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草鱼Ⅱ型细胞因子受体基因CRFB1和CRFB5的克隆、鉴定

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 前言第9-18页
    1.1 哺乳类动物干扰素第9-10页
    1.2 哺乳类动物干扰素受体第10-11页
    1.3 鱼类干扰素第11-14页
        1.3.1 鱼类I型干扰素第11-13页
        1.3.2 鱼类II型干扰素第13-14页
    1.4 鱼类干扰素受体第14-16页
        1.4.1 鱼类I型干扰素受体第14-15页
        1.4.2 鱼类II型干扰素受体第15-16页
    1.5 鱼类干扰素介导的信号通路第16-17页
    1.6 研究目的与意义第17-18页
第二章 材料和方法第18-38页
    2.1 材料第18-21页
        2.1.1 主要仪器设备第18-19页
        2.1.2 主要试剂第19-20页
        2.1.3 引物表第20-21页
        2.1.4 载体、菌种、鱼和细胞第21页
    2.2 实验方法第21-38页
        2.2.1 组织RNA提取第21-22页
        2.2.2 反转录合成cDNA第一条链第22-23页
        2.2.3 SMART cDNA的合成第23-24页
        2.2.4 草鱼CRFB1和CRFB5的克隆第24-28页
        2.2.5 分子鉴定及系统进化分析第28页
        2.2.6 细胞培养第28-29页
        2.2.7 CRFB1和CRFB5的诱导表达分析第29-31页
        2.2.8 草鱼IFN蛋白,CRFB1和CRFB5胞外域蛋白的原核表达第31-35页
        2.2.9 CiCRFB1、CiCRFB5蛋白与Ci IFN蛋白亲和力分析第35-38页
第三章 结果与分析第38-52页
    3.1 草鱼CRFB1及CRFB5 CDNA的克隆及其分析第38-43页
        3.1.1 草鱼CRFB1的克隆及其分析第38-41页
        3.1.2 草鱼CRFB5的克隆及其分析第41-43页
    3.2 系统进化分析第43-44页
    3.3 草鱼CRFB1和CRFB5的表达分析第44-46页
        3.3.1 紫外灭活的GCHV和Poly I:C诱导草鱼CRFB1基因的定量分析第44-45页
        3.3.2 紫外灭活的GCHV和Poly I:C诱导草鱼CRFB5基因的定量分析第45-46页
    3.4 草鱼IFN、CRFB1-EC和CRFB5-EC的蛋白第46-49页
        3.4.1 草鱼IFN、及CRFB1-EC和CRFB5-EC的原核表达和纯化第46-48页
        3.4.2 CiIFN, CiCRFB1-EC和CiCRFB5-EC蛋白质浓度的测定第48页
        3.4.3 CiIFN蛋白活力的测定第48-49页
    3.5 草鱼CRFB1、CRFB5蛋白与IFN蛋白亲和力第49-52页
第四章 结论与展望第52-55页
致谢第55-57页
参考文献第57-62页
附录:攻读学位期间发表论文第62页

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