摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-23页 |
1.1 百草枯概况 | 第13页 |
1.2 环境中的PQ | 第13-14页 |
1.3 PQ的毒性及其机理 | 第14-20页 |
1.3.1 PQ的毒性 | 第14-16页 |
1.3.2 PQ的毒性机理 | 第16-20页 |
1.4 PQ对鱼类毒性的研究现状 | 第20-21页 |
1.5 草鱼肾细胞(CIK细胞) | 第21-22页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 实验材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-26页 |
2.1.1 百草枯(PQ) | 第23页 |
2.1.2 实验细胞 | 第23页 |
2.1.3 实验仪器设备 | 第23-25页 |
2.1.4 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.5 实验所用试剂配制 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-37页 |
2.2.1 CIK细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.2 MTT法检测CIK细胞活力 | 第27页 |
2.2.3 PQ染毒 | 第27-28页 |
2.2.4 细胞形态观察 | 第28页 |
2.2.5 细胞核形态观察 | 第28页 |
2.2.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第28-29页 |
2.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第29页 |
2.2.8 荧光定量PCR | 第29-32页 |
2.2.9 Caspase-3和Caspase-9酶活性测定 | 第32-33页 |
2.2.10 抗氧化系统检测 | 第33-34页 |
2.2.11 炎性相关因子含量的ELISA检测 | 第34-35页 |
2.2.12 数据统计与分析 | 第35-37页 |
第三章 实验结果与分析 | 第37-65页 |
3.1 PQ暴露对CIK细胞活力的影响 | 第37-38页 |
3.2 PQ暴露对CIK细胞形态影响 | 第38-40页 |
3.3 PQ暴露对CIK细胞周期的影响 | 第40-44页 |
3.4 PQ暴露对CIK细胞周期相关基因表达的影响 | 第44-49页 |
3.4.1 PQ暴露对p53和p21基因表达的影响 | 第44-45页 |
3.4.2 PQ暴露对mdm2、gadd45和e2f4基因表达的影响 | 第45-47页 |
3.4.3 PQ暴露对cyclinb、cycline和CDK4基因表达的影响 | 第47-49页 |
3.5 PQ暴露对CIK细胞抗氧化系统的影响 | 第49-52页 |
3.5.1 PQ暴露对CIK细胞SOD和CAT活性的影响 | 第49-51页 |
3.5.2 PQ暴露对CIK细胞T-AOC含量的影响 | 第51-52页 |
3.5.3 PQ暴露对CIK细胞MDA水平的影响 | 第52页 |
3.6 PQ暴露对CIK细胞炎性因子的影响 | 第52-56页 |
3.6.1 PQ暴露对促炎性因子的影响 | 第52-54页 |
3.6.2 PQ暴露对抗炎性因子的影响 | 第54-56页 |
3.7 PQ暴露对CIK细胞核形态的影响 | 第56-58页 |
3.8 PQ暴露对CIK细胞凋亡的影响 | 第58-60页 |
3.9 PQ暴露对CIK细胞凋亡相关基因和因子表达的影响 | 第60-65页 |
3.9.1 PQ暴露对bax和bcl-2基因表达的影响 | 第60-62页 |
3.9.2 PQ暴露对CIK细胞Caspase-3和Caspase-9表达的影响 | 第62-65页 |
第四章 讨论 | 第65-73页 |
4.1 PQ暴露对CIK细胞的毒性作用 | 第65-66页 |
4.2 PQ暴露对CIK细胞周期的影响 | 第66-68页 |
4.3 PQ暴露对CIK细胞抗氧化系统的影响 | 第68-69页 |
4.4 PQ暴露对CIK细胞炎性因子的影响 | 第69-71页 |
4.5 PQ暴露对CIK细胞凋亡的影响 | 第71-73页 |
结论与展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
攻读硕士学位期间学术成果 | 第91-92页 |