缩写符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-27页 |
1.1 斜纹夜蛾 | 第11-14页 |
1.1.1 斜纹夜蛾的发生危害 | 第11-12页 |
1.1.2 斜纹夜蛾的防治与抗药性 | 第12-14页 |
1.2 昆虫表皮形成机理 | 第14-17页 |
1.2.1 昆虫表皮结构 | 第14页 |
1.2.2 昆虫表皮组成成分 | 第14页 |
1.2.3 昆虫蜕皮生理生化过程 | 第14-16页 |
1.2.4 昆虫表皮形成相关酶及其作用 | 第16-17页 |
1.3 昆虫蜕皮激素的分子机理 | 第17-19页 |
1.4 虫酰肼类杀虫剂作用机制 | 第19-21页 |
1.4.1 虫酰肼类杀虫剂作用机理 | 第19-21页 |
1.4.2 虫酰肼类杀虫剂抗性机制 | 第21页 |
1.5 实验方法介绍 | 第21-25页 |
1.5.1 序列比对和系统进化分析 | 第21-22页 |
1.5.2 RACE技术 | 第22-25页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-41页 |
2.1 材料 | 第27-30页 |
2.1.1 供试斜纹夜蛾 | 第27-28页 |
2.1.2 供试化学试剂、酶、质粒 | 第28页 |
2.1.3 供试菌株及制备 | 第28-29页 |
2.1.4 主要试验仪器和设备 | 第29-30页 |
2.1.5 培养基及溶液配制 | 第30页 |
2.2 方法 | 第30-41页 |
2.2.1 多巴脱羧酶基因克隆引物设计 | 第30-31页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第31-32页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
2.2.4 DDC中间目的片段克隆 | 第33-37页 |
2.2.5 3'RACE | 第37页 |
2.2.6 5'RACE | 第37-38页 |
2.2.7 序列分析及蛋白质结构预测 | 第38页 |
2.2.8 虫酰肼对斜纹夜蛾幼虫的毒力测定 | 第38页 |
2.2.9 定量PCR引物设计 | 第38-39页 |
2.2.10 定量PCR Total RNA提取 | 第39页 |
2.2.11 去除基因组DNA和反转录 | 第39-40页 |
2.2.12 各基因标准曲线的制作 | 第40页 |
2.2.13 多巴脱羧酶基因的相对定量表达 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-55页 |
3.1 总RNA提取质量检测 | 第41页 |
3.2 斜纹夜蛾多巴脱羧酶基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第41-47页 |
3.2.1 斜纹夜蛾DDC基因片段的克隆 | 第41-42页 |
3.2.2 斜纹夜蛾DDC基因3'RACE克隆 | 第42-43页 |
3.2.3 斜纹夜蛾DDC基因5'RACE克隆 | 第43-44页 |
3.2.4 斜纹夜蛾DDC基因全长序列的获得及序列分析 | 第44-47页 |
3.3 虫酰肼对斜纹夜蛾幼虫的毒力测定结果 | 第47页 |
3.4 定量PCR引物验证 | 第47-48页 |
3.5 标准曲线和溶解曲线的制作 | 第48-50页 |
3.6 斜纹夜蛾多巴脱羧酶基因动态表达 | 第50-51页 |
3.6.1 斜纹夜蛾幼虫多巴脱羧酶基因动态表达 | 第50页 |
3.6.2 斜纹夜蛾不同发育阶段多巴脱羧酶基因动态表达 | 第50-51页 |
3.7 虫酰肼对斜纹夜蛾幼虫多巴脱羧酶基因转录表达的影响 | 第51-55页 |
3.7.1 虫酰肼对斜纹夜蛾3龄幼虫DDC的转录表达影响 | 第51-52页 |
3.7.2 虫酰肼对斜纹夜蛾4龄幼虫DDC的转录表达影响 | 第52-53页 |
3.7.3 虫酰肼对斜纹夜蛾5龄幼虫DDC的转录表达影响 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
4.1 斜纹夜蛾多巴脱羧酶基因cDNA全长的克隆 | 第55-56页 |
4.2 虫酰肼对斜纹夜蛾幼虫的毒力 | 第56页 |
4.3 虫酰肼对斜纹夜蛾幼虫多巴脱羧酶基因转录表达的影响 | 第56-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
硕士期间发表论文情况 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |