| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英缩略词表 | 第10-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-13页 |
| 第2章 实验材料、仪器与试剂 | 第13-16页 |
| 2.1 细胞、临床标本与组织芯片 | 第13页 |
| 2.2 主要仪器 | 第13-14页 |
| 2.3 主要试剂 | 第14-16页 |
| 第3章 实验方法 | 第16-25页 |
| 3.1 主要试剂的配制 | 第16-18页 |
| 3.1.1 常规分子生物学试剂的配制 | 第16页 |
| 3.1.2 细胞培养主要试剂的配制 | 第16页 |
| 3.1.3 真核细胞 DNA 提取所需试剂的配制 | 第16-17页 |
| 3.1.4 PCR 所需试剂和溶液的配制 | 第17页 |
| 3.1.5 盐析法提取组织 DNA 所需试剂和溶液的配制 | 第17-18页 |
| 3.1.6 原位杂交主要试剂的配制 | 第18页 |
| 3.2 细胞培养 | 第18-20页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第18-19页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第19页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第19页 |
| 3.2.4 细胞计数 | 第19页 |
| 3.2.5 爬片细胞培养 | 第19-20页 |
| 3.3 miRNA 提取、miRNA 表达谱芯片分析 | 第20页 |
| 3.3.1 miRNA 提取 | 第20页 |
| 3.3.2 miRNA 表达谱芯片分析 | 第20页 |
| 3.4 miRNA 逆转录与实时荧光定量-PCR | 第20-21页 |
| 3.4.1 miRNA 逆转录 | 第20-21页 |
| 3.4.2 实时荧光定量-PCR | 第21页 |
| 3.5 爬片细胞及乳腺癌组织 miR-205 原位杂交 | 第21-22页 |
| 3.6 真核细胞 DNA 的提取 | 第22-23页 |
| 3.7 盐析法从石蜡包埋组织中提取 DNA | 第23页 |
| 3.8 PCR | 第23-24页 |
| 3.9 DNA 测序 | 第24页 |
| 3.10 统计 | 第24-25页 |
| 第4章 实验结果 | 第25-36页 |
| 4.1 乳腺癌转移相关 miR-205 的筛选与验证 | 第25-29页 |
| 4.1.1 高、低转移性乳腺癌细胞的 miRNA 表达谱芯片分析 | 第25-26页 |
| 4.1.2 qRT-PCR 检测 miR-205 在高、低转移性乳腺癌中的表达 | 第26-27页 |
| 4.1.3 原位杂交检测 miR-205 在乳腺癌爬片细胞中的表达 | 第27页 |
| 4.1.4 原位杂交检测 miR-205 在乳腺癌组织芯片中的表达 | 第27-29页 |
| 4.2 miR-205 基因 rs3842530 多态性与乳腺癌转移的相关性分析 | 第29-36页 |
| 4.2.1 十个肿瘤细胞株 miR-205 的 PCR 扩增与测序分析 | 第29-30页 |
| 4.2.2 qRT-PCR 检测十个肿瘤细胞株 miR-205 的表达 | 第30-31页 |
| 4.2.3 原位杂交检测不同 miR-205 基因 rs3842530 多态性标本的 miR-205的表达 | 第31-32页 |
| 4.2.4 乳腺癌和良性乳腺病变中 rs3842530 多态性的分析 | 第32-36页 |
| 第5章 讨论 | 第36-41页 |
| 第6章 结论与展望 | 第41-43页 |
| 6.1 结论 | 第41页 |
| 6.2 展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 综述 | 第49-56页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
