摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第13-15页 |
第1章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 泡沫病毒概述 | 第15-19页 |
1.1.1 泡沫病毒分类与形态结构 | 第15-16页 |
1.1.2 泡沫病毒基因组结构与转录调控 | 第16-17页 |
1.1.3 泡沫病毒增殖 | 第17-18页 |
1.1.4 抗泡沫病毒的细胞因子及作用机制 | 第18-19页 |
1.2 GBP1概述 | 第19-22页 |
1.2.1 GBP1的分类及属性 | 第19页 |
1.2.2 GBP1的分子结构 | 第19-21页 |
1.2.3 GBP1的抗病毒功能 | 第21-22页 |
1.2.4 GBP1的其他生物学功能 | 第22页 |
1.3 选题依据和意义 | 第22-23页 |
1.4 实验流程图 | 第23-25页 |
第2章 GBP1真核表达载体与慢病毒表达载体构建 | 第25-39页 |
2.1 pcDNA3.1-GBP1真核表达载体构建 | 第25-31页 |
2.1.1 实验材料与仪器设备 | 第25-27页 |
2.1.1.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1.2 仪器与耗材 | 第27页 |
2.1.2 实验方法与步骤 | 第27-31页 |
2.2 pLV-IRES-eGFP-GBP1慢病毒载体构建 | 第31-34页 |
2.2.1 实验材料与仪器设备 | 第31页 |
2.2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.2.1.2 仪器设备 | 第31页 |
2.2.2 实验方法与步骤 | 第31-34页 |
2.3 实验结果 | 第34-36页 |
2.4 小结 | 第36-39页 |
第3章 慢病毒包装与过表达细胞系建立 | 第39-51页 |
3.1 慢病毒包装 | 第39-43页 |
3.1.1 实验材料和仪器设备 | 第39-41页 |
3.1.1.1 实验材料 | 第39-41页 |
3.1.1.2 仪器设备 | 第41页 |
3.1.2 实验方法和步骤 | 第41-43页 |
3.2 HT1080-eGFP-GBP1细胞系构建 | 第43-49页 |
3.2.1 实验材料和仪器设备 | 第43-46页 |
3.2.1.1 实验材料 | 第43-45页 |
3.2.1.2 仪器设备 | 第45-46页 |
3.2.2 实验方法和步骤 | 第46-49页 |
3.3 实验结果 | 第49页 |
3.4 小结 | 第49-51页 |
第4章 过表达GBP1对PFV复制的影响 | 第51-61页 |
4.1 质粒pHSRV13、pcDNA3.1-GBP1共转染HT1080细胞系,检测Gag核酸与蛋白表达量 | 第51-54页 |
4.1.1 实验材料和仪器设备 | 第51-52页 |
4.1.1.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.1.1.2 仪器设备 | 第52页 |
4.1.2 实验方法和步骤 | 第52-54页 |
4.2 WB检测PFV感染目的细胞后胞内Gag蛋白表达量 | 第54-56页 |
4.2.1 实验材料和仪器设备 | 第54-55页 |
4.2.1.1 实验材料 | 第54页 |
4.2.1.2 仪器设备 | 第54-55页 |
4.2.2 实验方法和步骤 | 第55-56页 |
4.3 实验结果 | 第56-58页 |
4.4 小结 | 第58-61页 |
第5章 GBP1 knockdown对PFV复制的影响 | 第61-65页 |
5.1 GBP1 siRNA与pHSRV13共转染HT1080细胞系,检测Gag蛋白表达量 | 第61-62页 |
5.1.1 实验材料和仪器设备 | 第61-62页 |
5.1.1.1 实验材料 | 第61页 |
5.1.1.2 仪器设备 | 第61-62页 |
5.1.2 实验方法和步骤 | 第62页 |
5.2 实验结果 | 第62-64页 |
5.3 小结 | 第64-65页 |
第6章 GBP1影响PFV复制的动态进程 | 第65-73页 |
6.1 WB检测PFV感染目的细胞后不同时间点胞内结构蛋白与非结构蛋白表达量 | 第65-66页 |
6.1.1 实验材料和仪器设备 | 第65页 |
6.1.1.1 实验材料 | 第65页 |
6.1.1.2 仪器设备 | 第65页 |
6.1.2 实验方法和步骤 | 第65-66页 |
6.2 指示细胞系法检测PFV感染目的细胞后不同时间点细胞内外病毒滴度 | 第66-68页 |
6.2.1 实验材料和仪器设备 | 第66-67页 |
6.2.1.1 实验材料 | 第66页 |
6.2.1.2 仪器设备 | 第66-67页 |
6.2.2 实验方法和步骤 | 第67-68页 |
6.3 实验结果 | 第68-70页 |
6.4 小结 | 第70-73页 |
第7章 讨论与展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-85页 |
附录 | 第85-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
攻读硕士学位期间研究成果 | 第91页 |