摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-24页 |
1.1 不同拓扑结构蛋白的研究 | 第10-14页 |
1.1.1 蛋白质拓扑结构 | 第10-12页 |
1.1.2 寡聚化蛋白质的研究 | 第12-13页 |
1.1.3 环化蛋白质的研究 | 第13-14页 |
1.2 Foldon介导蛋白质寡聚化 | 第14-17页 |
1.2.1 Foldon概述 | 第14-15页 |
1.2.2 Foldon研究现状 | 第15-16页 |
1.2.3 Foldon改造 | 第16-17页 |
1.3 蛋白质复性综述 | 第17-20页 |
1.3.1 传统的蛋白质复性方法 | 第17页 |
1.3.2 液相色谱法复性蛋白质 | 第17-18页 |
1.3.3 分子印迹技术复性蛋白质 | 第18-19页 |
1.3.4 分子环化设计复性蛋白质 | 第19-20页 |
1.4 类弹性蛋白多肽(ELP)概述 | 第20-21页 |
1.5 课题目的和意义 | 第21-22页 |
1.6 课题创新点 | 第22-24页 |
第2章 共价寡聚地衣多糖酶催化性能的研究 | 第24-50页 |
2.1 实验材料 | 第24-30页 |
2.1.1 菌种和质粒 | 第24-25页 |
2.1.2 培养基 | 第25页 |
2.1.3 实验常用试剂及缓冲液配制 | 第25-28页 |
2.1.4 主要实验试剂 | 第28-29页 |
2.1.5 主要实验仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-38页 |
2.2.1 载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.2 地衣多糖酶的表达和纯化 | 第32-33页 |
2.2.3 样品纯度鉴定 | 第33-34页 |
2.2.4 E-Fm结构分析 | 第34-35页 |
2.2.5 酶学性质分析 | 第35-37页 |
2.2.6 蛋白质浓度测定 | 第37-38页 |
2.3 结果与讨论 | 第38-49页 |
2.3.1 不同拓扑结构地衣多糖酶的构建 | 第38页 |
2.3.2 E-Fm结构分析 | 第38-40页 |
2.3.3 标准曲线 | 第40-41页 |
2.3.4 B-E-Fm的表达和纯化 | 第41-42页 |
2.3.5 B-E-Fm的酶活回收率及纯化倍数 | 第42-44页 |
2.3.6 B-E-Fm的酶学性质研究 | 第44-49页 |
2.4 小结 | 第49-50页 |
第3章 共价寡聚木聚糖酶催化性能的研究 | 第50-64页 |
3.1 实验材料 | 第50-51页 |
3.1.1 菌种和质粒 | 第50页 |
3.1.2 培养基 | 第50页 |
3.1.3 实验常用试剂及缓冲液配制 | 第50-51页 |
3.1.4 主要实验试剂 | 第51页 |
3.1.5 主要实验仪器 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-54页 |
3.2.1 载体的构建 | 第51-52页 |
3.2.2 木聚糖酶的表达和纯化 | 第52-53页 |
3.2.3 样品纯度鉴定 | 第53页 |
3.2.4 酶学性质分析 | 第53-54页 |
3.3 结果与讨论 | 第54-62页 |
3.3.1 不同拓扑结构木聚糖酶的构建 | 第54-55页 |
3.3.2 标准曲线 | 第55页 |
3.3.3 不同拓扑结构木聚糖酶的表达和纯化 | 第55-56页 |
3.3.4 不同拓扑结构木聚糖酶的酶活回收率和纯化倍数 | 第56-57页 |
3.3.5 不同拓扑结构木聚糖酶的酶学性质研究 | 第57-62页 |
3.4 小结 | 第62-64页 |
第4章 环化地衣多糖酶复性的研究 | 第64-78页 |
4.1 实验材料 | 第64-65页 |
4.1.1 菌种 | 第64页 |
4.1.2 培养基 | 第64页 |
4.1.3 实验常用试剂及缓冲液配制 | 第64-65页 |
4.1.4 主要实验试剂 | 第65页 |
4.1.5 主要实验仪器 | 第65页 |
4.2 实验方法 | 第65-67页 |
4.2.1 目的基因和表达载体的构建 | 第65-66页 |
4.2.2 线性和环化地衣多糖酶的表达和纯化 | 第66页 |
4.2.3 线性和环化地衣多糖酶的纯度鉴定 | 第66页 |
4.2.4 线性和环化地衣多糖酶的酶活力测定 | 第66-67页 |
4.2.5 有机试剂和变性剂对线性和环化地衣多糖酶的影响 | 第67页 |
4.2.6 线性和环化地衣多糖酶变性后的复性 | 第67页 |
4.3 结果与讨论 | 第67-76页 |
4.3.1 表达载体的构建 | 第67-68页 |
4.3.2 线性和环化地衣多糖酶的表达和纯化 | 第68页 |
4.3.3 不同有机溶剂对线性和环化地衣多糖酶的影响 | 第68-69页 |
4.3.4 线性和环化地衣多糖酶的变性及复性 | 第69-76页 |
4.4 小结 | 第76-78页 |
第5章 结论与展望 | 第78-82页 |
5.1 结论 | 第78-79页 |
5.2 展望 | 第79-82页 |
参考文献 | 第82-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第90页 |