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槲皮素对黄曲霉毒素B1致BRL-3A细胞毒性的保护作用

摘要第3-4页
Abstract第4页
主要缩略词第8-9页
第一章 绪论第9-17页
    1.1 AFB_1的简介第9-11页
        1.1.1 AFB_1的来源及限量标准第9页
        1.1.2 AFB_1的理化性质和毒性作用第9-11页
    1.2 真菌毒素的减毒方法第11-12页
        1.2.1 化学、物理及生物脱毒法第11-12页
        1.2.2 营养学方法拮抗真菌毒素第12页
    1.3 QUE的简介第12-14页
        1.3.1 QUE的来源和理化性质第12-13页
        1.3.2 QUE的抗氧化与生物活性第13-14页
    1.4 Nrf2与细胞功能调节第14-15页
        1.4.1 Nrf2与细胞氧化应激第14页
        1.4.2 Nrf2与抗氧化第14-15页
        1.4.3 Nrf2与抗炎作用第15页
        1.4.4 Nrf2与抗凋亡第15页
    1.5 立题背景与意义第15-16页
    1.6 主要研究内容第16-17页
第二章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞毒性及氧化损伤的影响第17-30页
    2.1 引言第17页
    2.2 材料与仪器第17-18页
        2.2.1 实验材料与试剂第17-18页
        2.2.2 仪器设备第18页
    2.3 实验方法第18-23页
        2.3.1 主要试剂的配制第18页
        2.3.2 细胞的复苏、培养和冻存第18-19页
        2.3.3 CCK-8法测定细胞增殖抑制率第19页
        2.3.4 细胞存活率的测定第19页
        2.3.5 LDH法测定细胞毒性第19-20页
        2.3.6 细胞中CYP1A2活性的测定第20页
        2.3.7 细胞内ROS水平的测定第20-21页
        2.3.8 细胞内氧化还原指标的测定第21-23页
        2.3.9 数据分析第23页
    2.4 实验结果与分析第23-28页
        2.4.1 AFB_1对BRL-3A细胞的半数抑制浓度(IC_(50))及QUE对BRL-3A细胞的无损害作用浓度第23-24页
        2.4.2 QUE预处理对细胞存活率的影响第24页
        2.4.3 QUE预处理对细胞释放LDH水平的影响第24-25页
        2.4.4 QUE预处理对细胞内CYP1A2活性的影响第25-26页
        2.4.5 QUE预处理对细胞内ROS水平的影响第26页
        2.4.6 QUE预处理对细胞内MDA含量的影响第26-27页
        2.4.7 QUE预处理对细胞内抗氧化防御体系的影响第27-28页
    2.5 小结与讨论第28-30页
第三章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞凋亡的影响第30-37页
    3.1 引言第30页
    3.2 材料与仪器第30-31页
        3.2.1 实验材料与试剂第30页
        3.2.2 仪器设备第30-31页
    3.3 实验方法第31-32页
        3.3.1 主要试剂的配制第31页
        3.3.2 细胞的复苏与培养第31页
        3.3.3 细胞内ATP含量的测定第31页
        3.3.4 JC-1检测细胞中线粒体膜电位(MMP)的变化第31页
        3.3.5 AO染色检测细胞核形态变化第31-32页
        3.3.6 AnnexinV与FITC检测细胞凋亡率第32页
        3.3.7 数据分析第32页
    3.4 实验结果与分析第32-36页
        3.4.1 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞内ATP含量变化的影响第32-33页
        3.4.2 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞线粒体膜电位变化的影响第33-34页
        3.4.3 QUE预处理对AFB_1引起的BRL-3A细胞核形态改变的影响第34-35页
        3.4.4 QUE预处理对AFB_1诱导BRL-3A细胞凋亡的影响第35-36页
    3.5 小结与讨论第36-37页
第四章 QUE对AFB_1诱导的BRL-3A细胞损伤的保护作用机制第37-46页
    4.1 引言第37页
    4.2 材料与仪器第37-38页
        4.2.1 实验材料与试剂第37页
        4.2.2 仪器设备第37-38页
    4.3 实验方法第38-41页
        4.3.1 细胞的复苏与培养第38页
        4.3.2 细胞中RNA的提取第38页
        4.3.3 RNA的反转录第38-39页
        4.3.4 实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达量第39页
        4.3.5 免疫印迹(Westernblotting)对相关蛋白表达量的检测第39-41页
        4.3.6 数据分析第41页
    4.4 实验结果与分析第41-44页
        4.4.1 QUE预处理对AFB_1诱导的细胞中Bax、Bcl-2mRNA表达的影响第41-42页
        4.4.2 QUE预处理对AFB_1诱导的细胞中Nrf2/AKt等相关基因mRNA表达的影响第42-43页
        4.4.3 QUE预处理对细胞中AKt磷酸化水平与Nrf2核转移的影响第43-44页
    4.5 小结与讨论第44-46页
主要结论与展望第46-48页
    结论第46-47页
    展望第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-56页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第56页

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