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苯扎氯铵致结膜下组织纤维化机制的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
CATALOGUE第11-15页
第一章 前言第15-26页
    1.1 苯扎氯铵与结膜下组织纤维化第15-20页
        1.1.1 苯扎氯铵及其结构第15-16页
        1.1.2 苯扎氯铵的杀菌作用第16页
        1.1.3 苯扎氯铵是滴眼液中最常用的防腐剂第16-17页
        1.1.4 苯扎氯铵的眼表毒性研究第17-18页
            1.1.4.1 临床前研究第17-18页
            1.1.4.2 临床研究第18页
        1.1.5 结膜下组织纤维化第18-20页
            1.1.5.1 组织纤维化第18-19页
            1.1.5.2 滴眼液中的苯扎氯铵与结膜下组织纤维化第19-20页
    1.2 TGF-β信号通路与结膜下组织纤维化第20-23页
        1.2.1 TGF-β及其受体第20-21页
        1.2.2 TGF-β/Smads信号通路第21页
        1.2.3 TGF-β/Smads信号通路与器官纤维化的关系第21-22页
        1.2.4 TGF-β/Smads信号通路与眼部纤维化的关系第22-23页
    1.3 环氧合酶-2与结膜下组织纤维化第23-25页
        1.3.1 环氧合酶的简介第23页
        1.3.2 COX-2参与多种疾病的病理过程第23-24页
        1.3.3 COX-2与器官组织的纤维化第24-25页
        1.3.4 COX-2与TGF-β在纤维化过程中的作用第25页
    1.4 本论文研究的意义第25-26页
第二章 实验材料与方法第26-40页
    2.1 实验材料和实验试剂第26-31页
        2.1.1 实验动物、细胞株第26页
        2.1.2 主要化学试剂和耗材第26-27页
        2.1.3 抗体第27页
        2.1.4 细胞培养试剂第27页
        2.1.5 主要仪器第27-29页
        2.1.6 主要溶液的配制第29-31页
            2.1.6.1 组织染色相关溶液第29页
            2.1.6.2 细胞培养相关溶液第29-30页
            2.1.6.3 蛋白质抽提及电泳相关溶液第30-31页
            2.1.6.4 其他溶液第31页
    2.2 实验方法第31-40页
        2.2.1 动物实验第31-33页
            2.2.1.1 动物处理第31页
            2.2.1.2 球结膜组织蛋白的提取第31页
            2.2.1.3 球结膜组织RNA的提取第31-32页
            2.2.1.4 石蜡切片的制备第32-33页
        2.2.2 细胞实验第33-35页
            2.2.2.1 原代大鼠球结膜下成纤维细胞(CFs)的培养第33页
            2.2.2.2 细胞计数第33页
            2.2.2.3 细胞处理第33-34页
            2.2.2.4 细胞的存活率测定(CCK-8检测)第34页
            2.2.2.5 细胞蛋白的提取第34页
            2.2.2.6 细胞RNA的提取第34-35页
        2.2.3 Western Blot免疫印迹分析第35-36页
            2.2.3.1 BCA法测定蛋白浓度第35页
            2.2.3.2 Western Blot步骤第35-36页
        2.2.4 QRT-PCR反应第36-38页
            2.2.4.1 逆转录第36页
            2.2.4.2 RT-PCR反应第36-37页
            2.2.4.3 QPCR反应第37-38页
        2.2.5 组织学和免疫组织化学染色第38-40页
            2.2.5.1 H&E染色第38页
            2.2.5.2 PAS染色第38-39页
            2.2.5.3 苦味酸-酸性品红染色第39页
            2.2.5.4 PMN及ED1抗体的免疫组织化学染色第39-40页
第三章 结果第40-54页
    3.1 0.01%BAC诱导大鼠结膜下组织纤维化第40-44页
    3.2 0.01%BAC促进大鼠球结膜组织细胞外基质的表达第44-45页
    3.3 0.01%BAC激活大鼠球结膜组织TGF-β1/Smad3信号通路第45-47页
    3.4 低浓度BAC对结膜下成纤维细胞(CFs)无毒性影响第47-48页
    3.5 低浓度BAC刺激CFs细胞外基质和TGF-β1/Smad3信号通路相关分子的表达第48-49页
    3.6 低浓度BAC通过TGF-β1/Smad3信号通路刺激CFs表达细胞外基质第49-51页
    3.7 BAC上调球结膜组织和CFs COX-2的表达第51-52页
    3.8 低浓度BAC通过上调COX-2表达激活TGF-β1/Smad3信号通路第52-54页
第四章 讨论第54-57页
第五章 结论第57-58页
参考文献第58-67页
附录一 在学期间发表论文第67-68页
附录二 会议摘要第68-69页
附录三 综述第69-73页
致谢第73-74页

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