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茶园土壤N2O排放特征及其微生物机制研究

摘要第15-17页
Abstract第17-19页
第一章 文章综述第20-37页
    1.1 前言第20-21页
    1.2 农田N_2O排放的主要来源第21-25页
        1.2.1 硝化作用第21-23页
        1.2.2 反硝化作用第23-25页
    1.3 硝化作用和反硝化作用的环境驱动因子第25-27页
    1.4 土壤硝化和反硝化作用对N_2O排放贡献的量化第27-29页
        1.4.1 稳定同位素示踪法第27-28页
        1.4.2 乙炔抑制剂法第28-29页
    1.5 土壤N_2O排放的微生物机制第29-32页
        1.5.1 土壤真菌和细菌对N_2O排放的相对贡献第29-30页
        1.5.2 产N_2O微生物的分离和纯培养第30页
        1.5.3 土壤N_2O排放的分子生态机制第30-32页
    1.6 研究的背景、目标及内容第32-37页
        1.6.1 研究背景第32-34页
        1.6.2 研究目标第34-35页
        1.6.3 技术路线第35-36页
        1.6.4 研究内容第36-37页
第二章 植茶年龄对茶园土壤硝化和反硝化活性的影响第37-43页
    2.1 引言第37页
    2.2 材料与方法第37-39页
        2.2.1 供试土样第37-38页
        2.2.2 研究方法第38页
        2.2.3 数据分析第38-39页
    2.3 结果第39-41页
        2.3.1 土壤化学及微生物学特征第39页
        2.3.2 土壤硝化和反硝化活性第39-41页
            2.3.2.1 土壤硝化活性第39-40页
            2.3.2.2 土壤反硝化活性第40-41页
    2.4 讨论第41-42页
        2.4.1 不同植茶年龄土壤的基本理化性质变化第41页
        2.4.2 不同植茶年龄土壤的硝化和反硝化活性第41-42页
    2.5 结论第42-43页
第三章 施肥措施对茶园土壤N_2O排放通量的影响效应第43-65页
    3.1 引言第43页
    3.2 材料与方法第43-48页
        3.2.1 供试土壤第43-44页
        3.2.2 研究方法第44-48页
            3.2.2.1 硝化抑制剂(DCD和DMPP)对茶园土壤N_2O排放通量的影响效应第44-47页
            3.2.2.2 氮肥种类对茶园土壤N_2O排放通量的影响效应第47-48页
            3.2.2.3 施石灰和硫酸铵对茶园土壤中N_2O排放通量的影响效应第48页
        3.2.3 数据分析第48页
    3.3 结果第48-60页
        3.3.1 硝化抑制剂(DCD和DMPP)在茶园土壤中的环境生态效应第48-54页
            3.3.1.1 对土壤pH的影响第49页
            3.3.1.2 对土壤无机氮的影响第49-51页
            3.3.1.3 对茶园土壤N_2O排放的影响第51页
            3.3.1.4 总N_2O排放与NO_3-N含量的关系第51-52页
            3.3.1.5 对AOA, AOB和nosZ基因丰度的影响第52-54页
        3.3.2 氮肥种类在茶园土壤中的环境生态效应第54-57页
            3.3.2.1 对土壤pH的影响第54页
            3.3.2.2 对土壤硝化势的影响第54-55页
            3.3.2.3 对N_2O排放的影响第55-57页
            3.3.2.4 对nosZ基因丰度的影响第57页
        3.3.3 施石灰和硫酸铵在茶园土壤中的环境生态效应第57-60页
            3.3.3.1 施石灰对土壤基本理化性质的影响第57-58页
            3.3.3.2 硫酸铵对施石灰茶园土壤N_2O排放的影响第58-59页
            3.3.3.3 土壤销化势变化第59-60页
    3.4 讨论第60-64页
        3.4.1 硝化抑制剂在茶园土壤中的环境生态效应第60-62页
        3.4.2 氮肥种类在茶园土壤中的环境生态效应第62-63页
        3.4.3 施石灰和硫酸铵在茶园土壤中的环境生态效应第63-64页
    3.5 结论第64-65页
第四章 反硝化微生物群落与N_2O排放之间的联系机制第65-82页
    4.1 引言第65-66页
    4.2 材料与方法第66-69页
        4.2.1 供试土壤第66页
        4.2.2 研究方法第66-68页
            4.2.2.1 利用~(15)N示踪法确定N_2O排放来源第66页
