| 中文摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-36页 |
| ·甜瓜果实糖的变化及关键代谢酶 | 第14-17页 |
| ·甜瓜果实发育过程中糖含量的变化 | 第14-15页 |
| ·甜瓜果实不同部位糖分的分布 | 第15页 |
| ·蔗糖代谢相关酶 | 第15-17页 |
| ·蔗糖合成酶基因的研究进展 | 第17-22页 |
| ·蔗糖合成酶（SS）的基本性质 | 第17-18页 |
| ·目前公布的SS 基因家族 | 第18-19页 |
| ·SS 基因的生物学功能 | 第19-22页 |
| ·影响库强、调控输入蔗糖多少和代谢蔗糖的能力 | 第20页 |
| ·参与细胞分化与纤维细胞壁合成 | 第20-21页 |
| ·调节淀粉合成 | 第21页 |
| ·提高植物抗逆性 | 第21-22页 |
| ·SS 基因的遗传转化 | 第22页 |
| ·反义技术的应用 | 第22-25页 |
| ·反义基因的基本概念 | 第22-23页 |
| ·反义 RNA 技术的作用机制 | 第23-24页 |
| ·反义 RNA 技术在植物中的应用 | 第24-25页 |
| ·甜瓜组织培养与遗传转化研究进展 | 第25-35页 |
| ·转化方法 | 第25-28页 |
| ·农杆菌介导的基因转移 | 第25-26页 |
| ·外源 DNA 直接导入 | 第26-27页 |
| ·种质系统的基因转移 | 第27-28页 |
| ·甜瓜的组织培养 | 第28-34页 |
| ·甜瓜再生体系建立的影响因素 | 第28-31页 |
| ·甜瓜组织培养国内外研究现状 | 第31-32页 |
| ·对甜瓜的遗传转化 | 第32-34页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第34页 |
| ·存在的问题与展望 | 第34-35页 |
| ·研究目的与意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-53页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第36页 |
| ·再生体系培养基 | 第36-38页 |
| ·PCR 引物 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-53页 |
| ·甜瓜果实总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·提取RNA 所用器皿的处理及溶液配制 | 第38-39页 |
| ·异硫氰酸胍—酚—氯仿一步法提取RNA的方法和步骤 | 第39页 |
| ·甜瓜蔗糖合成酶（SS）基因的克隆 | 第39-41页 |
| ·CmSS1 基因中间片段的克隆 | 第39-40页 |
| ·CmSS1 基因3′端的克隆 | 第40页 |
| ·CmSS1 基因5′端的克隆 | 第40-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| ·目的片段的回收 | 第41-42页 |
| ·连接反应 | 第42页 |
| ·转化 | 第42-45页 |
| ·用CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·热激法转化E.coli.DH5α | 第43-44页 |
| ·重组子的PCR 及酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·测序及序列分析 | 第45页 |
| ·CmSS1 表达特异性分析 | 第45-46页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第46-49页 |
| ·目的基因片段的获得 | 第47-48页 |
| ·表达载体PBI121 的酶切 | 第48页 |
| ·目的基因和植物表达载体酶切后的片段回收 | 第48页 |
| ·连接反应 | 第48页 |
| ·热激法转化E.coli.DH5α | 第48页 |
| ·PCR 扩增鉴定反义表达载体 | 第48-49页 |
| ·酶切鉴定 | 第49页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第49-50页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·转化农杆菌 | 第50页 |
| ·农杆菌介导法转化甜瓜 | 第50-51页 |
| ·子房注射法转化甜瓜 | 第51页 |
| ·提取重组载体质粒 | 第51页 |
| ·甜瓜子房的处理 | 第51页 |
| ·子房注射 | 第51页 |
| ·鉴定转基因植株 | 第51-53页 |
| ·CTAB 法提取基因组 | 第51-52页 |
| ·PCR 鉴定 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-62页 |
| ·甜瓜果实RNA 的提取 | 第53页 |
| ·CmSS1 基因的克隆 | 第53-54页 |
| ·CmSS1 基因中间片段的克隆 | 第53-54页 |
| ·CmSS1 基因3′端的克隆 | 第54页 |
| ·CmSS1 基因5′端的克隆 | 第54页 |
| ·CmSS1 基因的氨基酸序列同源性分析 | 第54-55页 |
| ·CmSS1 表达特性分析 | 第55-57页 |
| ·CmSS1 在甜瓜不同组织器官中的表达特性分析 | 第55-56页 |
| ·CmSS1 基因在甜瓜果实不同发育时期的表达特性分析 | 第56-57页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·反义表达载体转化农杆菌 | 第58-59页 |
| ·甜瓜不同外植体部位的再生能力 | 第59页 |
| ·外植体的再生 | 第59-60页 |
| ·转基因甜瓜的DNA 鉴定 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·关于甜瓜果实总RNA 的提取及对策 | 第62页 |
| ·反转录反应 | 第62页 |
| ·RT-PCR 优化及Real-time PCR | 第62-63页 |
| ·载体的构建 | 第63-64页 |
| ·关于甜瓜的转化因素 | 第64-65页 |
| ·不同外植体和年龄 | 第64页 |
| ·植物激素 | 第64页 |
| ·农杆菌的浓度和侵染的时间 | 第64-65页 |
| ·子房注射法获得转基因植株 | 第65-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第79页 |