英文缩写索引 | 第3-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第12-16页 |
第一部分 ARL6IP5在肝癌组织及Huh7JFH1细胞中的表达 | 第16-38页 |
1.1 实验材料 | 第16-21页 |
1.1.1 组织标本、细胞株和主要试剂 | 第16-19页 |
1.1.2 相关溶液的配制 | 第19-21页 |
1.1.3 相关仪器设备 | 第21页 |
1.2 实验方法 | 第21-31页 |
1.2.1 细胞的培养、冻存与复苏 | 第21-23页 |
1.2.2 组织标本的收集 | 第23-24页 |
1.2.3 实时荧光定量PCR检测 | 第24-26页 |
1.2.4 Western Blotting Assay(蛋白免疫印迹实验)检测 | 第26-31页 |
1.2.5 统计学分析与处理 | 第31页 |
1.3 实验结果 | 第31-36页 |
1.3.1 实时荧光定量PCR检测ARL6IP5在RNA水平的表达情况 | 第31-34页 |
1.3.2 Western blot检测基因ARL6IP5在蛋白水平的表达情况 | 第34-36页 |
1.4 结论及其意义 | 第36-38页 |
第二部分 ARL6IP5在人肝癌细胞株Huh7中的生物学功能 | 第38-69页 |
2.1 实验材料 | 第38-45页 |
2.1.1 组织标本,细胞株和主要试剂 | 第38-41页 |
2.1.2 相关溶液的配制 | 第41-44页 |
2.1.3 相关仪器设备 | 第44-45页 |
2.2 实验方法 | 第45-58页 |
2.2.1 细胞增殖实验(BrdU) | 第45-46页 |
2.2.2 细胞划痕愈合实验 | 第46-47页 |
2.2.3 平板细胞克隆形成实验 | 第47-49页 |
2.2.4 肿瘤细胞侵袭转移实验 | 第49-50页 |
2.2.5 流式细胞分选实验 | 第50-52页 |
2.2.6 小分子RNA干扰技术(siRNA) | 第52-53页 |
2.2.7 质粒DNA的扩增、抽提与转染 | 第53-58页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR与Western Blotting Assay检测 | 第58页 |
2.2.9 细胞的培养、冻存与复苏 | 第58页 |
2.2.10 统计学分析与处理 | 第58页 |
2.3 实验结果 | 第58-66页 |
2.3.1 稳定细胞株的鉴定结果 | 第58-59页 |
2.3.2 siRNA-ARL6IP5基因沉默的鉴定结果 | 第59-60页 |
2.3.3 细胞增殖实验(BrdU) | 第60页 |
2.3.4 细胞划痕愈合实验 | 第60-62页 |
2.3.5 细胞克隆形成实验 | 第62-64页 |
2.3.6 肿瘤细胞侵袭转移实验 | 第64-65页 |
2.3.7 流式细胞分选实验 | 第65页 |
2.3.8 Western blot检测 | 第65-66页 |
2.4 结论及其意义 | 第66-69页 |
第三部分 ARL6IP5在人肝永生化细胞MIHA中的实验研究 | 第69-80页 |
3.1 实验材料 | 第69页 |
3.1.1 组织标本、细胞株和主要试剂 | 第69页 |
3.1.2 相关溶液的配制 | 第69页 |
3.1.3 相关仪器设备 | 第69页 |
3.2 实验方法 | 第69-70页 |
3.2.1 细胞增殖实验(BrdU) | 第69页 |
3.2.2 细胞划痕愈合实验 | 第69-70页 |
3.2.3 平板细胞克隆形成实验 | 第70页 |
3.2.4 肿瘤细胞侵袭转移实验 | 第70页 |
3.2.5 流式细胞分选实验 | 第70页 |
3.2.6 小分子RNA干扰技术(siRNA) | 第70页 |
3.2.7 质粒DNA的扩增、抽提与转染 | 第70页 |
3.2.8 实时荧光定量PCR与Western Blotting Assay检测 | 第70页 |
3.2.9 细胞的培养、冻存与复苏 | 第70页 |
3.2.10 统计学分析与处理 | 第70页 |
3.3 实验结果 | 第70-79页 |
3.3.1 稳定细胞株的鉴定结果 | 第70-71页 |
3.3.2 siRNA-ARL6IP5基因沉默的鉴定结果 | 第71-72页 |
3.3.3 细胞增殖实验(BrdU) | 第72页 |
3.3.4 细胞划痕愈合实验 | 第72-74页 |
3.3.5 细胞克隆形成实验 | 第74-76页 |
3.3.6 肿瘤细胞侵袭转移实验 | 第76页 |
3.3.7 流式细胞分选实验 | 第76-77页 |
3.3.8 Western blot检测 | 第77-79页 |
3.4 结论及其意义 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
攻读学位期间成果 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |