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LncRNA MIR100HG通过与p27形成三螺旋结构促进三阴性乳腺癌细胞增殖的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
主要符号对照表第10-11页
第一章 前言第11-17页
    1.1 三阴性乳腺癌第11页
    1.2 长链非编码RNA第11-12页
    1.3 RNA-DNA三螺旋结构第12页
    1.4 MIR100HG第12-13页
    1.5 p27第13页
    1.6 选择性剪接第13-14页
    1.7 核不均一核糖核蛋白(hnRNPs)第14-15页
    1.8 核不均一核糖核蛋白A1(hnRNPA1)第15页
    1.9 本研究的目的及意义第15-16页
    1.10 实验路线第16-17页
第二章 材料与方法第17-36页
    2.1 实验材料第17页
        2.1.1 细胞系第17页
        2.1.2 实验仪器第17页
        2.1.3 实验试剂第17页
    2.2 实验方法第17-36页
        2.2.1 细胞培养第17-18页
        2.2.2 载体构建第18-24页
            2.2.2.1 pCDH-MR100HG载体构建第18-21页
            2.2.2.2 构建pCDNA3.1-MIR100HG第21页
            2.2.2.3 构建anti-pCDNA3.1-MIR100HG第21页
            2.2.2.4 构建sh-MIR100HG载体第21-24页
        2.2.3 慢病毒包装第24页
        2.2.4 感染第24-25页
        2.2.5 细胞转染第25页
        2.2.6 RNA提取,反转录,实时荧光定量PCR第25-26页
            2.2.6.1 RNA提取第25页
            2.2.6.2 反转录第25-26页
            2.2.6.3 实时荧光定量PCR第26页
        2.2.7 细胞周期检测第26-27页
        2.2.8 细胞增殖检测第27页
        2.2.9 Westernblot实验第27-28页
        2.2.10 核质分离第28-29页
        2.2.11 成瘤实验第29-30页
        2.2.12 体外转录第30-31页
        2.2.13 RNAPulldown实验第31-33页
        2.2.14 质谱鉴定第33页
        2.2.15 RIP实验第33-35页
        2.2.16 统计学方法第35-36页
第三章 实验结果与分析第36-41页
    3.1 MIR100HG在三阴性乳腺癌中高表达,低生存率第36页
    3.2 过表达MIR100HG会促进细胞增殖,使细胞周期停滞在S期第36-37页
    3.3 敲降MIR100HG会抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞在G1期第37页
    3.4 MIR100HG通过调控p21/p27,使细胞周期停滞在G1/S期第37-38页
    3.5 MIR100HG与p27形成RNA-DNATriplex结构第38-39页
    3.6 MIR100HG与hnRNPA1相互作用第39-41页
第四章 讨论第41-43页
第五章 结论与展望第43-44页
参考文献第44-52页
致谢第52-55页
在学期间的科研情况第55页

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