摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
CATALOGUE | 第11-15页 |
第一章 前言 | 第15-26页 |
1.1 苯扎氯铵与结膜下组织纤维化 | 第15-20页 |
1.1.1 苯扎氯铵及其结构 | 第15-16页 |
1.1.2 苯扎氯铵的杀菌作用 | 第16页 |
1.1.3 苯扎氯铵是滴眼液中最常用的防腐剂 | 第16-17页 |
1.1.4 苯扎氯铵的眼表毒性研究 | 第17-18页 |
1.1.4.1 临床前研究 | 第17-18页 |
1.1.4.2 临床研究 | 第18页 |
1.1.5 结膜下组织纤维化 | 第18-20页 |
1.1.5.1 组织纤维化 | 第18-19页 |
1.1.5.2 滴眼液中的苯扎氯铵与结膜下组织纤维化 | 第19-20页 |
1.2 TGF-β信号通路与结膜下组织纤维化 | 第20-23页 |
1.2.1 TGF-β及其受体 | 第20-21页 |
1.2.2 TGF-β/Smads信号通路 | 第21页 |
1.2.3 TGF-β/Smads信号通路与器官纤维化的关系 | 第21-22页 |
1.2.4 TGF-β/Smads信号通路与眼部纤维化的关系 | 第22-23页 |
1.3 环氧合酶-2与结膜下组织纤维化 | 第23-25页 |
1.3.1 环氧合酶的简介 | 第23页 |
1.3.2 COX-2参与多种疾病的病理过程 | 第23-24页 |
1.3.3 COX-2与器官组织的纤维化 | 第24-25页 |
1.3.4 COX-2与TGF-β在纤维化过程中的作用 | 第25页 |
1.4 本论文研究的意义 | 第25-26页 |
第二章 实验材料与方法 | 第26-40页 |
2.1 实验材料和实验试剂 | 第26-31页 |
2.1.1 实验动物、细胞株 | 第26页 |
2.1.2 主要化学试剂和耗材 | 第26-27页 |
2.1.3 抗体 | 第27页 |
2.1.4 细胞培养试剂 | 第27页 |
2.1.5 主要仪器 | 第27-29页 |
2.1.6 主要溶液的配制 | 第29-31页 |
2.1.6.1 组织染色相关溶液 | 第29页 |
2.1.6.2 细胞培养相关溶液 | 第29-30页 |
2.1.6.3 蛋白质抽提及电泳相关溶液 | 第30-31页 |
2.1.6.4 其他溶液 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-40页 |
2.2.1 动物实验 | 第31-33页 |
2.2.1.1 动物处理 | 第31页 |
2.2.1.2 球结膜组织蛋白的提取 | 第31页 |
2.2.1.3 球结膜组织RNA的提取 | 第31-32页 |
2.2.1.4 石蜡切片的制备 | 第32-33页 |
2.2.2 细胞实验 | 第33-35页 |
2.2.2.1 原代大鼠球结膜下成纤维细胞(CFs)的培养 | 第33页 |
2.2.2.2 细胞计数 | 第33页 |
2.2.2.3 细胞处理 | 第33-34页 |
2.2.2.4 细胞的存活率测定(CCK-8检测) | 第34页 |
2.2.2.5 细胞蛋白的提取 | 第34页 |
2.2.2.6 细胞RNA的提取 | 第34-35页 |
2.2.3 Western Blot免疫印迹分析 | 第35-36页 |
2.2.3.1 BCA法测定蛋白浓度 | 第35页 |
2.2.3.2 Western Blot步骤 | 第35-36页 |
2.2.4 QRT-PCR反应 | 第36-38页 |
2.2.4.1 逆转录 | 第36页 |
2.2.4.2 RT-PCR反应 | 第36-37页 |
2.2.4.3 QPCR反应 | 第37-38页 |
2.2.5 组织学和免疫组织化学染色 | 第38-40页 |
2.2.5.1 H&E染色 | 第38页 |
2.2.5.2 PAS染色 | 第38-39页 |
2.2.5.3 苦味酸-酸性品红染色 | 第39页 |
2.2.5.4 PMN及ED1抗体的免疫组织化学染色 | 第39-40页 |
第三章 结果 | 第40-54页 |
3.1 0.01%BAC诱导大鼠结膜下组织纤维化 | 第40-44页 |
3.2 0.01%BAC促进大鼠球结膜组织细胞外基质的表达 | 第44-45页 |
3.3 0.01%BAC激活大鼠球结膜组织TGF-β1/Smad3信号通路 | 第45-47页 |
3.4 低浓度BAC对结膜下成纤维细胞(CFs)无毒性影响 | 第47-48页 |
3.5 低浓度BAC刺激CFs细胞外基质和TGF-β1/Smad3信号通路相关分子的表达 | 第48-49页 |
3.6 低浓度BAC通过TGF-β1/Smad3信号通路刺激CFs表达细胞外基质 | 第49-51页 |
3.7 BAC上调球结膜组织和CFs COX-2的表达 | 第51-52页 |
3.8 低浓度BAC通过上调COX-2表达激活TGF-β1/Smad3信号通路 | 第52-54页 |
第四章 讨论 | 第54-57页 |
第五章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
附录一 在学期间发表论文 | 第67-68页 |
附录二 会议摘要 | 第68-69页 |
附录三 综述 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-74页 |