| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 三阴性乳腺癌 | 第11页 |
| 1.2 长链非编码RNA | 第11-12页 |
| 1.3 RNA-DNA三螺旋结构 | 第12页 |
| 1.4 MIR100HG | 第12-13页 |
| 1.5 p27 | 第13页 |
| 1.6 选择性剪接 | 第13-14页 |
| 1.7 核不均一核糖核蛋白(hnRNPs) | 第14-15页 |
| 1.8 核不均一核糖核蛋白A1(hnRNPA1) | 第15页 |
| 1.9 本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.10 实验路线 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第17页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-36页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第18-24页 |
| 2.2.2.1 pCDH-MR100HG载体构建 | 第18-21页 |
| 2.2.2.2 构建pCDNA3.1-MIR100HG | 第21页 |
| 2.2.2.3 构建anti-pCDNA3.1-MIR100HG | 第21页 |
| 2.2.2.4 构建sh-MIR100HG载体 | 第21-24页 |
| 2.2.3 慢病毒包装 | 第24页 |
| 2.2.4 感染 | 第24-25页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第25页 |
| 2.2.6 RNA提取,反转录,实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 2.2.6.1 RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.6.2 反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.6.3 实时荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.2.7 细胞周期检测 | 第26-27页 |
| 2.2.8 细胞增殖检测 | 第27页 |
| 2.2.9 Westernblot实验 | 第27-28页 |
| 2.2.10 核质分离 | 第28-29页 |
| 2.2.11 成瘤实验 | 第29-30页 |
| 2.2.12 体外转录 | 第30-31页 |
| 2.2.13 RNAPulldown实验 | 第31-33页 |
| 2.2.14 质谱鉴定 | 第33页 |
| 2.2.15 RIP实验 | 第33-35页 |
| 2.2.16 统计学方法 | 第35-36页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.1 MIR100HG在三阴性乳腺癌中高表达,低生存率 | 第36页 |
| 3.2 过表达MIR100HG会促进细胞增殖,使细胞周期停滞在S期 | 第36-37页 |
| 3.3 敲降MIR100HG会抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞在G1期 | 第37页 |
| 3.4 MIR100HG通过调控p21/p27,使细胞周期停滞在G1/S期 | 第37-38页 |
| 3.5 MIR100HG与p27形成RNA-DNATriplex结构 | 第38-39页 |
| 3.6 MIR100HG与hnRNPA1相互作用 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 结论与展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 致谢 | 第52-55页 |
| 在学期间的科研情况 | 第55页 |
