| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文对照与缩略词一览表 | 第7-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-14页 |
| 1.1 泛素系统 | 第10-11页 |
| 1.2 去泛素化水解酶 Usp28 | 第11-12页 |
| 1.3 核磁共振技术在蛋白质-蛋白质相互作用中的应用 | 第12-14页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第14-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.2 实验仪器 | 第14-15页 |
| 2.3 主要试剂 | 第15-18页 |
| 2.3.1 PCR 和分子克隆试剂 | 第15页 |
| 2.3.2 蛋白质表达纯化试剂 | 第15-16页 |
| 2.3.3 常用配制试剂 | 第16-18页 |
| 2.4 实验方法 | 第18-31页 |
| 2.4.1 Usp28(1-120)的表达和纯化 | 第18-19页 |
| 2.4.2 泛素（Ub）的表达和纯化 | 第19-20页 |
| 2.4.3 类泛素蛋白 SUMO1 和 SUMO2 的表达和纯化 | 第20-22页 |
| 2.4.4 蛋白质浓度测定 | 第22页 |
| 2.4.5 NMR 实验 | 第22页 |
| 2.4.6 NMR 化学位移扰动实验 | 第22-23页 |
| 2.4.7 K48 偶联的二泛素水解实验 | 第23页 |
| 2.4.8 Ub-AMC 水解实验 | 第23-24页 |
| 2.4.9 Usp28 催化结构域重组质粒的构建 | 第24-31页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第31-64页 |
| 3.1 Usp28 N-端泛素结合结构域对其去泛素化水解活性的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 SUMO1 和 SUMO2 分子对 Usp28 酶活性的影响 | 第32-34页 |
| 3.3 Usp28 底物识别和功能调控的分子机制 | 第34-60页 |
| 3.3.1 Usp28(1-120)溶液结构的测定 | 第34-37页 |
| 3.3.2 Usp28(1-120)与泛素/二泛素之间的相互作用模式 | 第37-47页 |
| 3.3.3 Usp28(1-120)与 SUMO1/SUMO2 之间的相互作用模式 | 第47-56页 |
| 3.3.4 K48 偶联的二泛素和 SUMO2 与 Usp28(1-120)的竞争性结合模式 | 第56-60页 |
| 3.4 Usp28 催化结构域 | 第60-64页 |
| 3.4.1 Usp28 催化结构域基因的克隆 | 第60页 |
| 3.4.2 Usp28 催化结构域的表达 | 第60-61页 |
| 3.4.3 Usp28 催化结构域的纯化 | 第61-64页 |
| 第4章 全文总结 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第69-70页 |
| 综述 | 第70-82页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
