| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1. 国内外乌头属的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1 乌头属生物学特性 | 第10页 |
| 1.2 乌头的化学成分和剧毒特性研究 | 第10-11页 |
| 1.3 维西乌头无毒属性 | 第11页 |
| 1.4 乌头炮制研究近况及缺陷 | 第11页 |
| 2. 植物BAHD酰基转移酶家族研究进展 | 第11-14页 |
| 2.1 BAHD家族的命名和化学性质 | 第12页 |
| 2.2 酰基化反应 | 第12-13页 |
| 2.3 BAHD酰基转移酶家族成员的结构保守性及其催化机理 | 第13页 |
| 2.4 BAHD进化分析 | 第13-14页 |
| 3. 论文的设计思路 | 第14-16页 |
| 3.1 研究的目的和意义 | 第14页 |
| 3.2 研究内容 | 第14-15页 |
| 3.3 技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 基于乌头转录组测序的BAHD酰基转移酶基因生物信息学分析 | 第16-23页 |
| 1. 实验材料 | 第16页 |
| 1.1 实验材料 | 第16页 |
| 2. 实验方法 | 第16页 |
| 2.1 实验方法 | 第16页 |
| 3. 结果与分析 | 第16-21页 |
| 3.1 BAHD基因ORF预测 | 第16-17页 |
| 3.2 蛋白质亲水性分析 | 第17-18页 |
| 3.3 蛋白质结构预测 | 第18-19页 |
| 3.4 信号肽预测 | 第19-21页 |
| 4. 讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 BAHD基因克隆及生物信息学分析 | 第23-50页 |
| 1. 实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 植物材料和载体 | 第23页 |
| 1.2 主要仪器、试剂和试剂盒 | 第23页 |
| 1.3 TAB溶液的配制 | 第23-24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.1 引物 | 第24页 |
| 2.2 基因组DNA提取 | 第24页 |
| 2.3 PCR扩增目的片段 | 第24-26页 |
| 2.4 克隆载体构建 | 第26页 |
| 2.5 连接产物转化大肠杆菌 | 第26页 |
| 2.6 改良的质粒DNA小量提取 | 第26-27页 |
| 2.7 重组克隆质粒鉴定 | 第27页 |
| 2.7.1 重组质粒PCR鉴定 | 第27页 |
| 2.7.2 重组克隆质粒酶切鉴定 | 第27页 |
| 2.8 DNA序列测定 | 第27页 |
| 2.9 序列分析 | 第27-28页 |
| 3. 结果与分析 | 第28-47页 |
| 3.1 三个乌头属中BAHD基因扩增结果 | 第28-31页 |
| 3.2 三个乌头属BAHD基因序列比对 | 第31-34页 |
| 3.3 乌头转录组注释为BAHD基因氨基酸保守结构域HXXXD、DFGWG和YFGN的分布图 | 第34-35页 |
| 3.4 乌头扩增的BAHD基因氨基酸保守结构域HXXXD、DFGWG和YFGN的分布图 | 第35-36页 |
| 3.5 维西乌头BAHD基因氨基酸保守结构域HXXXD、DFGWG和YFGN的分布图 | 第36-37页 |
| 3.6 黄草乌BAHD基因氨基酸保守结构域HXXXD、DFGWG和YFGN的分布图 | 第37-39页 |
| 3.7 乌头转录组注释为BAHD基因进化分析 | 第39-41页 |
| 3.8 乌头扩增的BAHD基因的进化关系 | 第41-42页 |
| 3.9 将乌头和维西乌头中BAHD序列进行系统发育树构建 | 第42-43页 |
| 3.10 乌头、维西乌头和黄草乌的BAHD基因序构建系统发育树 | 第43-45页 |
| 3.11 对乌头、黄草乌和维西乌头中的3条BAHD基因进行序列比对 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 乌头候选BAHD基因的时空表达特征 | 第50-63页 |
| 1. 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 样品采集准备 | 第50页 |
| 1.2 实验试剂 | 第50-51页 |
| 2. 实验方法 | 第51-53页 |
| 2.1 RNA提取液的配制 | 第51页 |
| 2.2 总RNA的提取 | 第51页 |
| 2.3 总RNA质量检测 | 第51-52页 |
| 2.4 合成cDNA第一链 | 第52页 |
| 2.5 引物设计 | 第52-53页 |
| 3. 结果与分析 | 第53-61页 |
| 3.1 RNA提取结果 | 第53-54页 |
| 3.2 乌头BAHD基因的在不同器官和不同发育阶段的相对表达量 | 第54-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 结论与展望 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 附件 | 第73-93页 |
| 附表1 BAHD基因扩增引物 | 第74-75页 |
| 附表2 相对表达量引物 | 第75-77页 |
| 附件3 系统发育树中己发表的BAHD参考基因的基本信息 | 第77-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
