| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 PEDV生物学特征 | 第10-11页 |
| 1.1 病毒形态 | 第10页 |
| 1.2 病毒理化特性 | 第10页 |
| 1.3 病毒的培养特性 | 第10-11页 |
| 2 PEDV的基因结构及其编码蛋白 | 第11-13页 |
| 2.1 PEDV基因结构 | 第11页 |
| 2.2 PEDV主要编码的蛋白和功能 | 第11-13页 |
| 3 PED流行病学、临诊症状和发病机理 | 第13-14页 |
| 3.1 PED流行病学 | 第13-14页 |
| 3.2 PED临床症状 | 第14页 |
| 3.3 发病机理 | 第14页 |
| 3.4 病理变化 | 第14页 |
| 4 PED诊断方法研究进展 | 第14-17页 |
| 4.1 ELISA方法 | 第14-15页 |
| 4.2 RT-PCR方法 | 第15-16页 |
| 4.3 免疫荧光方法 | 第16页 |
| 4.4 免疫电镜方法 | 第16页 |
| 4.5 病毒分离与鉴定 | 第16-17页 |
| 4.6 微量血清中和实验 | 第17页 |
| 4.7 胶体金实验技术 | 第17页 |
| 5 PED疫苗研究进展 | 第17-19页 |
| 5.1 灭活疫苗 | 第17-18页 |
| 5.2 弱毒疫苗 | 第18页 |
| 5.3 乳酸杆菌疫苗 | 第18-19页 |
| 5.4 转基因植物疫苗 | 第19页 |
| 5.5 亚单位疫苗 | 第19页 |
| 6 PED的预防与控制 | 第19页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 实验一 华南地区猪流行性腹泻病毒的分子流行病学调查与分析 | 第21-43页 |
| 1 材料和方法 | 第22-27页 |
| 1.1 材料 | 第22-23页 |
| 1.2 方法 | 第23-27页 |
| 1.3 数据分析 | 第27页 |
| 2 结果 | 第27-41页 |
| 2.1 抗原检测结果 | 第27-28页 |
| 2.2 PEDV S、M和ORF3基因扩增结果 | 第28页 |
| 2.3 PEDV S、M和ORF3基因参考序列 | 第28-31页 |
| 2.4 PEDV M基因核苷酸和氨基酸同源性分析 | 第31-33页 |
| 2.5 M基因系统进化分析 | 第33-35页 |
| 2.6 ORF3基因核苷酸和氨基酸同源性分析 | 第35-36页 |
| 2.7 ORF3基因系统进化分析 | 第36-38页 |
| 2.8 S基因核苷酸和氨基酸同源性分析 | 第38-39页 |
| 2.9 S基因系统进化分析 | 第39-41页 |
| 3 讨论 | 第41-43页 |
| 实验二 PEDV S基因的原核表达和ELISA检测方法建立 | 第43-61页 |
| 1 材料和方法 | 第43-51页 |
| 1.1 材料 | 第43-46页 |
| 1.2 方法 | 第46-51页 |
| 2 结果 | 第51-59页 |
| 2.1 S基因PCR扩增结果 | 第51-52页 |
| 2.2 重组质粒p ET32a-S双酶切鉴定 | 第52-53页 |
| 2.3 重组质粒的序列分析 | 第53页 |
| 2.4 重组质粒p ET32a-S在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第53-54页 |
| 2.5 诱导表达蛋白可溶性分析 | 第54-55页 |
| 2.6 包涵体蛋白纯化 | 第55页 |
| 2.7 重组蛋白Western-Blot鉴定 | 第55-56页 |
| 2.8 纯化蛋白浓度测定 | 第56页 |
| 2.9 抗原最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定 | 第56页 |
| 2.10 二抗最佳稀释倍数的确定 | 第56-57页 |
| 2.11 封闭液确定 | 第57页 |
| 2.12 临界值确定 | 第57页 |
| 2.13 批内重复实验结果 | 第57-58页 |
| 2.14 批间重复实验结果 | 第58页 |
| 2.15 交叉反应实验结果 | 第58页 |
| 2.16 符合率检测 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| ABSTRACT | 第69-70页 |
