摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一章 circRNA的研究进展 | 第13-29页 |
1.1 circRNA的概论 | 第13-15页 |
1.1.1 circRNA的发现及现状 | 第13页 |
1.1.2 circRNA的分类 | 第13-14页 |
1.1.3 circRNA的特征 | 第14页 |
1.1.4 circRNA的发生机制 | 第14-15页 |
1.2 circRNA的生物学功能 | 第15-21页 |
1.2.1 circRNA的海绵功能 | 第15-16页 |
1.2.2 circRNA与RNA结合蛋白的相互作用 | 第16页 |
1.2.3 circRNA调节mRNA的稳定性 | 第16页 |
1.2.4 circRNA调节基因转录 | 第16页 |
1.2.5 circRNA翻译蛋白质 | 第16-17页 |
1.2.6 circRNA的在疾病中的作用 | 第17-20页 |
1.2.7 circRNA的研究和应用前景 | 第20-21页 |
1.3 本课题的研究目的和意义 | 第21-23页 |
1.3.1 研究目的 | 第21页 |
1.3.2 研究意义 | 第21-22页 |
1.3.3 研究内容和方案 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-29页 |
第二章 大鼠肝再生相关circRNA的筛选及分析 | 第29-47页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 实验材料 | 第30-32页 |
2.2.1 实验动物 | 第30页 |
2.2.2 主要试剂及耗材 | 第30-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-36页 |
2.3.1 circRNA的高通量数据分析 | 第32-33页 |
2.3.2 大鼠再生肝材料的获取 | 第33-34页 |
2.3.3 组织中总RNA提取 | 第34页 |
2.3.4 RNA定量与纯度分析 | 第34页 |
2.3.5 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
2.3.6 目的circRNA的鉴定 | 第35-36页 |
2.4 实验结果 | 第36-41页 |
2.4.1 大鼠肝再生中circRNA的相关检测 | 第36页 |
2.4.2 大鼠肝再生中的circRNA基因结构分析 | 第36-37页 |
2.4.3 大鼠肝再生中circRNA的初步筛选 | 第37页 |
2.4.5 大鼠肝再生中circRNA可能参与调控的生理活动 | 第37-39页 |
2.4.6 大鼠肝再生相关circRNA可能参与的信号通路 | 第39页 |
2.4.7 大鼠肝再生中与细胞增殖相关circRNA的筛选 | 第39-40页 |
2.4.8 大鼠肝再生中qRT-PCR技术验证候选的circRNA | 第40页 |
2.4.9 大鼠肝再生中circ_1366的鉴定结果 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
第三章 circ_1366对大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖的调节作用研究 | 第47-69页 |
3.1 引言 | 第48页 |
3.2 材料与方法 | 第48-56页 |
3.2.1 主要仪器 | 第48页 |
3.2.2 主要试剂和材料 | 第48-49页 |
3.2.3 主要溶液的配制 | 第49-50页 |
3.2.4 大鼠正常肝细胞BRL-3A的培养 | 第50-51页 |
3.2.5 circ_1366的过表达载体的构建及鉴定 | 第51-53页 |
3.2.6 circ_1366的干涉片段的设计与合成 | 第53页 |
3.2.7 circ_1366过表达载体的转染 | 第53页 |
3.2.8 circ_1366干涉片段的转染 | 第53-54页 |
3.2.9 细胞总RNA的提取 | 第54页 |
3.2.10 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR) | 第54-55页 |
3.2.11 MTT法检测细胞活性 | 第55-56页 |
3.2.12 流式细胞术(Flow-Cytometry)检测细胞周期 | 第56页 |
3.2.13 蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第56页 |
3.2.14 统计学分析 | 第56页 |
3.3 实验结果 | 第56-62页 |
3.3.1 circ_1366的过表达水平 | 第56-57页 |
3.3.2 circ_1366过表达对细胞活性的影响 | 第57-58页 |
3.3.3 circ_1366过表达对细胞周期的调节作用 | 第58页 |
3.3.4 circ_1366过表达对细胞增殖相关基因/蛋白表达的影响 | 第58-59页 |
3.3.5 circ_1366siRNA的干涉效率 | 第59-60页 |
3.3.6 circ_1366干涉对细胞活性的影响 | 第60页 |
3.3.7 circ_1366干涉对细胞周期的调节作用 | 第60-61页 |
3.3.8 circ_1366干涉对细胞增殖相关基因/蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
3.4 讨论 | 第62-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
结论 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第73-74页 |