| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 第一章 委内瑞拉马脑炎病毒间接ELISA抗体检测方法的建立及应用 | 第20-36页 |
| 1.1 材料 | 第20-22页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第20页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.1.3 菌种、质粒及血清 | 第21页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| 1.2 方法 | 第22-27页 |
| 1.2.1 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第22-24页 |
| 1.2.2 目的蛋白的诱导表达及鉴定 | 第24-25页 |
| 1.2.3 目的蛋白诱导表达条件的优化 | 第25页 |
| 1.2.4 目的蛋白表达形式的分析 | 第25页 |
| 1.2.5 目的蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| 1.2.6 VEEV间接ELISA抗体检测方法的建立 | 第26-27页 |
| 1.2.7 VEEV间接ELISA抗体检测方法的性能评价 | 第27页 |
| 1.2.8 VEEV间接ELISA抗体检测方法在疫苗免疫效果评价中的应用 | 第27页 |
| 1.3 结果 | 第27-33页 |
| 1.3.1 VEEV的tE2基因胞外区序列的扩增 | 第27-28页 |
| 1.3.2 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第28页 |
| 1.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第28-29页 |
| 1.3.4 目的蛋白诱导表达条件的优化 | 第29-30页 |
| 1.3.5 目的蛋白表达形式的分析 | 第30-31页 |
| 1.3.6 目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| 1.3.7 VEEV间接ELISA抗体检测方法的建立 | 第32页 |
| 1.3.8 VEEV间接ELISA抗体检测方法性能评价 | 第32-33页 |
| 1.3.9 VEEV间接ELISA抗体检测方法在疫苗免疫效果评价中的应用 | 第33页 |
| 1.4 讨论 | 第33-34页 |
| 1.5 小结 | 第34-36页 |
| 第二章 委内瑞拉马脑炎病毒假病毒中和抗体检测方法的建立及应用 | 第36-48页 |
| 2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 菌种、质粒与细胞 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 试验设备 | 第37页 |
| 2.2 方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 引物设计及合成 | 第37-38页 |
| 2.2.2 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.3 骨架质粒与目的质粒的制备 | 第39页 |
| 2.2.4 假病毒pVEEV-E123的制备 | 第39-40页 |
| 2.2.5 假病毒的鉴定 | 第40页 |
| 2.2.6 假病毒易感细胞及感染力的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.7 VEEV假病毒中和抗体检测方法的建立 | 第41页 |
| 2.2.8 VEEV假病毒中和抗体检测方法的评估 | 第41页 |
| 2.2.9 疫苗免疫样品抗体效价的测定 | 第41-42页 |
| 2.3 结果 | 第42-46页 |
| 2.3.1 目的基因的扩增 | 第42页 |
| 2.3.2 重组质粒pCAGG-VEEV-E123的构建 | 第42页 |
| 2.3.3 假病毒的制备及鉴定 | 第42-43页 |
| 2.3.4 假病毒易感细胞及感染力的测定 | 第43-44页 |
| 2.3.5 VEEV假病毒中和抗体检测方法的建立 | 第44-45页 |
| 2.3.6 VEEV假病毒中和抗体检测方法的评估 | 第45页 |
| 2.3.7 疫苗免疫样品抗体效价的检测 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 2.5 小结 | 第47-48页 |
| 第三章 委内瑞拉马脑炎病毒双抗体夹心ELISA抗原检测方法的建立及应用 | 第48-59页 |
| 3.1 材料 | 第48-49页 |
| 3.1.1 仪器与试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.2 抗原与抗体 | 第49页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第49页 |
| 3.2 方法 | 第49-52页 |
| 3.2.1 重组杆状病毒rpFBD-2tE2的制备 | 第49页 |
| 3.2.2 兔源多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| 3.2.3 VEEV双抗体夹心ELISA抗原检测方法的建立 | 第50-51页 |
| 3.2.4 标准曲线的建立 | 第51页 |
| 3.2.5 VEEV双抗体夹心ELISA抗原检测方法的评估 | 第51页 |
| 3.2.6 表达VEEV结构蛋白的重组杆状病毒中E2蛋白含量的检测 | 第51-52页 |
| 3.3 结果 | 第52-57页 |
| 3.3.1 重组杆状病毒rpFBD-2tE2中E2蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 3.3.2 兔源多克隆抗体的鉴定 | 第53-54页 |
| 3.3.3 VEEV双抗体夹心ELISA抗原检测方法的建立 | 第54-56页 |
| 3.3.4 标准曲线的建立 | 第56-57页 |
| 3.3.5 表达VEEV结构蛋白的重组杆状病毒中E2蛋白含量的检测 | 第57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第四章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 在学期间取得的学术成果 | 第68-69页 |
| 简历 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
