| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 蛋白质复性纯化技术 | 第11-17页 |
| 1.2.1 传统的复性技术 | 第11-12页 |
| 1.2.2 添加剂辅助蛋白复性技术 | 第12-13页 |
| 1.2.3 液相色谱复性技术 | 第13-16页 |
| 1.2.4 规模化复性技术 | 第16-17页 |
| 1.3 混合模式色谱 | 第17-18页 |
| 1.4 单柱二维液相色谱 | 第18-19页 |
| 1.5 本文研究内容及意义 | 第19页 |
| 参考文献 | 第19-27页 |
| 第二章 双功能色谱固定相对重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的复性与同时纯化 | 第27-49页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验部分 | 第27-32页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第27-29页 |
| 2.2.2 试剂 | 第29-31页 |
| 2.2.3 rhG-CSF的制备 | 第31页 |
| 2.2.4 复性与纯化的rhG-CSF理化性质分析 | 第31页 |
| 2.2.5 离子交换和疏水模式下rhG-CSF的复性与纯化条件 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第32-46页 |
| 2.3.1 WAX/HIC双功能色谱柱在IEC和HIC两种分离模式下对蛋白质的分离 | 第32-33页 |
| 2.3.2 PFLC对rhG-CSF的复性与同时纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.3 脲浓度对rhG-CSF复性与纯化的影响 | 第34-36页 |
| 2.3.4 pH对rhG-CSF复性与纯化的影响 | 第36-39页 |
| 2.3.5 进样量对rhG-CSF复性与纯化的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.6 离子交换模式下GSH/GSSG比例对rhG-CSF复性与纯化的影响 | 第41-43页 |
| 2.3.7 疏水模式下起始硫酸铵浓度对rhG-CSF复性与纯化的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.8 最佳条件下对rhG-CSF的复性与纯化 | 第44-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 双功能色谱固定相在IEC模式下对重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)的复性与同时纯化 | 第49-60页 |
| 3.1 引言 | 第49-50页 |
| 3.2 实验部分 | 第50页 |
| 3.2.1 仪器 | 第50页 |
| 3.2.2 试剂 | 第50页 |
| 3.2.3 rhTNF-α的制备 | 第50页 |
| 3.2.4 复性与纯化的rhTNF-α理化性质分析 | 第50页 |
| 3.2.5 离子交换模式下对rhTNF-α的复性与纯化条件 | 第50页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第50-58页 |
| 3.3.1 PFLC对rhTNF-α的复性与同时纯化 | 第50-51页 |
| 3.3.2 离子交换模式下流动相中添加不同浓度的尿素对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.3 离子交换模式下流动相的pH值对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.4 离子交换模式下流动相中GSH/GSSG的比例对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.5 离子交换模式下进样量对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第55-57页 |
| 3.3.6 离子交换模式在最佳条件下对rhTNF-α的复性与纯化 | 第57-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 第四章 双功能色谱固定相在HIC模式下对重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)的复性与同时纯化 | 第60-69页 |
| 4.1 引言 | 第60-61页 |
| 4.2 实验部分 | 第61-62页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第61页 |
| 4.2.2 试剂 | 第61页 |
| 4.2.3 rhTNF-α的制备 | 第61页 |
| 4.2.4 复性与纯化的rhTNF-α理化性质分析 | 第61页 |
| 4.2.5 疏水模式下对rhTNF-α的纯化条件 | 第61页 |
| 4.2.6 单柱二维液相色谱 | 第61-62页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第62-67页 |
| 4.3.1 疏水模式下流动相中添加不同浓度的尿素对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.2 疏水模式下进样量对rhTNF-α复性与纯化的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.3 疏水模式在最佳条件下对rhTNF-α的复性与纯化 | 第64-65页 |
| 4.3.4 离线单柱二维液相色谱法对rhTNF-α的复性 | 第65-67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 论文总结 | 第69-70页 |
| 硕士期间主要成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
