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中国樱桃SFB基因的克隆与表达研究

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
1 引言第11-26页
   ·植物自交不亲和现象第11-13页
   ·S-RNase 介导花粉管RNA 降解的配子体自交不亲和性机制第13-22页
     ·花柱中表达的S-RNase 基因第14-18页
     ·花粉中表达的SLF/SFB 基因第18-22页
   ·关于李属植物自交亲和(SC)的分子基础研究第22-25页
     ·李属植物二倍体SC 研究第22-23页
     ·李属植物多倍体SC 研究第23-25页
   ·研究目的意义第25-26页
2 材料与方法第26-35页
   ·试验材料第26-27页
     ·植物材料第26-27页
     ·菌株和培养基第27页
     ·酶及试剂第27页
     ·培养基和溶液的配制第27页
   ·试验方法第27-35页
     ·基因组DNA 提取第27-28页
     ·‘泰小红樱’花粉总RNA 的提取第28-29页
     ·去除RNA 中基因组DNA 操作第29页
     ·反转录cDNA 第一链的合成第29-30页
     ·‘泰小红樱’花粉SFB 基因的克隆第30-31页
       ·引物的设计第30页
       ·PCR 扩增第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第31-32页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
       ·连接反应第31-32页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化及阳性克隆的筛选第32页
     ·碱法小量质粒 DNA 的提取第32-33页
     ·PpSFB 基因的表达第33-34页
     ·cDNA 测序及多重序列比对第34页
     ·开放式阅读框分析及蛋白分析第34页
     ·进化树分析第34-35页
     ·‘泰小红樱’自交后代SFB 基因型鉴定第35页
3 结果与分析第35-45页
   ·电泳检测中国樱桃花粉RNA 的完整性第35页
   ·PpSFB 基因全长cDNA 的克隆第35-40页
   ·PpSFB 基因的表达第40-41页
   ·中国樱桃和李属其它品种的SFB 基因的系统进化树第41-43页
   ·‘泰小红樱’自交后代的SFB 基因型第43-45页
4 讨论第45-48页
   ·‘泰小红樱’S-RNase 基因的研究第45-46页
   ·‘泰小红樱’无功能的S-单元型突变体第46页
   ·‘泰小红樱’的含异等位基因的花粉自交不亲和第46页
   ·‘泰小红樱’自交亲和性的分子机制探讨第46-48页
   ·关于‘泰小红樱’S-RNase 与SFB 的连锁关系第48页
5 结论第48-50页
参考文献第50-58页
致谢第58-59页
攻读硕士学位期间发表论文第59页

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