| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 脂肪酶简介 | 第12页 |
| 1.2 脂肪酶结构 | 第12-13页 |
| 1.3 脂肪酶催化特性和分类 | 第13-14页 |
| 1.4 脂肪酶应用 | 第14-15页 |
| 1.5 脂肪酶国内外研究进展 | 第15-20页 |
| 1.5.1 脂肪酶结构与催化特性 | 第16页 |
| 1.5.2 脂肪酶高产菌株选育 | 第16-17页 |
| 1.5.3 脂肪酶发酵条件控制 | 第17-20页 |
| 1.6 本课题研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 脂肪酶产生菌F. Oxysporum_SHM的分离鉴定 | 第21-39页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要生化试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 脂肪酶活力测定 | 第23-24页 |
| 2.2.2 菌株筛选 | 第24-25页 |
| 2.2.3 菌株形态学鉴定 | 第25页 |
| 2.2.4 菌株分子生物学鉴定 | 第25-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-38页 |
| 2.3.1 脂肪酶酶活力的测定 | 第27-29页 |
| 2.3.2 脂肪酶产生菌株的富集和初筛 | 第29-30页 |
| 2.3.3 脂肪酶产生菌株的复筛 | 第30-32页 |
| 2.3.4 菌株形态学鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3.5 菌株分子生物学鉴定 | 第34-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 F. Oxysporum_SHM产脂肪酶发酵条件优化 | 第39-61页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第39-41页 |
| 3.1.1 菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 主要仪器及设备 | 第39-40页 |
| 3.1.3 主要生化试剂 | 第40页 |
| 3.1.4 培养基 | 第40-41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 培养方法 | 第41页 |
| 3.2.2 脂肪酶酶活力测定 | 第41页 |
| 3.2.3 菌体量测定 | 第41页 |
| 3.2.4 发酵液中总糖含量测定 | 第41-42页 |
| 3.2.5 发酵基础培养基选择 | 第42页 |
| 3.2.6 单因素实验 | 第42页 |
| 3.2.7 响应面分析 | 第42-43页 |
| 3.2.8 生长曲线绘制 | 第43页 |
| 3.2.9 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第43-44页 |
| 3.2.10 数据分析 | 第44页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第44-60页 |
| 3.3.1 发酵基础培养基选择 | 第44-45页 |
| 3.3.2 油脂对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.3 碳源对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.4 氮源对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第47-50页 |
| 3.3.5 磷酸二氢钾和硫酸镁对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.6 pH对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.7 装液量对发酵产脂肪酶活力的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.8 响应面设计（CCD）确定发酵条件的最优水平 | 第53-58页 |
| 3.3.9 F. Oxysporum_SHM摇瓶发酵曲线 | 第58-60页 |
| 3.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 第4章 F. Oxysporum_SHM脂肪酶酶学性质分析 | 第61-73页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第61-62页 |
| 4.1.1 主要仪器及设备 | 第61-62页 |
| 4.1.2 主要生化试剂 | 第62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-65页 |
| 4.2.1 发酵上清液的制备 | 第62页 |
| 4.2.2 脂肪酶活力测定 | 第62页 |
| 4.2.3 发酵液的(NH4)2SO4沉淀 | 第62-63页 |
| 4.2.4 粗酶液透析除盐 | 第63页 |
| 4.2.5 真空冷冻干燥制备粗酶粉 | 第63页 |
| 4.2.6 粗酶的酶学性质分析 | 第63-64页 |
| 4.2.7 阴离子交换层析纯化脂肪酶 | 第64页 |
| 4.2.8 SDS-PAGE蛋白电泳分析 | 第64-65页 |
| 4.2.9 蛋白浓度测定 | 第65页 |
| 4.2.10 数据分析 | 第65页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第65-71页 |
| 4.3.1 F. Oxysporum_SHM脂肪酶的纯化 | 第65-67页 |
| 4.3.2 F. Oxysporum_SHM脂肪酶最适温度和温度稳定性 | 第67-68页 |
| 4.3.3 F. Oxysporum_SHM脂肪酶最适pH和pH稳定性 | 第68-70页 |
| 4.3.4 金属离子对F. Oxysporum_SHM脂肪酶活性影响 | 第70页 |
| 4.3.5 F. Oxysporum_SHM脂肪酶米氏常数测定 | 第70-71页 |
| 4.3.6 F. Oxysporum_SHM脂肪酶活性与商品酶活性比较 | 第71页 |
| 4.4 本章小结 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 作者在攻读硕士学位期间科研成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
