   ·细胞转染第70-72页
   ·病毒感染第72页
   ·Western Blot 检测第72页
   ·MTT第72-73页
   ·软琼脂克隆形成实验第73页
   ·IAP 活性检测第73-74页
   ·RT-PCR 检测第74页
   ·细胞周期检测第74-75页
 3 结果第75-80页
   ·RNA 结合蛋白QKI 促进结肠上皮的分化第75-76页
   ·RNA 结合蛋白QKI 可以延长G1 期时相第76-79页
   ·RNA 结合蛋白QKI 抑制结肠癌细胞的生长第79-80页
 4 讨论第80-83页
实验四 QKI 表达异常参与肿瘤细胞生物学行为改变的分子机制第83-100页
 引言第83页
 1. 实验材料与主要仪器第83-85页
   ·实验材料第83-84页
   ·主要试剂第84页
   ·主要仪器第84-85页
 2. 实验方法第85-91页
   ·β-catenin 的mRNA 3’UTR 结构分析第85页
   ·报告系统的构建第85-87页
   ·细胞转染和荧光报告系统检测第87-88页
   ·RNA 免疫共沉淀(RNA-IP)第88-89页
   ·细胞免疫荧光第89页
   ·亚细胞组分分离第89-91页
   ·RNA 半衰期检测第91页
 3 结果第91-97页
   ·p27 在高密度条件下受QKI-5 的表达调节第91-93页
   ·β-catenin mRNA 3’UTR 进化上的保守性分析第93-94页
   ·β-catenin mRNA 3’UTR 受QKI 的转录后调节第94-97页
 4 讨论第97-100页
小结第100-102页
参考文献第102-110页
个人简历和研究成果第110-112页
致谢第112-113页

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