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circ1366调节大鼠正常肝细胞株BRL-3A增殖的机理研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略语表第11-13页
第一章 circRNA的研究进展第13-29页
    1.1 circRNA的概论第13-15页
        1.1.1 circRNA的发现及现状第13页
        1.1.2 circRNA的分类第13-14页
        1.1.3 circRNA的特征第14页
        1.1.4 circRNA的发生机制第14-15页
    1.2 circRNA的生物学功能第15-21页
        1.2.1 circRNA的海绵功能第15-16页
        1.2.2 circRNA与RNA结合蛋白的相互作用第16页
        1.2.3 circRNA调节mRNA的稳定性第16页
        1.2.4 circRNA调节基因转录第16页
        1.2.5 circRNA翻译蛋白质第16-17页
        1.2.6 circRNA的在疾病中的作用第17-20页
        1.2.7 circRNA的研究和应用前景第20-21页
    1.3 本课题的研究目的和意义第21-23页
        1.3.1 研究目的第21页
        1.3.2 研究意义第21-22页
        1.3.3 研究内容和方案第22-23页
    参考文献第23-29页
第二章 大鼠肝再生相关circRNA的筛选及分析第29-47页
    2.1 引言第30页
    2.2 实验材料第30-32页
        2.2.1 实验动物第30页
        2.2.2 主要试剂及耗材第30-32页
    2.3 实验方法第32-36页
        2.3.1 circRNA的高通量数据分析第32-33页
        2.3.2 大鼠再生肝材料的获取第33-34页
        2.3.3 组织中总RNA提取第34页
        2.3.4 RNA定量与纯度分析第34页
        2.3.5 实时荧光定量PCR第34-35页
        2.3.6 目的circRNA的鉴定第35-36页
    2.4 实验结果第36-41页
        2.4.1 大鼠肝再生中circRNA的相关检测第36页
        2.4.2 大鼠肝再生中的circRNA基因结构分析第36-37页
        2.4.3 大鼠肝再生中circRNA的初步筛选第37页
        2.4.5 大鼠肝再生中circRNA可能参与调控的生理活动第37-39页
        2.4.6 大鼠肝再生相关circRNA可能参与的信号通路第39页
        2.4.7 大鼠肝再生中与细胞增殖相关circRNA的筛选第39-40页
        2.4.8 大鼠肝再生中qRT-PCR技术验证候选的circRNA第40页
        2.4.9 大鼠肝再生中circ_1366的鉴定结果第40-41页
    2.5 讨论第41-43页
    参考文献第43-47页
第三章 circ_1366对大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖的调节作用研究第47-69页
    3.1 引言第48页
    3.2 材料与方法第48-56页
        3.2.1 主要仪器第48页
        3.2.2 主要试剂和材料第48-49页
        3.2.3 主要溶液的配制第49-50页
        3.2.4 大鼠正常肝细胞BRL-3A的培养第50-51页
        3.2.5 circ_1366的过表达载体的构建及鉴定第51-53页
        3.2.6 circ_1366的干涉片段的设计与合成第53页
        3.2.7 circ_1366过表达载体的转染第53页
        3.2.8 circ_1366干涉片段的转染第53-54页
        3.2.9 细胞总RNA的提取第54页
        3.2.10 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)第54-55页
        3.2.11 MTT法检测细胞活性第55-56页
        3.2.12 流式细胞术(Flow-Cytometry)检测细胞周期第56页
        3.2.13 蛋白免疫印迹(Western Blot)第56页
        3.2.14 统计学分析第56页
    3.3 实验结果第56-62页
        3.3.1 circ_1366的过表达水平第56-57页
        3.3.2 circ_1366过表达对细胞活性的影响第57-58页
        3.3.3 circ_1366过表达对细胞周期的调节作用第58页
        3.3.4 circ_1366过表达对细胞增殖相关基因/蛋白表达的影响第58-59页
        3.3.5 circ_1366siRNA的干涉效率第59-60页
        3.3.6 circ_1366干涉对细胞活性的影响第60页
        3.3.7 circ_1366干涉对细胞周期的调节作用第60-61页
        3.3.8 circ_1366干涉对细胞增殖相关基因/蛋白表达的影响第61-62页
    3.4 讨论第62-65页
    参考文献第65-69页
结论第69-71页
致谢第71-73页
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文第73-74页

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