| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 前言 | 第15-17页 |
| 1.2 狂犬病毒的病原学 | 第17-18页 |
| 1.3 致病性与免疫性 | 第18页 |
| 1.4 流行区域 | 第18-19页 |
| 1.5 疫苗的使用和研究现状 | 第19-25页 |
| 1.5.1 国外疫苗的发展 | 第19-21页 |
| 1.5.2 我国狂犬病疫苗的历史和现状 | 第21-23页 |
| 1.5.2.1 地鼠肾细胞狂犬病疫苗 | 第22页 |
| 1.5.2.2 Vero细胞狂犬病疫苗的发展 | 第22-23页 |
| 1.5.3 最新研究进展 | 第23-25页 |
| 1.6 本论文的主要任务 | 第25-27页 |
| 第二章 狂犬病毒RNA提取及测序分析 | 第27-35页 |
| 2.1 前言 | 第27-28页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第28-30页 |
| 2.2.1 狂犬病毒 | 第28页 |
| 2.2.2 试剂与材料 | 第28页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第28页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第28-30页 |
| 2.2.4.1 病毒RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.2.4.2 引物设计 | 第29-30页 |
| 2.2.4.3 cDNA第一链合成 | 第30页 |
| 2.2.4.4 PCR反应 | 第30页 |
| 2.3 试验结果 | 第30-32页 |
| 2.3.1 PCR产物结果 | 第30-31页 |
| 2.3.2 测序结果的比对分析 | 第31-32页 |
| 2.4 小结 | 第32-35页 |
| 第三章 生物反应器大规模培养狂犬病毒研究 | 第35-45页 |
| 3.1 前言 | 第35-36页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 狂犬病毒及Vero细胞 | 第36页 |
| 3.2.2 试剂与材料 | 第36页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第36页 |
| 3.2.4 工艺流程 | 第36-37页 |
| 3.2.5 培养基 | 第37页 |
| 3.2.6 试验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.6.1 分析检测方法 | 第37页 |
| 3.2.6.2 pH电极的校正 | 第37页 |
| 3.2.6.3 溶氧电极标定 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 3.3.1 不同细胞接种浓度、不同微载体浓度的细胞生长曲线 | 第38-40页 |
| 3.3.2 不同病毒接种浓度对收获液病毒滴度的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.3 连续灌流收获液的病毒滴度曲线及抗原曲线 | 第41-43页 |
| 3.4 小结 | 第43-45页 |
| 第四章 狂犬病疫苗纯化方法研究 | 第45-53页 |
| 4.1 前言 | 第45-46页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第46-52页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2.3 试验方法 | 第46-47页 |
| 4.2.3.1 超滤浓缩、灭活 | 第46页 |
| 4.2.3.2 分子筛凝胶过滤纯化 | 第46页 |
| 4.2.3.3 阴离子交换层析纯化 | 第46-47页 |
| 4.2.3.4 阳离子交换层析纯化 | 第47页 |
| 4.2.4 结果与讨论 | 第47-52页 |
| 4.2.4.1 分子筛凝胶过滤纯化 | 第47-48页 |
| 4.2.4.2 阴离子交换填料纯化 | 第48-50页 |
| 4.2.4.3 阳离子交换填料纯化 | 第50-52页 |
| 4.3 小结 | 第52-53页 |
| 第五章 应用动物实验法进行初步安全性评价 | 第53-59页 |
| 5.1 前言 | 第53页 |
| 5.2 实验材料与检定方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第53页 |
| 5.2.2 检定方法 | 第53-54页 |
| 5.2.2.1 异常毒性检定 | 第53-54页 |
| 5.2.2.2 豚鼠全身过敏性试验 | 第54页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第54-57页 |
| 5.3.1 异常毒性实验结果 | 第54-55页 |
| 5.3.2 豚鼠全身过敏实验结果 | 第55-57页 |
| 5.3.2.1 豚鼠体重情况统计 | 第55页 |
| 5.3.2.2 豚鼠过敏情况统计 | 第55-57页 |
| 5.4 小结 | 第57-59页 |
| 5.4.1 豚鼠过敏试验 | 第57页 |
| 5.4.2 异常毒性试验 | 第57-59页 |
| 第六章 结论与建议 | 第59-61页 |
| 6.1 结论 | 第59页 |
| 6.2 建议 | 第59-61页 |
| 6.2.1 病毒核酸分析 | 第59页 |
| 6.2.2 病毒大规模培养工艺的放大 | 第59-60页 |
| 6.2.3 纯化工艺的优化 | 第60页 |
| 6.2.4 安全性评价的建议 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者及导师简介 | 第66-67页 |
| 附件 | 第67-68页 |
