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水稻短根突变体Osksr4基因的克隆及功能的初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
引言第9-10页
第一章 文献综述第10-20页
    1 植物脂肪酸的种类和生理功能第10-12页
        1.1 植物脂肪酸的种类第10页
        1.2 植物脂肪酸的生理功能第10-12页
    2 植物脂肪酸的生物合成第12-15页
        2.1 饱和脂肪酸的生物合成第13-14页
        2.2 不饱和脂肪酸的生物合成第14页
        2.3 超长链脂肪酸的生物合成第14-15页
    3 植物脂肪酸的遗传代谢调控第15-18页
        3.1 植物脂肪酸链长度的遗传代谢调控第15-16页
        3.2 植物脂肪酸饱和度的遗传代谢调控第16-17页
        3.3 植物种子含油量的遗传代谢调控第17-18页
    4 本研究目的和意义第18-20页
第二章 突变体 Osksr4 的筛选、表型分析第20-34页
    1 材料与方法第20-23页
        1.1 实验材料第20页
        1.2 实验方法第20-23页
            1.2.1 水稻突变体的筛选第20页
            1.2.2 突变体表型观察与农艺性状分析第20-21页
            1.2.3 醋酸洋红和 I2-KI 染色第21页
            1.2.4 花粉活性检测第21页
            1.2.5 细胞凋亡分析第21页
            1.2.6 活性氧测定第21页
            1.2.7 根尖树脂切片第21-22页
            1.2.8 脂肪酸的含量测定与组分分析第22-23页
                1.2.8.1 总脂的提取第22页
                1.2.8.2 皂化第22-23页
                1.2.8.3 脂肪酸甲酯化第23页
                1.2.8.4 甾醇硅醚化第23页
                1.2.8.5 脂肪酸的定性与定量分析第23页
    2 结果与分析第23-33页
        2.1 突变体的筛选和表型分析第23-25页
        2.2 突变体的农艺性状分析第25-26页
        2.3 染色实验分析第26-28页
            2.3.1 醋酸洋红染色和 I2-KI 染色分析第26-27页
            2.3.2 细胞凋亡分析第27-28页
            2.3.3 花粉活性检测第28页
        2.4 根尖树脂切片分析第28-32页
        2.5 脂肪酸分析第32-33页
    3 小结第33-34页
第三章 突变基因的克隆与基因表达分析第34-49页
    1 材料与方法第34-43页
        1.1 实验材料第34页
        1.2 实验方法第34-43页
            1.2.1 F_2群体的构建及遗传分析第34页
            1.2.2 F_2群体 DNA 的抽提第34-35页
            1.2.3 突变基因的图位克隆第35-36页
            1.2.4 RNA 提取及相关第36-38页
                1.2.4.1 RNA 的提取第36页
                1.2.4.2 RNA 的逆转录第36-37页
                1.2.4.3 基因的时空表达第37-38页
            1.2.5 候选基因的确定与测序分析第38页
            1.2.6 回复载体构建及农杆菌介导的水稻(籼稻)转化第38-40页
                1.2.6.1 回复载体 Pr35S::OsKSR4 的构建第38-39页
                1.2.6.2 农杆菌介导的水稻(籼稻)转化第39-40页
            1.2.7 基因的表达分析第40-41页
                1.2.7.1 半定量 RT-PCR 分析第40页
                1.2.7.2 OsKSR4 启动子融合 GUS 转基因材料的表达分析第40-41页
            1.2.8 蛋白的亚细胞定位第41-43页
                1.2.8.1 基因与 GFP 融合载体的构建第41-42页
                1.2.8.2 OsKSR4 蛋白在洋葱表皮的亚细胞定位第42-43页
    2 结果与分析第43-48页
        2.1 基因定位群体的创建和遗传分析第43页
        2.2 OsKSR4 基因定位和克隆第43-45页
            2.2.1 OsKSR4 基因的定位第43-45页
            2.2.2 分析候选基因第45页
        2.3 OsKSR4 基因的时空表达与半定量 RT-PCR 分析第45-46页
        2.4 OsKSR4 基因的转基因回复验证第46-47页
        2.5 转 OsKSR4 基因的 GUS 染色结果第47页
        2.6 OsKSR4 蛋白在洋葱表皮的亚细胞定位第47-48页
    3 小结第48-49页
第四章 结论与展望第49-51页
参考文献第51-58页
附录第58-61页
在学研究成果第61-62页
致谢第62页

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