摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-18页 |
1.1 哺乳类动物干扰素 | 第9-10页 |
1.2 哺乳类动物干扰素受体 | 第10-11页 |
1.3 鱼类干扰素 | 第11-14页 |
1.3.1 鱼类I型干扰素 | 第11-13页 |
1.3.2 鱼类II型干扰素 | 第13-14页 |
1.4 鱼类干扰素受体 | 第14-16页 |
1.4.1 鱼类I型干扰素受体 | 第14-15页 |
1.4.2 鱼类II型干扰素受体 | 第15-16页 |
1.5 鱼类干扰素介导的信号通路 | 第16-17页 |
1.6 研究目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-38页 |
2.1 材料 | 第18-21页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 引物表 | 第20-21页 |
2.1.4 载体、菌种、鱼和细胞 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-38页 |
2.2.1 组织RNA提取 | 第21-22页 |
2.2.2 反转录合成cDNA第一条链 | 第22-23页 |
2.2.3 SMART cDNA的合成 | 第23-24页 |
2.2.4 草鱼CRFB1和CRFB5的克隆 | 第24-28页 |
2.2.5 分子鉴定及系统进化分析 | 第28页 |
2.2.6 细胞培养 | 第28-29页 |
2.2.7 CRFB1和CRFB5的诱导表达分析 | 第29-31页 |
2.2.8 草鱼IFN蛋白,CRFB1和CRFB5胞外域蛋白的原核表达 | 第31-35页 |
2.2.9 CiCRFB1、CiCRFB5蛋白与Ci IFN蛋白亲和力分析 | 第35-38页 |
第三章 结果与分析 | 第38-52页 |
3.1 草鱼CRFB1及CRFB5 CDNA的克隆及其分析 | 第38-43页 |
3.1.1 草鱼CRFB1的克隆及其分析 | 第38-41页 |
3.1.2 草鱼CRFB5的克隆及其分析 | 第41-43页 |
3.2 系统进化分析 | 第43-44页 |
3.3 草鱼CRFB1和CRFB5的表达分析 | 第44-46页 |
3.3.1 紫外灭活的GCHV和Poly I:C诱导草鱼CRFB1基因的定量分析 | 第44-45页 |
3.3.2 紫外灭活的GCHV和Poly I:C诱导草鱼CRFB5基因的定量分析 | 第45-46页 |
3.4 草鱼IFN、CRFB1-EC和CRFB5-EC的蛋白 | 第46-49页 |
3.4.1 草鱼IFN、及CRFB1-EC和CRFB5-EC的原核表达和纯化 | 第46-48页 |
3.4.2 CiIFN, CiCRFB1-EC和CiCRFB5-EC蛋白质浓度的测定 | 第48页 |
3.4.3 CiIFN蛋白活力的测定 | 第48-49页 |
3.5 草鱼CRFB1、CRFB5蛋白与IFN蛋白亲和力 | 第49-52页 |
第四章 结论与展望 | 第52-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录:攻读学位期间发表论文 | 第62页 |