| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 高渗胁迫对细胞的影响 | 第10-11页 |
| 1.2 细胞应对高透胁迫的调节机制 | 第11-16页 |
| 1.2.1 细胞应对高渗胁迫系列反应 | 第11-13页 |
| 1.2.2 细胞应对高渗胁迫重要调节机制-NFAT | 第13-16页 |
| 1.3 miRNA与高渗胁迫 | 第16-17页 |
| 1.3.1 miRNA简介 | 第16页 |
| 1.3.2 miRNA生物学功能和调控机制 | 第16页 |
| 1.3.3 miRNAs在渗透胁迫中研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题研究目的、内容与意义 | 第17-19页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第19-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 SI转染 | 第21页 |
| 2.2.3 EDU细胞增值检测 | 第21-23页 |
| 2.2.4 MTS细胞活性检测 | 第23页 |
| 2.2.5 RNA深度测序-鉴定差异表达的mRNA和miRNA | 第23-24页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR(RT-PCR) | 第24-27页 |
| 2.2.7 miRNA靶基因预测 | 第27-28页 |
| 2.2.8 Westernblot实验检测蛋白质的表达水平 | 第28-30页 |
| 2.2.9 3′UTR荧光素酶报告基因测定 | 第30页 |
| 2.2.10 动物实验 | 第30-31页 |
| 2.2.11 数据处理 | 第31-32页 |
| 第3章 结果与分析 | 第32-51页 |
| 3.1 高渗胁迫引起miR-23a-5p下调 | 第32-40页 |
| 3.1.1 高渗胁迫模型建立与鉴定 | 第32页 |
| 3.1.2 高渗胁迫的miRNA表达谱测序 | 第32-35页 |
| 3.1.3 miRNA高通量测序结果的验证 | 第35-36页 |
| 3.1.4 miRNA在高渗不同时间表达变化 | 第36-38页 |
| 3.1.5 miR-23a-5p在不同渗透压下表达变化 | 第38页 |
| 3.1.6 miR-23a-5p表达变化的细胞特异性 | 第38-40页 |
| 3.2 抑制miR-23a-5p促进mIMCD3生长 | 第40-43页 |
| 3.2.1 抑制miR-23a-5p促进mIMCD3活性 | 第40-42页 |
| 3.2.2 抑制miR-23a-5p促进mIMCD3增殖 | 第42-43页 |
| 3.3 高渗胁迫下miR-23a-5p的调控机制 | 第43-49页 |
| 3.3.1 高渗胁迫下mIMCD3的转录组测序 | 第43-44页 |
| 3.3.2 抑制miR-23a-5p的转录组测序 | 第44-45页 |
| 3.3.3 转录组联合生物信息学分析 | 第45页 |
| 3.3.4 候选靶基因的qPCR验证 | 第45-49页 |
| 3.4 动物高渗胁迫时肾髓细胞miR-23a-5p的表达水平 | 第49-51页 |
| 第4章 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 在高渗胁迫下miRNA表达变化 | 第51-52页 |
| 4.2 miR-23a-5p的表达有细胞差异性 | 第52-53页 |
| 4.3 在高渗胁迫下miR-23a-5p促进细胞存活 | 第53页 |
| 4.4 在mIMCD3细胞高渗胁迫或抑制miR-23a-5pmRNA表达变化 | 第53-55页 |
| 第5章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第68页 |
