摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-21页 |
1.1 课题的提出 | 第10-11页 |
1.2 文献综述 | 第11-20页 |
1.2.1 植物成花途径 | 第11-12页 |
1.2.2 植物miR156和miR172参与的年龄途径 | 第12-14页 |
1.2.3 植物miR156和miR172家族基因的研究进展 | 第14-18页 |
1.2.4 植物嫁接中microRNA移动性的研究进展 | 第18-20页 |
1.3 本研究的目的和主要内容 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株和载体质粒 | 第21-22页 |
2.1.3 实验主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 DNA提取 | 第23页 |
2.2.2 RNA提取 | 第23-24页 |
2.2.3 第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.4 目的片段扩增引物设计 | 第25页 |
2.2.5 目的片段扩增 | 第25-26页 |
2.2.6 目的片段回收 | 第26页 |
2.2.7 AT克隆 | 第26-27页 |
2.2.8 大肠杆菌转化 | 第27页 |
2.2.9 目的片段重组引物设计 | 第27-28页 |
2.2.10 大肠杆菌质粒提取 | 第28-29页 |
2.2.11 线性化克隆载体制备 | 第29页 |
2.2.12 一步法重组反应 | 第29-30页 |
2.2.13 质粒转化农杆菌 | 第30页 |
2.2.14 农杆菌介导的烟草转化 | 第30-31页 |
2.2.15 拟南芥遗传转化 | 第31-32页 |
2.2.16 拟南芥种子筛选 | 第32页 |
2.2.17 烟草正反嫁接试验 | 第32-33页 |
2.2.18 实时荧光定量 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-52页 |
3.1 柑橘miR156和miR172基因家族的序列分析 | 第34-36页 |
3.2 柑橘miR156和miR172基因家族成员载体构建和遗传转化 | 第36-39页 |
3.2.1 柑橘miR156和miR172基因家族成员超表达载体构建 | 第36-37页 |
3.2.2 柑橘miR156和miR172基因家族成员遗传转化 | 第37-39页 |
3.3 miR156和miR172基因家族成员功能分析 | 第39-46页 |
3.4 柑橘miR156和miR172基因长距离移动性分析 | 第46-52页 |
4 讨论 | 第52-55页 |
4.1 柑橘miR156和miR172基因家族成员功能的保守性分析 | 第52页 |
4.2 柑橘miR156和miR172基因家族成员的长距离移动性分析 | 第52-53页 |
4.3 研究展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
附录 | 第63-67页 |
致谢 | 第67页 |