摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
主要缩略词 | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1.1 AFB_1的简介 | 第9-11页 |
1.1.1 AFB_1的来源及限量标准 | 第9页 |
1.1.2 AFB_1的理化性质和毒性作用 | 第9-11页 |
1.2 真菌毒素的减毒方法 | 第11-12页 |
1.2.1 化学、物理及生物脱毒法 | 第11-12页 |
1.2.2 营养学方法拮抗真菌毒素 | 第12页 |
1.3 QUE的简介 | 第12-14页 |
1.3.1 QUE的来源和理化性质 | 第12-13页 |
1.3.2 QUE的抗氧化与生物活性 | 第13-14页 |
1.4 Nrf2与细胞功能调节 | 第14-15页 |
1.4.1 Nrf2与细胞氧化应激 | 第14页 |
1.4.2 Nrf2与抗氧化 | 第14-15页 |
1.4.3 Nrf2与抗炎作用 | 第15页 |
1.4.4 Nrf2与抗凋亡 | 第15页 |
1.5 立题背景与意义 | 第15-16页 |
1.6 主要研究内容 | 第16-17页 |
第二章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞毒性及氧化损伤的影响 | 第17-30页 |
2.1 引言 | 第17页 |
2.2 材料与仪器 | 第17-18页 |
2.2.1 实验材料与试剂 | 第17-18页 |
2.2.2 仪器设备 | 第18页 |
2.3 实验方法 | 第18-23页 |
2.3.1 主要试剂的配制 | 第18页 |
2.3.2 细胞的复苏、培养和冻存 | 第18-19页 |
2.3.3 CCK-8法测定细胞增殖抑制率 | 第19页 |
2.3.4 细胞存活率的测定 | 第19页 |
2.3.5 LDH法测定细胞毒性 | 第19-20页 |
2.3.6 细胞中CYP1A2活性的测定 | 第20页 |
2.3.7 细胞内ROS水平的测定 | 第20-21页 |
2.3.8 细胞内氧化还原指标的测定 | 第21-23页 |
2.3.9 数据分析 | 第23页 |
2.4 实验结果与分析 | 第23-28页 |
2.4.1 AFB_1对BRL-3A细胞的半数抑制浓度(IC_(50))及QUE对BRL-3A细胞的无损害作用浓度 | 第23-24页 |
2.4.2 QUE预处理对细胞存活率的影响 | 第24页 |
2.4.3 QUE预处理对细胞释放LDH水平的影响 | 第24-25页 |
2.4.4 QUE预处理对细胞内CYP1A2活性的影响 | 第25-26页 |
2.4.5 QUE预处理对细胞内ROS水平的影响 | 第26页 |
2.4.6 QUE预处理对细胞内MDA含量的影响 | 第26-27页 |
2.4.7 QUE预处理对细胞内抗氧化防御体系的影响 | 第27-28页 |
2.5 小结与讨论 | 第28-30页 |
第三章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞凋亡的影响 | 第30-37页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 材料与仪器 | 第30-31页 |
3.2.1 实验材料与试剂 | 第30页 |
3.2.2 仪器设备 | 第30-31页 |
3.3 实验方法 | 第31-32页 |
3.3.1 主要试剂的配制 | 第31页 |
3.3.2 细胞的复苏与培养 | 第31页 |
3.3.3 细胞内ATP含量的测定 | 第31页 |
3.3.4 JC-1检测细胞中线粒体膜电位(MMP)的变化 | 第31页 |
3.3.5 AO染色检测细胞核形态变化 | 第31-32页 |
3.3.6 AnnexinV与FITC检测细胞凋亡率 | 第32页 |
3.3.7 数据分析 | 第32页 |
3.4 实验结果与分析 | 第32-36页 |
3.4.1 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞内ATP含量变化的影响 | 第32-33页 |
3.4.2 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞线粒体膜电位变化的影响 | 第33-34页 |
3.4.3 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞核形态改变的影响 | 第34-35页 |
3.4.4 QUE预处理对AFB_1诱导BRL-3A细胞凋亡的影响 | 第35-36页 |
3.5 小结与讨论 | 第36-37页 |
第四章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞损伤的保护作用机制 | 第37-46页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 材料与仪器 | 第37-38页 |
4.2.1 实验材料与试剂 | 第37页 |
4.2.2 仪器设备 | 第37-38页 |
4.3 实验方法 | 第38-41页 |
4.3.1 细胞的复苏与培养 | 第38页 |
4.3.2 细胞中RNA的提取 | 第38页 |
4.3.3 RNA的反转录 | 第38-39页 |
4.3.4 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达量 | 第39页 |
4.3.5 免疫印迹(Westernblotting)对相关蛋白表达量的检测 | 第39-41页 |
4.3.6 数据分析 | 第41页 |
4.4 实验结果与分析 | 第41-44页 |
4.4.1 QUE预处理对AFB_1诱导的细胞中Bax、Bcl-2mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
4.4.2 QUE预处理对AFB_1诱导的细胞中Nrf2/AKt等相关基因mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
4.4.3 QUE预处理对细胞中AKt磷酸化水平与Nrf2核转移的影响 | 第43-44页 |
4.5 小结与讨论 | 第44-46页 |
主要结论与展望 | 第46-48页 |
结论 | 第46-47页 |
展望 | 第47-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |