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AM共生机制研究:AM真菌与植物根系的识别及AM功能相关基因

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第16-32页
    1.1 AM 真菌的侵染特性第16-18页
    1.2 AM 真菌孢子萌发及芽管生长第18页
        1.2.1 AM 真菌孢子萌发及芽管生长第18页
        1.2.2 影响 AM 真菌孢子萌发及芽管生长的环境因素第18页
    1.3 AM 真菌与根器官的双重培养体系第18-21页
        1.3.1 AM 真菌的繁殖方法第18-19页
        1.3.2 双重培养体系第19-21页
            1.3.2.1 培养材料的准备第20页
            1.3.2.2 双重培养体系的建立第20-21页
    1.4 预共生阶段 AM 真菌与植物根系的相互识别第21-23页
        1.4.1 植物根系分泌的共生信号物质第21-22页
        1.4.2 AM 真菌分泌的共生信号物质第22-23页
    1.5 AM 中的 MYB 转录因子第23-25页
        1.5.1 MYB 转录因子的分类与功能第23-24页
        1.5.2 AM 中的 MYB 转录因子第24-25页
    1.6 AM 中的磷酸转运蛋白第25-29页
        1.6.1 AM 与植物磷吸收第25-26页
        1.6.2 植物中 AM 诱导表达的磷酸转运蛋白第26-28页
        1.6.3 AM 真菌中的磷酸转运蛋白第28-29页
        1.6.4 展望第29页
    1.7 研究目的与意义第29-32页
        1.7.1 AM 真菌与宿主根系的识别机制第30页
        1.7.2 对 AM 功能相关基因的研究第30-32页
第二章 根际土中 AM 真菌孢子活力调查第32-39页
    2.1 引言第32页
    2.2 材料与方法第32-35页
        2.2.1 样地介绍第32页
        2.2.2 采样方法第32-33页
        2.2.3 土壤因子测定第33页
        2.2.4 AM 侵染率测定第33页
        2.2.5 孢子密度测定第33-34页
        2.2.6 孢子活力及萌发率测定第34页
            2.2.6.1 孢子活性测定第34页
            2.2.6.2 孢子萌发率测定第34页
        2.2.7 数据分析第34-35页
    2.3 结果与分析第35-37页
        2.3.1 AM 的分布及侵染特征第35页
        2.3.2 根际 AM 真菌的孢子活力第35-37页
    2.4 讨论第37-39页
第三章 AM 双重培养体系的构建第39-49页
    3.1 引言第39页
    3.2 材料与方法第39-43页
        3.2.1 试验材料第39页
        3.2.2 AM 真菌孢子的消毒方法第39-40页
        3.2.3 培养基第40-42页
        3.2.4 愈伤组织的诱导第42页
        3.2.5 离体根的制备第42页
        3.2.6 发根诱导第42-43页
        3.2.7 双重培养体系的构建第43页
    3.3 结果与分析第43-46页
        3.3.1 AM 真菌孢子操作相关技术研究第43-44页
            3.3.1.1 AM 真菌孢子的移取工具第43页
            3.3.1.2 AM 真菌孢子的表面消毒方法第43-44页
        3.3.2 离体根的制备和发根及愈伤组织诱导第44-45页
        3.3.3 双重培养体系的筛选第45-46页
    3.4 讨论第46-49页
        3.4.1 AM 真菌孢子的移取工具和表面消毒方法第46-47页
        3.4.2 AM 双重培养体系的构建第47-49页
第四章 AM 真菌对宿主植物的识别和响应第49-62页
    4.1 引言第49-50页
    4.2 材料与方法第50-54页
        4.2.1 试验材料第50页
        4.2.2 AM 真菌孢子的表面消毒第50页
        4.2.3 根系分泌物的收集及植物提取物的制备第50-51页
        4.2.4 培养体系第51页
            4.2.4.1 根系分泌物和植物水提取对 AM 真菌菌丝生长的影响第51页
            4.2.4.2 根系与 AM 真菌通过挥发性物质相互识别的验证第51页
        4.2.5 根系分泌物和植物提取物分析第51-52页
        4.2.6 根系挥发物和 AM 真菌挥发物分析第52-54页
        4.2.7 数据分析第54页
    4.3 结果与分析第54-59页
        4.3.1 根系分泌物及植物提取物对 AM 真菌生长的影响第54-56页
        4.3.2 根系与 AM 真菌通过挥发物的相互识别第56-58页
        4.3.3 提取物、分泌物和挥发物的分析结果第58-59页
    4.4 讨论第59-62页
        4.4.1 植物水提取与根系分泌物对 AM 真菌发育的影响第59-60页
