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核因子-κB及干扰素调节因子3在抗肿瘤免疫中的作用

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
縮略语/符号说明第11-14页
前言第14-16页
    研究现状、成果第14页
    研究目的、方法第14-16页
一、稳定表达细胞株的建立第16-39页
    1.1 对象和方法第16-28页
        1.1.1 实验材料第16-17页
        1.1.2 HEK293T与小鼠Lewis肺癌细胞系(LLC)培养第17页
        1.1.3 逆转录病毒制备第17-19页
        1.1.4 稳定表达细胞株建立第19页
        1.1.5 流式细胞术检测目的基因表达第19-20页
        1.1.6 细胞体外生长曲线测定第20页
        1.1.7 Western法检测细胞内IKKβ水平第20-24页
        1.1.8 EMSA法检测细胞核内NF-KB水平第24-26页
        1.1.9 Real-time PCR检测NF-KB下游基因表达第26-28页
    1.2 结果第28-33页
        1.2.1 IKKβ可在细胞LLC-IKKβ内表达第28-31页
        1.2.2 组成型活化IKKβ可有效激活下游基因的表达第31-33页
    1.3 讨论第33-38页
        1.3.1 IKK/NF-KB信号传导通路第33-36页
        1.3.2 IKK/NF-KB与其他信号传导通路的“交叉对话”第36-37页
        1.3.3 OVA抗原肽在肿瘤研究中的应用第37-38页
    1.4 小结第38-39页
二、CCL2在NF-KB介导的肿瘤免疫排斥中发挥重要作用第39-57页
    2.1 材料与方法第39-45页
        2.1.1 建立动物模型第39页
        2.1.2 Tetramer法检测外周血抗原特异性T细胞比例第39-40页
        2.1.3 Elispot法检测小鼠淋巴细胞IFN-γ分泌第40-42页
        2.1.4 H&E染色及免疫组化第42页
        2.1.5 基因芯片比较LLC-OVA-Mig与LLC-OVA-IKKβ基因表达差异第42-44页
        2.1.6 Lenti-CCL2制备及细胞感染第44-45页
        2.1.7 数据统计分析第45页
    2.2 结果第45-52页
        2.2.1 IKKβ可有效促进LLC-OVA-IKKβ肿瘤发生免疫排斥第45-49页
        2.2.2 CCL2在LLC-OVA-IKKβ肿瘤排斥过程中发挥重要作用第49-52页
    2.3 讨论第52-56页
        2.3.1 NF-KB与肺癌的关系第52-55页
        2.3.2 肿瘤微环境趋化因子表达与T细胞浸润第55-56页
    2.4 小结第56-57页
三、NF-KB通路相关分子的抗肿瘤探索研究第57-79页
    3.1 材料与方法第57-68页
        3.1.1 IKKα/NIK腺病毒骨架载体构建第57-62页
        3.1.2 腺病毒包装及扩增第62-65页
        3.1.3 Western法检测目的基因在细胞中的表达第65-66页
        3.1.4 Real-time PCR法检测目的基因下游分子表达第66-67页
        3.1.5 皮下接种腺病毒载体免疫Balb/c小鼠第67页
        3.1.6 Tetramer法检测外周血GFP特异性T细胞第67页
        3.1.7 Elispot检测小鼠淋巴细胞IFN-γ分泌第67页
        3.1.9 肿瘤内注射AdIRF3处理小鼠第67-68页
        3.1.10 肿瘤浸润淋巴细胞比例检测第68页
    3.2 结果第68-73页
        3.2.1 腺病毒载体在细胞内的表达及对下游基因的诱导第68-70页
        3.2.2 皮下接种AdIKK β可短暂诱导抗原特异性T细胞反应第70-71页
        3.2.3 AdlRF3肿瘤内注射可以增强小鼠体内抗原特异性T细胞的产生第71-73页
    3.3 讨论第73-78页
        3.3.1 靶向肿瘤内PRR逆转肿瘤免疫耐受第73-74页
        3.3.2 肿瘤内注射增强抗肿瘤免疫反应的优势第74-78页
    3.4 小结第78-79页
全文结论第79-80页
论文创新点第80-81页
参考文献第81-100页
发表论文和参加科研情况说明第100-101页
附录第101-104页
综述第104-121页
    综述参考文献第112-121页
致谢第121页

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