| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 縮略语/符号说明 | 第11-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 研究现状、成果 | 第14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-16页 |
| 一、稳定表达细胞株的建立 | 第16-39页 |
| 1.1 对象和方法 | 第16-28页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.1.2 HEK293T与小鼠Lewis肺癌细胞系(LLC)培养 | 第17页 |
| 1.1.3 逆转录病毒制备 | 第17-19页 |
| 1.1.4 稳定表达细胞株建立 | 第19页 |
| 1.1.5 流式细胞术检测目的基因表达 | 第19-20页 |
| 1.1.6 细胞体外生长曲线测定 | 第20页 |
| 1.1.7 Western法检测细胞内IKKβ水平 | 第20-24页 |
| 1.1.8 EMSA法检测细胞核内NF-KB水平 | 第24-26页 |
| 1.1.9 Real-time PCR检测NF-KB下游基因表达 | 第26-28页 |
| 1.2 结果 | 第28-33页 |
| 1.2.1 IKKβ可在细胞LLC-IKKβ内表达 | 第28-31页 |
| 1.2.2 组成型活化IKKβ可有效激活下游基因的表达 | 第31-33页 |
| 1.3 讨论 | 第33-38页 |
| 1.3.1 IKK/NF-KB信号传导通路 | 第33-36页 |
| 1.3.2 IKK/NF-KB与其他信号传导通路的“交叉对话” | 第36-37页 |
| 1.3.3 OVA抗原肽在肿瘤研究中的应用 | 第37-38页 |
| 1.4 小结 | 第38-39页 |
| 二、CCL2在NF-KB介导的肿瘤免疫排斥中发挥重要作用 | 第39-57页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-45页 |
| 2.1.1 建立动物模型 | 第39页 |
| 2.1.2 Tetramer法检测外周血抗原特异性T细胞比例 | 第39-40页 |
| 2.1.3 Elispot法检测小鼠淋巴细胞IFN-γ分泌 | 第40-42页 |
| 2.1.4 H&E染色及免疫组化 | 第42页 |
| 2.1.5 基因芯片比较LLC-OVA-Mig与LLC-OVA-IKKβ基因表达差异 | 第42-44页 |
| 2.1.6 Lenti-CCL2制备及细胞感染 | 第44-45页 |
| 2.1.7 数据统计分析 | 第45页 |
| 2.2 结果 | 第45-52页 |
| 2.2.1 IKKβ可有效促进LLC-OVA-IKKβ肿瘤发生免疫排斥 | 第45-49页 |
| 2.2.2 CCL2在LLC-OVA-IKKβ肿瘤排斥过程中发挥重要作用 | 第49-52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-56页 |
| 2.3.1 NF-KB与肺癌的关系 | 第52-55页 |
| 2.3.2 肿瘤微环境趋化因子表达与T细胞浸润 | 第55-56页 |
| 2.4 小结 | 第56-57页 |
| 三、NF-KB通路相关分子的抗肿瘤探索研究 | 第57-79页 |
| 3.1 材料与方法 | 第57-68页 |
| 3.1.1 IKKα/NIK腺病毒骨架载体构建 | 第57-62页 |
| 3.1.2 腺病毒包装及扩增 | 第62-65页 |
| 3.1.3 Western法检测目的基因在细胞中的表达 | 第65-66页 |
| 3.1.4 Real-time PCR法检测目的基因下游分子表达 | 第66-67页 |
| 3.1.5 皮下接种腺病毒载体免疫Balb/c小鼠 | 第67页 |
| 3.1.6 Tetramer法检测外周血GFP特异性T细胞 | 第67页 |
| 3.1.7 Elispot检测小鼠淋巴细胞IFN-γ分泌 | 第67页 |
| 3.1.9 肿瘤内注射AdIRF3处理小鼠 | 第67-68页 |
| 3.1.10 肿瘤浸润淋巴细胞比例检测 | 第68页 |
| 3.2 结果 | 第68-73页 |
| 3.2.1 腺病毒载体在细胞内的表达及对下游基因的诱导 | 第68-70页 |
| 3.2.2 皮下接种AdIKK β可短暂诱导抗原特异性T细胞反应 | 第70-71页 |
| 3.2.3 AdlRF3肿瘤内注射可以增强小鼠体内抗原特异性T细胞的产生 | 第71-73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-78页 |
| 3.3.1 靶向肿瘤内PRR逆转肿瘤免疫耐受 | 第73-74页 |
| 3.3.2 肿瘤内注射增强抗肿瘤免疫反应的优势 | 第74-78页 |
| 3.4 小结 | 第78-79页 |
| 全文结论 | 第79-80页 |
| 论文创新点 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-100页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-104页 |
| 综述 | 第104-121页 |
| 综述参考文献 | 第112-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