        4.4.2 植物根系与 AM 真菌通过挥发物相互识别第60-62页
第五章 植物根系对 AM 真菌的响应第62-75页
    5.1 引言第62-63页
    5.2 材料与方法第63-68页
        5.2.1 试验材料第63页
            5.2.1.1 植物材料第63页
            5.2.1.2 AM 真菌第63页
        5.2.2 培养体系第63-65页
            5.2.2.1 GSEs 试验的设计第64-65页
            5.2.2.2 GVCs 试验的设计第65页
        5.2.3 qRT-PCR第65-67页
        5.2.4 根系测量第67页
        5.2.5 数据处理第67-68页
    5.3 结果与分析第68-71页
        5.3.1 GVCs 可以促进日本百脉根根系分枝且该作用独立于 LjCASTOR第68-70页
        5.3.2 GVCs 能够促进非宿主植物拟南芥根系分枝第70-71页
        5.3.3 GSEs/GVCs 处理下,日本百脉根根系中 AM 共生相关基因的转录水平分析第71页
    5.4 讨论第71-75页
        5.4.1 GVCs 对日本百脉根根系分枝的促进作用独立于 LjCASTOR第72-73页
        5.4.2 GVCs 促进拟南芥根系分枝第73-75页
第六章 AM 真菌对根系形态和根系释放的挥发性有机物的影响第75-87页
    6.1 引言第75-76页
    6.2 材料与方法第76-78页
        6.2.1 试验设计和真菌材料第76页
        6.2.2 植物材料和培养条件第76-77页
        6.2.3 根样收集和测定第77页
        6.2.4 HS-SPME 技术和 VOCs 收集第77-78页
        6.2.5 GC-MS第78页
        6.2.6 AM 侵染率测定第78页
        6.2.7 数据处理第78页
    6.3 结果与分析第78-83页
        6.3.1 接种 AM 真菌对植物生长的影响第78-80页
        6.3.2 接种 AM 真菌对根系结构的影响第80-81页
        6.3.3 接种 AM 真菌对根系释放的挥发性有机物的影响第81-83页
    6.4 讨论第83-87页
        6.4.1 接种 AM 真菌对植物生长的影响第83-84页
        6.4.2 接种 AM 真菌对根系结构的影响第84页
        6.4.3 接种 AM 真菌对根系释放的挥发性有机物的影响第84-87页
第七章 AM 中转录因子 LjMAMI 的功能分析第87-100页
    7.1 引言第87-88页
    7.2 材料与方法第88-94页
        7.2.1 试验材料第88页
        7.2.2 LjMAMI 蛋白体外表达体系的构建第88-89页
        7.2.3 LjMAMI 蛋白的提取与纯化第89-90页
        7.2.4 EMSA 试验第90-91页
        7.2.5 TILLING 突变体的筛选及背景突变的去除第91-93页
        7.2.6 TILLING 突变体的表型分析第93页
        7.2.7 数据处理第93-94页
    7.3 结果与分析第94-97页
        7.3.1 LjMAMI 的靶位点研究第94-96页
            7.3.1.1 LjMAMI 的体外表达第94页
            7.3.1.2 EMSA 试验第94-96页
        7.3.2 LjMAMI TILLING 突变体的表型分析第96-97页
    7.4 讨论第97-100页
        7.4.1 LjMAMI 调控 LjPT4第98-99页
        7.4.2 LjMAMI TILLING 突变体无明显表型第99-100页
第八章 AM 特异性诱导的 LjPT4 的功能分析第100-108页
    8.1 引言第100页
    8.2 材料与方法第100-104页
        8.2.1 试验材料第100页
        8.2.2 LjPT4 的 RNAi第100-101页
        8.2.3 含有 LjPT4 RNAi 根系的重组植物(composite plants)制备及菌根化第101-102页
        8.2.4 qRT-PCR第102页
        8.2.5 丛枝形态的观测第102页
        8.2.6 多聚磷酸盐染色第102-103页
        8.2.7 数据处理第103-104页
    8.3 结果与分析第104-106页
        8.3.1 LjPT4 RNAi 突变体验证第104-106页
        8.3.2 LjPT4 RNAi 突变体对根系形态的影响第106页
        8.3.3 LjPT4 部分沉默后对丛枝形态及多聚磷酸盐转运的影响第106页
    8.4 讨论第106-108页
第九章 结论与展望第108-111页
    9.1 研究特色与创新之处第108页
    9.2 研究结论第108-109页
    9.3 研究展望第109-111页
参考文献第111-128页
致谢第128-129页
作者简介第129页

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