| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第11-15页 |
| 1 引言 | 第15-17页 |
| 2 杜氏盐藻 Prdx1 相互作用蛋白的筛选 | 第17-35页 |
| 2.1 材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 实验设备 | 第17-18页 |
| 2.1.2 杜氏盐藻藻种及所用大肠杆菌菌株和酵母菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 培养基及试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 酵母双杂诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 的构建 | 第20-25页 |
| 2.2.2 诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 转化酵母感受态细胞 | 第25-26页 |
| 2.2.3 酵母双杂交诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 的自激活与毒性检测 | 第26-27页 |
| 2.2.4 文库菌 AH109 与诱饵菌 Y187 杂交以及阳性克隆的筛选 | 第27-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 杜氏盐藻 Prdx1 开放阅读框的获得 | 第28-29页 |
| 2.3.2 pGEMT-Prdx1 重组质粒的构建 | 第29页 |
| 2.3.3 酵母双杂交诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 的构建以及酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.4 诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 转化酵母细胞鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.5 诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 自激活检测 | 第31页 |
| 2.3.6 诱饵质粒 pGBKT7-Prdx1 的毒性实验 | 第31页 |
| 2.3.7 文库菌 AH109 与诱饵菌 Y187 进行杂交 | 第31-32页 |
| 2.3.8 酵母双杂交阳性克隆鉴定 | 第32页 |
| 2.3.9 菌落 PCR 结果以及测序结果分析 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5 结论 | 第34-35页 |
| 3 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白的原核表达及纯化 | 第35-46页 |
| 3.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 实验设备 | 第35页 |
| 3.1.2 大肠杆菌菌种及载体 | 第35页 |
| 3.1.3 实验所用试剂 | 第35页 |
| 3.1.4 常用试剂的配置 | 第35-36页 |
| 3.2 方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 pET28-Prdx1 质粒转化大肠杆菌 BL21(DE3) | 第36页 |
| 3.2.2 杜氏盐藻 Prdx1 可溶性蛋白诱导表达条件优化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 SDS-PAGE 电泳检测杜氏盐藻 Prdx1 蛋白表达形式的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.4 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白的大量诱导表达 | 第38-39页 |
| 3.2.5 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白的纯化(蛋白纯化使用的是上海生工的 Ni-IDASefinose 蛋白纯化试剂盒) | 第39页 |
| 3.2.6 已纯化蛋白的透析 | 第39-40页 |
| 3.2.7 已纯化蛋白的超滤浓缩 | 第40-41页 |
| 3.2.8 Bradford 法测定浓缩后蛋白的浓度 | 第41页 |
| 3.3 结果 | 第41-44页 |
| 3.3.1 杜氏盐藻 Prdx1 可溶性蛋白诱导表达条件优化 | 第41-42页 |
| 3.3.2 杜氏盐藻 Prdx1 可溶性蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| 3.3.3 已纯化蛋白的超滤浓缩 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 3.5 结论 | 第45-46页 |
| 4 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白与 RNA 的相互作用验证及功能预测 | 第46-54页 |
| 4.1 材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验设备 | 第46页 |
| 4.1.2 酵母菌菌种及杜氏盐藻藻种 | 第46页 |
| 4.1.3 实验所用试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.4 常用试剂的配置 | 第47页 |
| 4.2 方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 回交实验 | 第47-48页 |
| 4.2.2 体外实验 | 第48-49页 |
| 4.3 结果 | 第49-52页 |
| 4.3.1 回交实验 | 第49-50页 |
| 4.3.2 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白与 RNA 的相互作用 | 第50页 |
| 4.3.3 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白对 RNA 的保护作用 | 第50-51页 |
| 4.3.4 杜氏盐藻 Prdx1 蛋白对 mRNA 的保护作用 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 结论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 综述 | 第58-67页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |
