| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-24页 |
| 第一章 镉毒性作用及分子机制的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.镉的毒性损伤机制 | 第14-15页 |
| 2.镉的毒性作用 | 第15-16页 |
| 3.镉对骨骼及破骨细胞的毒性作用 | 第16-17页 |
| 第二章 OC分化的研究进展 | 第17-20页 |
| 1. M-CSF/c-Fms通路与OCP分化的调控 | 第17页 |
| 2. RANKL/RANK/OPG通路在OC分化中的作用 | 第17-20页 |
| 第三章 钙离子信号及Ca~(2+)/CaM/CaMKs信号通路 | 第20-24页 |
| 1. 钙离子在细胞中的作用 | 第20-22页 |
| 1.1 钙离子动员 | 第20-21页 |
| 1.2 钙离子振荡 | 第21页 |
| 1.3 Ca~(2+)/CaM/CaMKs | 第21-22页 |
| 2. Ca~(2+)/CaM/CaMKs在OC分化中的作用 | 第22-24页 |
| 第二部分 试验研究 | 第24-53页 |
| 第一章 镉对小鼠OC分化的影响 | 第24-35页 |
| 1. 材料和方法 | 第24-25页 |
| 1.1 实验动物 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-29页 |
| 2.1 骨髓单核细胞的分离及OC的诱导分化 | 第25-26页 |
| 2.2 骨髓单核细胞活性的测定 | 第26页 |
| 2.3 TRAP染色及计数 | 第26页 |
| 2.4 蛋白样品提取 | 第26页 |
| 2.5 Western blot方法测定相关蛋白 | 第26-27页 |
| 2.6 RNA样品提取 | 第27页 |
| 2.7 引物设计与合成 | 第27-28页 |
| 2.8 互补脱氧核苷酸(cDNA)制备 | 第28页 |
| 2.9 基因组DNA消除反应 | 第28页 |
| 2.10 反转录反应 | 第28-29页 |
| 2.11 RT-qPCR | 第29页 |
| 2.12 数据分析 | 第29页 |
| 3. 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 RTCA法检测镉对骨髓巨噬细胞活性的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 TRAP染色法观察镉对OC形成的影响 | 第30-31页 |
| 3.3 RT-qCR检测镉对OC相关标志基因表达的影响 | 第31-32页 |
| 3.4 Western blot检测镉对OC相关标志蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 钙离子信号在镉影响OC分化过程中的作用 | 第35-43页 |
| 1. 材料和方法 | 第35-36页 |
| 1.1 实验动物 | 第35页 |
| 1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
| 2. 方法 | 第36-37页 |
| 2.1 骨髓单核细胞的分离培养 | 第36页 |
| 2.2 OC的诱导 | 第36页 |
| 2.3 TRAP染色及计数 | 第36页 |
| 2.4 蛋白样品提取 | 第36页 |
| 2.5 Western blot方法 | 第36页 |
| 2.6 激光共聚焦显微镜检测钙离子 | 第36-37页 |
| 2.7 数据分析 | 第37页 |
| 3. 结果 | 第37-42页 |
| 3.1 激光共聚焦显微镜检测镉对胞内钙离子浓度的影响 | 第37-38页 |
| 3.2 激光共聚焦显微镜检测镉和BAPTA-AM对胞内钙离子浓度的影响 | 第38-39页 |
| 3.3 TRAP染色法观察钙离子在镉对OC分化中的作用 | 第39-40页 |
| 3.4 Western blot检测细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM在镉影响OC分化过程中的作用 | 第40页 |
| 3.5 Western blot检测内质网钙离子抑制剂TG(Thapsigargin)调控OC分化过程中的作用 | 第40-41页 |
| 3.6 Western blot检测内质网钙离子抑制剂2-APB对OC分化过程中的影响 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 Ca~(2+)/CaM/CaMKs信号通路在镉影响OC分化过程中的作用 | 第43-53页 |
| 1. 材料和方法 | 第43-44页 |
| 1.1 实验动物 | 第43页 |
| 1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
| 1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 2. 方法 | 第44页 |
| 2.1 骨髓单核细胞的分离培养 | 第44页 |
| 2.2 OC的诱导 | 第44页 |
| 2.3 TRAP染色及计数 | 第44页 |
| 2.4 蛋白样品提取 | 第44页 |
| 2.5 Western blot方法 | 第44页 |
| 2.6 数据分析 | 第44页 |
| 3. 结果 | 第44-51页 |
| 3.1 TRAP染色观察抑制Ca~(2+)/CaM/CaMKs信号通路对镉影响OC分化的作用 | 第44-45页 |
| 3.2 Western blot检测镉影响OC分化中Ca~(2+)/CaM/CaMKs信号通路关键蛋的表达 | 第45-47页 |
| 3.3 Western blot检测Ca~(2+)/CaM/CaMK信号通路在镉影响OC分化中的作用 | 第47-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-53页 |
| 全文结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
