摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
1.1 卜氏晶囊轮虫基本的基本特征 | 第9-10页 |
1.2 轮虫的生态学研究进展 | 第10-12页 |
1.3 轮虫的分子生物学研究进展 | 第12-15页 |
1.3.1 抗氧化酶与热休克蛋白的作用研究 | 第12-14页 |
1.3.2 轮虫分子生物学研究 | 第14-15页 |
1.4 研究目的与意义 | 第15-17页 |
1.4.1 研究目的 | 第15-16页 |
1.4.2 研究意义 | 第16页 |
1.4.3 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 温度对卜氏晶囊轮虫生长发育各阶段历时的影响 | 第17-23页 |
2.1 材料与方法 | 第17-19页 |
2.1.1 轮虫的采集与培养 | 第17-18页 |
2.1.2 主要试验仪器 | 第18页 |
2.1.3 试验材料的单克隆培养与试验设计 | 第18-19页 |
2.1.4 试验各终点的计算方法 | 第19页 |
2.2 结果与分析 | 第19-21页 |
2.2.1 温度对卜氏晶囊轮虫寿命与与繁殖的影响 | 第19-21页 |
2.2.2 温度对卜氏晶囊轮虫生命周期各主要发育阶段历时的影响 | 第21页 |
2.3 讨论 | 第21-23页 |
第三章 卜氏晶囊轮虫抗氧化酶MnSOD基因的克隆和功能分析 | 第23-39页 |
3.1 材料与方法 | 第23-30页 |
3.1.1 主要试验仪器 | 第23页 |
3.1.2 轮虫总RNA的提取(TriZol法) | 第23-25页 |
3.1.3 RNA质量测定 | 第25页 |
3.1.4 RNA反转录 | 第25-26页 |
3.1.5 目的基因兼并引物设计 | 第26页 |
3.1.6 目的基因PCR扩增 | 第26页 |
3.1.7 目的基因PCR产物的割胶回收 | 第26页 |
3.1.8 连接PMDTM-19T载体 | 第26-27页 |
3.1.9 菌液PCR验证 | 第27页 |
3.1.10 测序比对 | 第27页 |
3.1.11 cDNA末端快速扩增技术(RACE)扩增基因全长 | 第27-28页 |
3.1.12 目的基因生物信息学分析 | 第28-29页 |
3.1.13 构建系统进化树 | 第29页 |
3.1.14 荧光定量PCR | 第29-30页 |
3.2 线粒体MnSOD基因的克隆和结构功能分析 | 第30-33页 |
3.2.1 线粒体MnSOD引物设计 | 第30-31页 |
3.2.2 线粒体MnSOD核苷酸序列分析 | 第31-32页 |
3.2.3 线粒体MnSOD多重序列比对 | 第32页 |
3.2.4 线粒体MnSOD三级结构的预测 | 第32-33页 |
3.3 细胞质MnSOD基因的克隆和结构功能分析 | 第33-36页 |
3.3.1 细胞质MnSOD引物设计 | 第33-34页 |
3.3.2 细胞质MnSOD核苷酸序列分析 | 第34-35页 |
3.3.3 细胞质MnSOD多重序列比对 | 第35-36页 |
3.3.4 细胞质MnSOD三级结构的预测 | 第36页 |
3.4 两种MnSOD系统进化树 | 第36-37页 |
3.5 讨论 | 第37-39页 |
第四章 温度对卜氏晶囊轮虫MnSOD与hsp70基因表达的影响 | 第39-47页 |
4.1 材料与方法 | 第39-41页 |
4.1.1 试验仪器 | 第40页 |
4.1.2 试验设计 | 第40页 |
4.1.3 数据处理 | 第40-41页 |
4.2 结果与分析 | 第41-45页 |
4.2.1 温度对卜氏晶囊轮虫线粒体MnSOD mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
4.2.2 温度对卜氏晶囊轮虫细胞质MnSOD mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
4.2.3 温度对卜氏晶囊轮虫hsp70 mRNA表达的影响 | 第43-45页 |
4.3 讨论 | 第45-47页 |
小结与展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |