| 前言 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-13页 |
| 第2章 综述 | 第13-21页 |
| 2.1 常用的膀胱癌干细胞标志物 | 第13-19页 |
| 2.1.1 细胞表面分子标志物 | 第13-15页 |
| 2.1.2 乙醛脱氢酶 1 | 第15-16页 |
| 2.1.3 细胞角蛋白 | 第16-17页 |
| 2.1.4 OCT-4 | 第17页 |
| 2.1.5 Nanog、Bmi-1 | 第17-18页 |
| 2.1.6 ABCG2 | 第18页 |
| 2.1.7 MAGE-A3 | 第18-19页 |
| 2.2 膀胱癌干细胞标志物在膀胱癌的诊疗中的应用研究 | 第19-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 3.1.1 试剂及材料 | 第21页 |
| 3.1.2 质粒、菌种与细胞 | 第21-22页 |
| 3.1.3 培养基与溶液配方 | 第22-23页 |
| 3.1.4 主要实验设备 | 第23页 |
| 3.2 引物设计与合成 | 第23-25页 |
| 3.2.1 ALDH1 基因启动子引物设计 | 第23-24页 |
| 3.2.2 Red 基因片段引物设计 | 第24页 |
| 3.2.3 polyA 片段引物设计 | 第24-25页 |
| 3.3 FU-pALDH1-R-CGW 重组质粒的构建及鉴定 | 第25-38页 |
| 3.3.1 ALDH1 基因启动子序列的基因克隆 | 第26-30页 |
| 3.3.2 红色荧光蛋白 dsRed-express 的扩增 | 第30-32页 |
| 3.3.3 pEASYT1-pALDH1-Red 重组质粒的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3.4 pEASYT1-pALDH1-Red-pCMV 重组质粒的构建及鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.5 pEASYT1-pALDH1-Red-PolyA-pCMV 重组质粒的构建及鉴定 | 第34-37页 |
| 3.3.6 FU-pALDH1-R-CGW 重组质粒的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4 慢病毒转染平台的建立 | 第38-42页 |
| 3.4.1 无内毒素质粒的制备 | 第38-39页 |
| 3.4.2 脂质体介导的 293T 细胞的转染 | 第39-42页 |
| 第4章 实验结果与分析 | 第42-54页 |
| 4.1 FU-pALDH1-R-CGW 重组质粒的构建及鉴定 | 第42-51页 |
| 4.1.1 ALDH1 基因启动子序列的 PCR 扩增、T-A 克隆及鉴定 | 第42-43页 |
| 4.1.2 Red 基因的 PCR 扩增、T-A 克隆及鉴定 | 第43-45页 |
| 4.1.3 重组质粒 pEASYT1-pALDH1-Red 的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 4.1.4 pEASYT1-pALDH1-Red-pCMV 重组质粒的构建及鉴定 | 第46-48页 |
| 4.1.5 pEASYT1-pALDH1-Red-polyA-pCMV 重组质粒的构建及鉴定 | 第48-49页 |
| 4.1.6 FU-pALDH1-R-CGW 重组质粒的构建及鉴定 | 第49-51页 |
| 4.2 慢病毒转染 293T 细胞实验平台的建立 | 第51-54页 |
| 4.2.1 质粒浓度的测定及鉴定 | 第51页 |
| 4.2.2 293T 细胞的转染条件的摸索 | 第51-54页 |
| 第5章 讨论 | 第54-58页 |
| 第6章 结论与展望 | 第58-59页 |
| 第7章 创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