            4.2.2.2 不同pH茶园土壤N_2O的排放情况第66-67页
            4.2.2.3 不同pH茶园土壤N_2O的还原通量第67页
            4.2.2.4 N_2O采集第67页
            4.2.2.5 DNA提取第67页
            4.2.2.6 反硝化微生物群落丰度和结构的测定第67-68页
            4.2.2.7 基因片段的克隆及测序第68页
        4.2.3 数据分析第68-69页
    4.3 结果第69-78页
        4.3.1 ~(15)N示踪测定茶园土壤中N_2O排放来源第69-71页
            4.3.1.1 加入NH_4NO_3后的总N_2O排放第69页
            4.3.1.2 加入~(15)N标记肥料后的总~(15)N-N_2O排放第69-70页
            4.3.1.3 培养期间无机氮变化第70-71页
        4.3.2 施石灰对土壤反硝化潜势的影响第71页
        4.3.3 添加不同浓度硝酸钾的N_2O净排放通量和还原情况第71-74页
        4.3.4 硝氮浓度对施石灰土壤反硝化微生物基因丰度的影响第74页
        4.3.5 硝氮浓度对施石灰土壤反硝化微生物群落结构的影响第74-77页
            4.3.5.1 施石灰土壤中添加不同浓度硝氮反硝化微生物群落组成第74-77页
            4.3.5.2 硝氮浓度对施石灰茶园土壤中反硝化微生物群落组成的影响第77页
        4.3.6 茶园土壤反硝化微生物群落结构的环境驱动因子第77-78页
    4.4 讨论第78-81页
        4.4.1 ~(15)N标记法区分N_2O来源第78-79页
        4.4.2 茶园土壤N_2O排放的微生物机制第79-81页
    4.5 结论第81-82页
第五章 茶园土壤真菌和细菌反硝化作用对N_2O排放的相对贡献第82-88页
    5.1 引言第82页
    5.2 材料和方法第82-84页
        5.2.1 供试土壤第82-83页
        5.2.2 研究方法第83页
            5.2.2.1 底物诱导呼吸抑制法第83页
            5.2.2.2 真菌和细菌反硝化作用强度的量化第83页
        5.2.3 数据分析第83-84页
    5.3 结果第84-85页
        5.3.1 生物抑制剂浓度的确定第84页
        5.3.2 真菌和细菌对反硝化作用的相对贡献第84-85页
    5.4 讨论第85-87页
        5.4.1 底物诱导呼吸抑制法在确定生物抑制剂浓度方面的应用第85-86页
        5.4.2 真菌和细菌反硝化作用第86-87页
    5.5 结论第87-88页
第六章 茶园土壤反硝化真菌的分离鉴定及对土壤N_2O排放的贡献研究第88-102页
    6.1 引言第88页
    6.2 材料与方法第88-92页
        6.2.1 供试土壤第88页
        6.2.2 主要试剂和培养基的配制方法第88-89页
        6.2.3 菌株的分离、筛选与纯化第89页
        6.2.4 基因组DNA的提取和18S rDNA的PCR扩增与序列测定第89-90页
            6.2.4.1 真菌基因组DNA的提取第89-90页
            6.2.4.2 真菌18S rDNA的PCR扩增第90页
        6.2.5 菌株的反硝化特性研究第90-91页
        6.2.6 纯化菌株对茶园土壤N_2O排放的贡献研究第91-92页
        6.2.7 数据分析第92页
    6.3 结果第92-99页
        6.3.1 菌株分离第92页
        6.3.2 形态观察第92-94页
        6.3.3 PCR扩增第94页
        6.3.4 测序结果第94-96页
            6.3.4.1 F1菌株全长18S rDNA基因序列第95-96页
            6.3.4.2 F2菌株全长18S rDNA基因序列第96页
        6.3.5 分子鉴定及系统发育树的构建第96-97页
        6.3.6 序列号的获取第97页
        6.3.7 青霉菌,肉座菌纯菌的反硝化活性第97-98页
        6.3.8 产N_2O纯菌在茶园土壤中的功能验证第98-99页
    6.4 讨论第99-100页
    6.5 结论第100-102页
第七章 论文结论、创新点及进一步研究的设想第102-105页
    7.1 全文结论第102-103页
    7.2 特色与创新点第103页
    7.3 进一步研究的设想第103-105页
参考文献第105-121页
攻读博士学位期间主要成果及获奖情况第121-122页
致谢第122页

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